FISH Y COMPARACION CON OTRAS TECNICAS, PRESUPUESTO E INTERPRETACION

1. INMUNODIAGNOSTICO I Y II
LINDSAY BORJAS

2. DEFINICION
La técnica consiste en preparar cortas secuencias de
DNA de una sola hebra, llamadas sondas, que son
complementarias de las secuencias de DNA que se
quieren marcar y examinar.
Es muy utilizada en la detección de anomalías
cromosómicas.
alta sensibilidad y especificidad

3. SONDAS
Son secuencias cortas de ADN de una sola hebra, que
son complementarias de las secuencias de ADN que se
quieren marcar y examinar.

4. Sondas especificas
de un locus
Hibridan a una región
particular de un gen. Esta
sonda es útil cuando se ha
aislado una pequeña parte
de un gen y se quiere
averiguar en que cromosoma
se encuentra.
Sondas
centroméricas
contienen secuencias
complementarias de las
secuencias repetidas que se
encuentran en los centrómeros
de los cromosomas. Como
pueden utilizarse sondas de
diferentes colores, cada
cromosoma puede ser marcado
de manera distinta, con lo que
se puede averiguar si un
individuo tiene el número
correcto
Sondas para
cromosomas
completos
Son colecciones de sondas de
un tamaño reducido, cada una
de las cuales se hibrida a una
secuencia diferente a lo largo
de todo un cromosoma.
Utilizando estas librerias de
sondas, se puede marcar todo
un cromosoma generando un
cariotipo espectral.

5. PROCEDIMIENTO
A . Moter ,U . B . Gobel,2000

6. R. Amann, B. Fuchs, 2008

7. Bishop,2010

8. HISTORIA
Las primeras técnica de FISH fue desarrollada,
independientemente por Padue, Gall, John y sus
colaboradores en 1969, pero fue propuesto por Olsen.
En 1989, DeLong y su equipo de trabajo emplearon
oligonucleótidos marcados con fluorocromos para
detectar células microbianas crecidas de manera
individual.

9. APLICACIONES
Detecta anomalías: Aneuploidía, la pérdida de una
región cromosómica, un cromosoma entero o para
monitorizar la progresión de una aberración.
En el diagnóstico de una enfermedad genética.
FISH se puede aplicar a la investigación como: el
mapeo de genes, identificación de nuevos oncogenes
que contribuyen a diversos tipos de cáncer.

11. VENTAJA
Proporciona una resolución considerablemente
superior a la de las técnicas de bandas de alta
resolución; ya que puede detectar deleciones de
tamaño tan pequeño como 1 millón de pares de bases.
Pueden detectar aneuploidias empleando cromosomas
en interfase, no es necesario estimular a las células
para que se dividan con el fin de obtener cromosomas
en metafase.

12. COMPARACION
Convencional: Técnicas de bandeo de cromosomas
(tinción Giemsa) revolucionó el análisis citogenético y
han sido fundamentales en la comprensión de los
cambios genéticos en ambas enfermedades
constitucionales y adquiridos.
La resolución del análisis de bandas es de tal manera
que sólo puede detectar reordenamientos que
implican 0,3 Mb de ADN.
Técnicas de bandas se limitan a células mitóticas
activas.

13. La tinción de cromosomas con Giemsa permite el
análisis de los diferentes tipos como: cromosomas
policéntricos, cromosomas en anillo, intercambios de
cromátidas y fragmentos.
Otros tipos de aberraciones cromosómicas tales como
translocaciones e inversiones recíprocas no son
normalmente reconocible con la tinción de Giemsa,
pero pueden ser visualizados por FISH.

15. Nueva: La tecnología de Microarreglos.
Analizar diferentes tipos de muestras biológicas
(tejidos, proteínas y material genético) y otras
moléculas de manera simultánea por ensayo.
La versatilidad de esta técnica permite utilizarla en
estudios de dosis-respuesta, para establecer perfiles de
expresión diferencial de genes en condiciones
experimentales distintas (enfermedades y
tratamientos) en el análisis de polimorfismos,
presencia de metilaciones, mutaciones puntuales e
identificación de blancos terapéuticos.

16. E. Medina, 2009

17. Bishop,2010

18. INTERPRETACION

19. Internacional System for Human Cytogenetics Nomenclature (ISCN),
2009.

20. IATREIA Vol 24(3) septiembre 2011

21. Acta méd. costarric. Vol 53 (1), enero-marzo 2011

22. Acta méd. costarric. Vol 53 (1), enero-marzo 2011

23. Acta méd. costarric. Vol 53 (1), enero-marzo 2011

24. ESTUDIO DE MERCADO Y COSTOS

26. APLICACIONES A NIVEL NACIONAL
Lab. Citogenetica HNN, 2014

27. GRACIAS