Resultats del projecte de recerca coordinat per MICOFORA i l´IRTA per mesurar les concentracions de miceli de tòfona negra al sòl i probar dosis d´espores als pous per afegir el sexe complementari.

1. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
EVOLUCIÓ DE LA CONCENTRACIÓ DE MICELI DE TUBER
MELANOSPORUM AL SÒLAL LLARG DE L´ANY
I
EVALUACIÓ DE LA BIODIVERSITAT FUNGICA EN ARBRES PRODUCTIUS
I NO PRODUCTIUS
Marcos Morcillo1, Javier Parladé2, Joan Pera2, Mónica Sanchez1, Xavier Vilanova1
1 MICOLOGIA FORESTAL & APLICADA. Cami Del Fou, s/n 08459 Sant Antoni De
Vilamajor. (Barcelona) SPAIN
2 IRTA. Proteccio Vegetal Sostenible Ctra. de Cabrils, Km 2, 08348 Cabrils
(Barcelona) SPAIN
marcosmorcillo@micofora.com xavier.parlade@irta.cat

2. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Objectius
1) evaluar les dinamiques estacionals del miceli de Tuber melanosporum en
plantatió
2) desenvolupar i validar un sistema per reinocular tòfona negra en plantacions
preproductives per afegir el sexe complementari
3) Determinar la biodiversitat d´altres fongs en tofoneres d´arbres productius i
no productius i analitzar com aquesta es veu afectada quan introduim més
espores

3. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Camps d´assaig
2 plantacions amb sòls francs
2013, 2014
Granollers: 10 anys Q. ilex, sense reg
- Concentració de miceli al llarg de l´any
- Metagenomica – biodiversitat fúngica
Batea: 4 anys Q. ilex, reg gota a gota
- Concentració de miceli al llarg de l´any
- Metagenomica – biodiversitat fúngica
- Pous-reinoculacions esporals

4. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Quantificació biomassa miceliar al sòl (qPCR)
kit Power Soil (MoBio) 0,25 g. Soil.
sondes Taqman-MGB, for T. melanosporum,
Standard curves with known mycelium quantities for each trial site.
Parladé et al. 2013. Mycorrhiza 23:99–106.
Distance to tree
(m)
Concentration of
mycelum mg/g *
0,2 8,090
1,5 0,008
n=6 per cada tractament

5. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Evolució concentració
miceli tòfona al llarg de l´any

6. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Evaluació de la diversitat fúngica
Plataformes Metagenomiques
n=6 per tractament + control.
Mostres barrejades per un sol anàlisi
(no replicat)

7. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Diversitat fúngica
plantació Q. ilex de 10 anys x T. Melanosporum

8. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Diversitat fúngica
plantació Q. ilex de 10 anys x T. Melanosporum

9. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Substrats especials per truficultura
Millorar
contingut
orgànic
Millorar
textura y
forma de la
tòfona

10. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Pous amb substrat
CONTRES
PROS
menys Leiodes
Millors collites
Tòfona extra
Es cullen tòfones
inmadures
Reducció pH
Introducció altres
tòfones o plagues

11. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Com s´apliquen aquests substrats?

12. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Sovint no podem mecanitzar o
no podem fer els pous a finals de campanya…
Vam voler analitzar:
• Efecte dosis
• Efecte moment de reinocular

13. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
qPCR després reinoculations
Concentració miceli de T. melanosporum al juny.
Control vs. Inoculacions en camp(5g/tree) a l´abril.
Diferencies significatives
Concentració de miceli T. Melanosporum
Control vs. Inoculacions en camp al Juny
Dosi 1, 2 i 3 corresponen a 9, 5 i 2 grams de tòfona/arbre
No hi ha diferencies significatives

14. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
METAGENOMICA
biodiversitat després de les reinoculacions
Plantació 4 anys no productiva
2 mesos després pous
4 mesos després pous

15. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Conclusions
• Reg gota a gota sembla no afavorir expansió miceli al sòl. 1000 vegades menys fora la bossa de humitat!
• Hi ha diferencies estacionals en la concentració de miceli de tòfona al sòl. Dinàmica depenent de reg.
• Significativament més miceli i sequencies als arbres productius.
• Idem per Scleroderma. Podría ser un fong amb efectes positius?
• Fer pous a l´abril augmenta les sequencies de Tuber sp. i la concentració de miceli dos mesos després.
Quan inoculem al juny amb 5grams/arbre arribem a la mateixa quantitat de sequencies, però no a menor
dosi. No tindria sentit treballar a dosis molt altes d´espores.
No obstant les inoculacions a l´abril foren les recomenables per no trepitjar amb tractors ni afectar el miceli
actiu al juny.

16. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
Poden aquestes corves ser utilitzades com a referencia?
Future
Els valors absoluts que ens dónen les PCR quantitatives són dificilment comparables entre
zones geogràfiques distants o quan mostrejades en diferents moments. Però és una molt
bona eina per comparar tractaments de una mateixa plantació quan es mostrejen alhora.
Aquests resultats tenen aplicació directe en truficultura:
- Traçabilitat del miceli de tòfona al sòl
- Mètodes per incrementar la collita
- Evaluar els efectes dels tractaments en les comunitats microbianes beneficioses per la
tofonera.
Els resultats metagenomics són quantitatius, ens permetrien detectar especies fúngiques o
bacterianes associades (positiva o negativament) a la producció de tòfones.

17. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala

18. NuevaZelanda
Suecia
Finlandia
China
Nicaragua
Siberia
Chile
Japón
Guatemala
marcosmorcillo@micofora.com
xavier.parlade@irta.cat
Project Gencat 3844 Funded by