La espectrofotometría uv-visible (UV-VIS) es una práctica analítica que permite determinar la concentración de un compuesto en solución. La espectrofotometría uv-visible se basa en la medición de absorción de radiación UV o visible por determinadas moléculas, la radiación correspondiente a estas regiones del espectro electromagnético causa transiciones electrónicas a longitudes de onda característica de la estructura molecular de un compuesto.
Aplicación de la espectrofotometría uv-visible
La espectrofotometría uv-visible es utilizada generalmente en la valoración cuantitativa de soluciones de iones metálicos de transición y compuestos orgánicos, ambos absorben la luz. La Ley de Beer-Lambert estipula que la absorbancia de una solución es directamente proporcional de la concentración de la solución, por lo que la espectrofotometría uv-visible puede usarse para determinar la concentración de la solución.
Espectrofotómetro uv-visible
El espectrofotómetro uv-visible es un instrumento óptico que tiene la capacidad de resolver radiaciones de diferentes longitudes de onda dentro del rango ultravioleta y visible (por lo general este rango se encuentra dentro de los valores de 190 a 1,100 nm).
Descripción del equipo:
Está compuesto por una fase luminosa, monocromador, elementos fotodetectores y un sistema de registro.
• Fase luminosa: una bombilla pequeña de filamento enrollado es ideal para concentrar la luz en un haz intenso. La incandescencia causada por la luz visible de la lámpara de tungsteno-halógeno se basa en las altas temperaturas de calentamiento que alcanzan el filamento.
• Moncromadores: descompone la luz incidente de un espectro de luz, es decir, se encarga de separar y seleccionar la radiación de onda que se quiere analizar. Está compuesto por las rendijas de entradas y salida de, colimadores y el elemento de dispersión, en los monocromadores convencionales se usa el prisma como elemento de dispersión.
2. FUNDAMENTO
• Esta se basa en el análisis de la cantidad de radiación
electromagnética,(en el rango de longitud de honda UV-visible)
que puede absorber o transmitir una muestra en función de la
cantidad de sustancia presente.
Un grafico o representación de la
respuesta del sistema
En función de la longitud de honda
se le denomina espectro
electromagnético.
3. • La espectrofotometría UV-vis va de acuerdo al
espectro electromagnético Cuya longitud de
honda comprende de los 100 a los 800
nanómetros.
-Su efecto sobre la materia es producir
transiciones electrónicas
entre los orbitales atómicos
y/o moleculares de la sustancia a analizar.
4. • En la espectrofotometría UV-visible ,una molécula ,aunque puede
tratarse de una especie monoatómica, puede absorber UV-visible
y la energía adquirida del sistema causa la transición de un
electrón, de un estado basal a un estado excitado.
5. CUAL ES SU FUNCIÓN
• Se utiliza mas que nada en la
determinación cuantitativa de soluciones
de iones metálicos de transición ,como los
iones de Pb, Mg, Ca entres otros metales
,así como también compuestos orgánicos
muy conjugados como el
CH3-CH2-OH ,N(CH3)3, CH3Cl, según
su absorbancia.
6. • Para la medición de la intensidad de
absorción se utilizan espectrofotómetros en
los cuales se puede medir la absorbancia o
la transmitancia.
• Absorbancia-es la cantidad de intensidad
de luz que absorbe la muestra
• Transmitancia- se define como la fracción
de luz incidente, a una longitud de onda
especificada, que pasa a través de una
muestra.
7. • Establece que la absorbancia de una
solución es directamente proporcional
a la concentración de una solución.
Ley de Lambert y beer law
Por lo tanto puede emplearse para
determinar la concentración de un
compuesto o un elemento en una
solución.
𝑪 = 𝚨. 𝜺. 𝜾
8. Para las mediciones analíticas es
solamente necesario tener un
espectrofotómetro UV-visible
Que permite comparar la
radiación absorbida transmitida
por una solución que contiene
una cantidad desconocida de
soluto ,con una que contiene una
cantidad conocida de la misma
sustancia.
9.
10.
11. APLICACIÓN A LOS ALIMENTOS
El plomo tiene una longitud de
onda que esta alrededor de
217 nm
La exposición al plomo puede causar anemia,
hipertensión, disfunción renal, inmunotoxicidad y
toxicidad reproductiva. Se cree que los efectos
neurológicos y conductuales asociados al plomo son
irreversibles. No existe un nivel de concentración de
plomo en sangre que pueda considerase exento de
riesgo.
12. Reactivo Log. De honda Color relativo Material de
cubeta
Daños ala
salud
Plomo 217 nm Violeta Cuarzo fundido Hipertensión y
anemia
Cadmio 520 nm Verde Plástico o
vidrio
fallas renales
Mercurio 543.12 nm Verde Plástico o
vidrio
Afecta al S. inmune y
a los pulmones
Magnesio 285.2 nm Violeta Cuarzo fundido Diarrea y vomito
calcio 422.12 nm Violeta Vidrio o
plástico
Corazón, estomago y
fallas renales
nitrógeno 543 nm Verde Plástico o de
vidrio
Pulmones y
corazón
