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Bioq-determinacion de biomoleculas
1. UNIVERSIDA TÉCNICA DE
MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
Y DE LA SALUD
ECUELA DE ENFERMERIA
ASIGANTURA:
BIOQUIMICA
TEMA:
COMO DETERMINAR BIOMOLECULAS
CATEDRATICO:
BIOQ. CARLOS GARCIA MSC
ALUMNA:
GABRIELA VEGA
MACHALA-EL ORO-ECUADOR
2. ¿¿¿QUE SON BIOMOLECULAS???
Son la unión de distintos
grupos funcionales a la
cadena de carbono
determinan un conjunto
muy variado de
moléculas que son
esenciales para la vida.
GLUCIDOS
LIPIDOS
PROTEINAS
ACIDOS
NUCLEICOS
3. ¿¿QUÉ SON GLUCIDOS??
¿GLUCOSA…??
• Denominados también hidratos de carbono
están formados generalmente por:
C,H,O,s,p
• Son depósitos de energía química que es
liberada en cuanto el cuerpo la necesita.
• La cadena de glucosa tiene 6carbonos ,1
aldehído, varios grupo de alcohol, y
completando las 4 uniones de carbono
tenemos átomos de hidrogeno, así:
4. !!PARA RECORDAR!!
En todas las biomoleculas :
MONOMERO:son las partículas
individuales
OLIGOMERO: formados por la
union de 2 a 10 monómeros.
POLIMERO:formados por la
unión de mas de 10 monomeros
Características que diferencian a los glúcidos:
En forma general los glúcidos se clasifican así:
5. ¿¿¿QUÉ SON LOS LÍPIDOS???
• Son la fuente de reserva energética que se caracteriza por ser insolubles en agua,
además ,por ser buenos aislantes térmicos además de actuar como lubricantes ,
protección , impermeabilizantes y de ser componentes importantes de la
membrana plasmática de las células tanto en vegetales como en animales.
Clasificación de los lípidos :
6. ¿¿¿QUÉ SON LAS PROTEÍNAS???
• Son moléculas complejas formada por la unión de aminoácidos ,es uno
de os componentes mas importante de los seres vivos ,tiene
importancia a nivel estructural que al degradarse se convierten en
aminoácidos ,algunos aminoácidos son producidos por el mismo
organismo deben ser incorporados necesariamente a la dieta.
Observarás también que esta proteína tiene una
forma muy compacta que se la clasifica como
proteína globular.
Aquellas proteínas en donde la cadena está mucho
más “estirada” se clasifican como fibrosas.
7. ¿¿¿QUÉ SON LAS ENZIMAS???
• Las enzimas cumplen la función vital de acelerar la velocidad
de las reacciones químicas ,es decir que las enzimas hacen
que las transformaciones químicas de las sustancias ocurran
en tiempos que sean compatibles para la vida .
8. CARACTERÍSTICAS DE LAS ENZIMAS
Todas las enzimas son proteínas
Son especificas ,es decir que cada enzima solo puede acelerar un tipo de reacción
No son alteradas por la reacción en la que intervienen , es decir, luego de la reacción pueden
actuar nuevamente.
Son eficientes en cantidades muy pequeñas
• Cada enzima, por la forma del sitio activo,
puede unirse sólo a aquel sustrato que tenga
una forma complementaria. Por eso decimos
que la acción de las enzimas es específica.
• Se establece una cadena enzimática donde el
sustrato inicial sufre sucesivas
transformaciones para obtener un producto
final muy diferente. En los seres vivos
generalmente existe gran cantidad de este
tipo de cadenas.
9. ¿¿CÓMO DETERMINAR BIOMOLECULAS??
• Podemos determinar las
biomoleculas por métodos :
• Tratamiento con aldehídos
• De modificación selectiva
• Aplicación de radiación
electromagnética.
• Métodos químicos
• Fotooxidación
• Métodos clásicos
• Espectrofotometría
• Métodos electroquímicos:
Reacción de Biuret
Nitración ,cloración ,bromacion y
iodacion en residuos de ácidos.
• Reacciones de saponificación
• Ingeniería de proteínas.
• Modificación química de los
residuos de metionina y tirosina
• Hidrolisis de oxidación
electroquímica (directa o indirecta)
• Microscopía de fuerza atómica.
• Técnicas ópticas
10. ASPECTOS INNOVADORES
La aplicación de estas técnicas tienen consecuencias estructurales y
funcionales .de este modo se puede obtener novedosas aplicaciones tales
como la obtención de factores
11. IDENTIFICACION DE HIDRATOS DE CARBONO:GLUCOSA
ENSAYO REACTIVO DE BENEDICT:
• En u tubo de ensayo mezclar 3ml de solución al 1% de glucosa con 2 o 3
gotas de reactivo de BENEDICT.la mezcla tiene una coloración verde
azul
• Con el mechero a baño maria (37°)calentar el tubo de ensayo con la
mezcla durante 1 o 3 minutos ,hasa que la mezcla cambie a color
amarilloverdoso,que luego cambia a color naranja y luego a color rojo
ladrillo .
• El calor favorece a la reacción
La aparición de la coloración amarillo verdoso ,anaranjado, y finalmente
rojo ladrillo,es precisamente la reaccione que indicaque en la solución
hay prescencia de glucosa, sin embargo el color determina la
concentración ya sea en mayor o menor proporción.
12. IDENTIFICACION DE ALDOSAS Y CETOSAS
ENSAYO REACTIVO DE SELINWANOF:
• El reactivo consiste en resorcinol y
acido clorhídrico concentrado
• Al calentarlas ,las cetosas son
deshidratadas mas rápido que las
aldosas
• La cetosa deshidratada reacciona con el
resorcinol para producir un color
rojo,en algunas casos suelen reaccionar
produciendo un color rosa
13. IDENTIFICACION DE LIPIDOS
• A un tubo de ensayo agregar 1ml de éter,a otro 1
ml de alcohol,a otro 1ml de agua destilada y
finalmente el ultimo con 1ml de gasolina .
Se podrá observar que:
• En el tubo 1, el aceite es soluble en éter
• En el tubo 2,existe poca solubilidad en el alcohol
• En el tubo 3 se aprecia uuna emulsion que luego
desaparecerá.(no hay solubilidad)
• En el tubo 4 también se ve solubilidad en la
gasolina.
14. IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS Y AMINOÁCIDOS
ENSAYO REACTIVO DE BIURET:
• En un tubo de ensayo mezclamos 2ml de clara de
huevo con 2ml de agua destilada .Agitamos
• Luego procedemos a unir con 30% de (NaOH) y 2
o 4 gotas de biuret
• Podemos obsevar que aparece una zona
superficial de color morada o violeta (reacción en
zona). Al transcurrir el tiempo el contenido del
tubo toma el color violáceo,debido a que de esta
manera es como se indica la pescencia de un
aminoácidos y por ende una proteína
• La clara de huevo puede ser también reemplazada
15. IDENTIFICACIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS
• La extracción de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones
salinos son atraídos hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolución y
posterior extracción de la célula.
• Se empieza por lisar (romper) las células mediante un detergente, vaciándose su
contenido molecular en una disolución tampón en la que se disuelve el ADN. En ese
momento, el tampón contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN,
carbohidratos, proteínas y otras sustancias en menor proporción. Las proteínas
asociadas al ADN, de gran longitud, se habrán fraccionado en cadenas más
pequeñas y separado de él por acción del detergente. Sólo queda, por tanto,
extraer el ADN de esa mezcla de tampón y detergente, para lo cual se utiliza
alcohol isoamílico, probablemente el único reactivo de esta práctica que no suele
haber en una cocina.
• El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que,
entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Una extracción "profesional" se
realiza añadiendo enzimas que fragmentan las moléculas de ARN e impiden que se
unan al ADN.
16.
17. GLUCOSA EN PLASMA SANGUÍNEO
• Determinado atravez del metodo de espectrofotometría
• Como ya sabemos la glucosa es la fuente principal de energía en todo ser vivo.
• Mediante esta técnica podemos determinar cuantitativamente la prescencia de este
compuesto,para valorar la glucosa en el suero sanguíneo enzimático calorimétrico en el cual
en que la glucosa presente en el suero sanguíneo es transformada por la GOD en acido
gluconico y peroxido de hidrogeno,el cual en presencia de POD se convierte en un
compuesto de color rojo que absove entre 492 y 550 nm,con un pico máximo de absrvancis a
500nm.
• Mediante este métodos obtienen valore cuantitativos por medio de la absorbancia que el
compuesto presente ,es decir a mayor absorbancia mayor concentración de glucosa ,cabe
recalcar que para esto tenemos diversas muestras que varían en concentración, que a su vez
son las que nos sirven de base para realizar la escala definitoria de la concentración y
absorbancia ,este procedimiento se lo realiza en un laboratorio que nos brinde las
condiciones optimas en cuales es indispensable el espectrofotómetro.
18. BIBLIOGRAFÍA
• -Antonio Jimeno, M. Ballesteros, A. Pardo; L, Ugedo; Biología COU, Editorial Santillana,
1992
• -Carlos A, Miguel González, Araceli del Cañizo, Ángel Costa Pérez; Biología 2º
Bachillerato; Editorial Everest 1999
• -Juan Ángel España, José G. Conde Domínguez, Antonio Fernández Diez...Actividades
Prácticas de Ciencias Naturales /1 Editorial Dossat, s.a. , 1980