Aula prática lecionada no Laboratório de Graduação em Bioquímica (LGBioq) da Universidade Federal do Maranhão (UFMA).

1. MONITORIABIOQUIMICA
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2. Ácidos Nucleicos
Universidade Federal do Maranhão

3. Introdução
• Os ácido nucleicos ocorrem em todas as célu-
las vivas e são responsáveis por:
• Armazenamento e transmissão de informação
genética;
• Tradução dessa informação genética, expressa
pela síntese precisa das proteínas característi-
cas.

4. Introdução
• Os ácidos nucleicos são biopolímeros de
mononucleotídeos ou nucleotídeos, de alto peso
molecular, unidos por ligações covalentes do tipo
fosfodiéster entre C5 de um mononucleotídeo e C3
do mononucletídeo seguinte, em sentido vertical - daí
ser 5’-3’.
• Cada mononucleotído ou nucleotídeo é composto
de:
• Açúcar;
• Base nitrogenada;
• Fosfato.
Nucleosídeo

5. SENTIDOVERTICAL
SENTIDO HORIZONTAL
TERMINAL
3’
TERMINAL
5’
TERMINAL
3’
TERMINAL
5’

6. Introdução
• As diferenças entre os ácidos nucleicos re-
side no nucleosídeo:
• O ácido desoxirribonucleico (ADN)
apresenta o açúcar 2-desoxirribose e as
bases nitrogenadas guanina (G), citosina
(C), adenina (A) e timina (T).
• O ácido ribonucleico (ARN) apresenta o
açúcar D-ribose e as bases nitrogenadas
guanina (G), citosina (C), adenina (A) e
uracila (U).

7. • A 2-desoxirribose
ou D-desoxirribose
é uma aldopentose.
D-Ribose vs. 2-Desoxirribose
• A D-ribose
também é uma
aldopentose.
x
2 2

8. ADN
• O ADN é composto de uma dupla-fita unida
através de ponte de hidrogênio entre bases
nitrogenadas em sentido horizontal.
• Existem 2 pontes de hidrogênio entre A e T e
3 pontes de hidrogênio entre G e C, sendo
estas, portanto, mais estáveis.
• Na célula humana existe:
• ADN celular em maior concentração;
• ADN mitocondrial, de origem materna.

9. Pontes de
hidrogênio

10. ARN
• O ARN é composto de fita simples, sinteti-
zada a partir de mecanismos de transcrição.
• O ARN possui diferentes classes:
• ARN mensageiro ou ARNm;
• ARN ribossômico ou ARNr;
• ARN transportador ou ARNt;
• Pequenas moléculas de RNA.

11. ARNm
• O ARNm transmite a informação genética
ao ribossomo partir de ADN.

12. ARNr
• O ARNr é um dos componentes do ribossomo,
decodificando o ARNm.
• O ARNr da subunidade grande do ribossomo
ou atua como ribozima para formação de liga-
ções peptídicas.
• O ARNr possibilita a síntese de aminóacidos
únicos ou de cadeias peptídicas diversas.

13. ARNt
• O ARNt é responsável pelo transporte de
aminoácidos únicos ou cadeias peptídicas de
tamanhos diversos aos sítios celulares de
carência.

14. Extração de ADN
Alquilbenzeno linear sulfonado
Cloreto de sódio
Álcool etílico 95GL (álcool etílico a 95%) a frio
❖ Fundamento teórico: sob a ação lítica do alquilbenzeno linear
sulfonado, as bicamadas lipídicas das membranas celular e
nuclear são rompidas, de forma a facilitar a ação neutralizante
do cloreto de sódio sobre as cargas negativas dos grupos
fosfatos dispotos na molécula de ADN, assim diminuindo sua
solubilidade e induzindo seu agregamento. O álcool etílico a
frio potencializa a indução de agregamento do cloreto de sódio.

15. Procedimentos Práticos
100mL de
água destilada
60mL de
detergente
5g de NaCl
ESMAGAR
ADICIONARAO
BÉQUERPREPARADO
Banho termostático
por cerca de 15min

16. Procedimentos Práticos
Banho de gelo
por 5min
Filtração em
novo recipiente
Adicionar 100mL de
álcool etílico a frio
vagarosamente pelas
bordas do novo
recipiente
Fazer movimentos
circulares

17. Procedimentos Práticos
❖ Após a devida realização do experimento espera-se o aparecimento de
material biológico agregado, caracterizado como ADN.
O alquilbenzeno linear sulfonado é um surfactante aniônico
presente em detergentes e cuja citotoxicidade reside em
seu anel aromático estar muito próximo da extremidade de
sua longa cadeia alquila, isto é, seus grupamentos polar e
apolar são próximos; assim, há pertubações nos fosfolípides
das membranas plasmática e nuclear e lise. O cloreto de
sódio é diponibilizador de cátions, que logo se associam aos
grupamentos fosfato, que se comportam como ânions,
neutralizando a molécula de ADN e diminuindo sua
solubilidade. Por fim, o álcool etílico a frio desidrata a
molécula de ADN, diminuindo ainda mais sua solubilidade,
que então se retira da solução e se precipita.

18. Referências
• HIRANO, ZMB et al. Bioquímica - Manual
Prático. 1 ed. Blumenau: Edifurb, 2008.
• DOS SANTOS, APSA et al. Bioquímica
Prática. Disponível em: <http://
www.repositorio.ufma.br:8080/jspui/handle/
1/445>.Acesso em: 3 set 2013.