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Laboratorios en reumatología

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Laboratorios en reumatología

  1. 1. Laboratorio generalen Reumato logía / Autoanticue Laura T rpos orres Rafael Tous Luz Vega David Veneg as
  2. 2. 1. Introducción 6. ANCA2. Laboratorio general en 7. Anticuerpos reumatología 8. Conclusiones0 Reactante fase aguda0 Proteínas 9. Bibliografía0 VSG3. Anticuerpos antinucleares4. Anticuerpos anti- ADN5. Anticuerpos anti- antigenos extractables del nucleo (ENA)
  3. 3. 0 El laboratorio en reumatología tiene un papel importante en la evaluación, el diagnóstico y el seguimiento de diversos padecimientos. Los anticuerpos antinucleares (ANA), los anticuerpos anti-ADN de cadena sencilla o doble (ss o dsAnti- ADN), entre otros son importantes detectarlos en pacientes con sospecha de enfermedades reumaticas.
  4. 4. 0 Análisis integral de sintomatología, examen físico y pruebas de laboratorio (no útil por si sola) 0 Laboratorio: Diagnostico, seguimiento, pronostico.http://www.google.com/imgres?q=laboratorio&um=1&hl=es&client=safari&sa=N&rls=en&biw=1024&bih=640&tbm=isch&tbnid=N30r2SInIgQdhM:&imgrefurl=http://www.sinnple.es/laboratorio-sinnple&docid=GBLfwtPvelpvZM&imgurl=http://www.sinnple.es/wp-content/uploads/2011/03/probetas.jpg&w=555&h=430&ei=Cpw1UKraM8OG6QH89YCoCw&zoom=1&iact=hc&vpx=745&vpy=175&dur=452&hovh=198&hovw=255&tx=164&ty=99&sig=115299150964895118647&page=1&tbnh=117&tbnw=151&start=0&ndsp=17&ved=1t:429,r:4,s:0,i:162
  5. 5. 0 Suero de pacientes con infecciones graves0 Procesos traumáticos, de malignidad y reacciones de hipersensibilidad.0 Asociados a procesos inflamatorios crónicos, cambian su concentración.0 PCR, complemento, ferritina, fibrinógeno, amiloide sérico a, alfa 1 antitripsina, ceruloplasmina, aptoglobina.
  6. 6. 0 Las que participan en defensa de huésped 0 Inhibidoras de proteinasas de serinas 0 Transportadoras con actividad antioxidantehttp://www.google.com/imgres?q=laboratorio&um=1&hl=es&client=safari&sa=N&rls=en&biw=1024&bih=640&tbm=isch&tbnid=GTyMOf9vyuahjM:&imgrefurl=http://www.entox.com.uy/&docid=pebJaY0r-3Yb0M&imgurl=http://www.entox.com.uy/images/laboratorio.jpg&w=1698&h=1131&ei=Cpw1UKraM8OG6QH89YCoCw&zoom=1&iact=hc&vpx=591&vpy=182&dur=1416&hovh=183&hovw=275&tx=171&ty=76&sig=115299150964895118647&page=1&tbnh=117&tbnw=163&start=0&ndsp=17&ved=1t:429,r:3,s:0,i:159
  7. 7. 0 Reconocimiento y eliminación de patógeno0 Limitar daño en el huésped0 Reducir reacción inflamatoriaLas pruebas mas frecuentemente utilizadas son la PCR y la VSG.
  8. 8. 0 Método que refleja respuesta de fase aguda0 Prueba mas solicitada en reumatología0 Alta sensibilidad y baja especificidad (inflamación)0 Prueba tamizaje0 Inflamación o no inflamaciónVelocidad (mm) con la que los eritrocitos se precipitan en una hora en una muestra de sangre no coagulada.
  9. 9. 0 Propiedades del plasma0 Tamaño, numero y forma de eritrocitos0 Fuerza de repulsión entre eritrocitos (acido sialico) con carga negativa0 VSG cuando carga negativa se neutraliza http://www.google.com/imgres? q=metodo+westergren&num=10&um=1&hl=es&client=safari&rls=en &biw=1024&bih=640&tbm=isch&tbnid=uaqhACofV1tk7M:&imgrefurl0 Método de Westergren =http://atlantemedicina.wordpress.com/category/medicina-di- laboratorio/&docid=ylqc49LyVdXQnM&imgurl=http://atlantemedicin a.files.wordpress.com/2009/06/ves2.jpg%253Fw %253D450&w=450&h=363&ei=8JM1UJyWN- OP6wGEi4DIBg&zoom=1&iact=hc&vpx=634&vpy=148&dur=236&hov h=202&hovw=250&tx=93&ty=115&sig=115299150964895118647&s qi=2&page=1&tbnh=140&tbnw=181&start=0&ndsp=15&ved=1t:429,r :3,s:0,i:78
  10. 10. 0 Se eleva 48 horas después de iniciado proceso0 Se normaliza 10 días después0 <50 años: 0-15mm/h enhombres y 0-20mm/h enMujeres0 >50 años: edad (años) / 2 http://www.google.com/imgres? q=velocidad+de+sedimentacion+globular&um=1&hl=es&client=safari&rls=en&biw=1024&bih=640&tbm=isch&tb nid=v4iSQevNziUJIM:&imgrefurl=http://labespinosa.com/index- 2.html&docid=1OqXE3PTQ3lyUM&imgurl=http://labespinosa.com/index- 2_clip_image002.jpg&w=264&h=227&ei=2Z01UN- iD4LG6wGMuIGYAQ&zoom=1&iact=hc&vpx=672&vpy=160&dur=440&hovh=181&hovw=211&tx=147&ty=81&si g=115299150964895118647&page=1&tbnh=142&tbnw=164&start=0&ndsp=16&ved=1t:429,r:4,s:0,i:81
  11. 11. Criterio dx:0Artritis temporal (mayor a 40)0Polimialgia reumática (mayor a 50) http://www.google.com/imgres? q=polimialgia+reumatica&num=10&um=1&hl=es&client=safari&rls=en&biw=1024&bih=640&tbm=isch&tbnid=batdo4U- st8G6M:&imgrefurl=http://www.ferato.com/wiki/index.php/Polimialgia_reum %25C3%25A1tica&docid=X7F7mzvks1CtnM&imgurl=http://www.ferato.com/wiki/images/0/04/20090710_mgb_Polimi algia_reum %2525C3%2525A1tica_.jpg&w=300&h=300&ei=WJ41UJHbIKa36QHEmIHoAw&zoom=1&iact=hc&vpx=105&vpy=137&du r=1590&hovh=225&hovw=225&tx=84&ty=105&sig=115299150964895118647&sqi=2&page=1&tbnh=140&tbnw=140&st art=0&ndsp=16&ved=1t:429,r:0,s:0,i:69
  12. 12. VSG0 Se debe tener en cuenta que los valores normales no descartan el diagnostico de AR,Lupus, enfermedad muscular inflamatoria o cualquier otra enfermedad reumática.0 Además de esto los valores suelen ser normales en entidades como la fibromialgia y osteoartrosis degenerativa y altos en otras entidades como la obesidad debido a la secreción de IL6 por los adipocitos.
  13. 13. Resultados VSG0 El resultado de la VSG tiene cierto valor predictivo; un valor muy elevado se correlaciona con un proceso inflamatorio mayor: cifras de 100 mm/h se asocian con enfermedades inflamatorias severas, infección, neoplasias y pacientes con enfermedad renal.
  14. 14. PCR0 La proteína C Reactiva es un Reactante de Fase Aguda Sintetizada en el hígado, clásicamente considerada como marcador inespecífico de inflamación.0 Se produce como respuesta a ciertas citocinas, especialmente a las IL 6, Es el prototipo de las proteínas de fase aguda, se descubrió en 1930 y su nombre es a causa de su capacidad de precipitar el polisacárido C del neumococo en presencia de calcio.
  15. 15. Función biológica:0 Capacidad de reconocer patógenos y células apoptóticas del hospedero, facilita su eliminación mediante el sistema del complemento y de las células fagocíticas, también juega un papel importante en la regulación de intensidad y extensión de la reacción inflamatoria aguda.0
  16. 16. Actividad biológica sistema cardiovascular0 Actividad proaterogénica debido a la activación de células endoteliales que expresan moléculas de adherencia e inducen secreción de IL6, Endoletina 1 y disminución de la disponibilidad de oxido nítrico.0 Unión del PCR al LDL oxidado y a otras sustancias catiónicas, además de perpetuar la respuesta inflamatoria.0 Los niveles de PCR tienen la capacidad de predecir el IAM,ACV y necrosis vascular , además de esto se ha demostrado como factor predictor en la fase crónica después del infarto de miocardio.
  17. 17. PCR EN SANGRE0 La PCR se encuentra en pequeñas cantidades en el plasma sanguíneo, pero se incremente en procesos infecciosos,inflamatorios, traumaticos o neoplasicos en las primeras 6 – 8 horas; alcanza niveles máximos a las 48 horas aproximadamente.0 Posteriomente a resolverse en problema inflamatorio o destruirse el tejido los valores vuelven a la normalidad a las 4-9 horas, pero se mantiene elevada en procesos crónicos como la AR.
  18. 18. Turbidimetría0 La turbidimetría mide la disminución de la luz transmitida a través de una suspensión de partículas utilizando para ello un espectrofotómetro.Se suele utilizar para soluciones concentradas ejemplo:0 Determinación de proteínas totales en suero, LCR u orina.0 Romero Gracia Eliel Rafael. TURBIDIMETRÍAY NEFELOMETRÍA Química analítica II INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MORELIA, Mayo del 2011. http://es.scribd.com/doc/54885577/Turbidimetria-y- Nefelometria
  19. 19. Valores normales mediante turbidimetría0 Valor normales 0.6 mg/dl en ocasiones se eleva a 1 mg /dl, posiblemente en relación con pequeños traumas cotidianos, pero también por obesidad , tabaquismo y diabetes.0 Cifras de 10 mg/dl se consideran altas y por encima de 10 son consideras muy altas.0 En necesario tener en cuenta que en ocasiones se informa en mg/lt lo cual es importante al momento de la interpretación
  20. 20. Nefelometría0 La nefelometría: mide la luz dispersada en dirección distinta a la luz emitida (generalmente con ángulos que oscilan entre 15 y 90°). Utiliza como instrumento el nefelómetro en el que el detector se ubica con un ángulo que oscila entre 15 y 90°0 ejemplo: A 90°). Se suele utilizar para concentraciones más diluidas.0 Romero Gracia Eliel Rafael. TURBIDIMETRÍAY NEFELOMETRÍA Química analítica II INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MORELIA, Mayo del 2011. http://es.scribd.com/doc/54885577/Turbidimetria-y- Nefelometria
  21. 21. Valores mediante nefelometría0 Por medios nefelometricos existe mayor sensibilidad pero estos son mas costosos, los valores de 15 a 20 mg/dl(150-200 mg/lt) son considerados altos.
  22. 22. Relación VSG- PCR
  23. 23. Entidades asociadas con elevación de la PCR.
  24. 24. Entidades reumáticas y PCR elevada
  25. 25. Historia del Factor reumatoideCecil, Nicolls y Stainsby en 1930, pacientes con artritis reumatoidea(Artritis infecciosa crónica) presentaban un titulo alto de aglutininasanti estreptocócicas.1940 waaler describió que en una tercera parte del suero de pacientes con AR, y en una proporción en pacientes sanos se producía aglutinación de los hematíes de carnero en presencia de anticuerpos de conejo dirigidos contra los hematíes de carnero, siempre que la sensibilización fuese previa a añadir el suero de los pacientes enfermos con AR.Alonso Ruiz Alberto. Sociedad española de Reumatología,Técnicas de Diagnostico y tratamiento en Reumatologia.IIIedición 2004. Pág. 29 – 35.
  26. 26. Factor reumatoide0 En 1948 Rose reprodujo el hallazgo de waaler y se comenzó a asociar FR con AR.0 1956 de adopto el FR como parámetro diagnostico para AR.0 1958,Kunkel y Franklin demostraron que la actividad sérica denominada factor reumatoide era un anticuerpo IgM dirigido contra anticuerpos IgG. Alonso Ruiz Alberto. Sociedad española de Reumatología, Técnicas de Diagnostico y tratamiento en Reumatologia.III edición 2004. Pág. 29 – 35.
  27. 27. Factor reumatoideo0 Son autoanticuerpos de los isotipos IgM, IgA e IgG que reaccionan con el fragmento Fc de una IgG.0 El 5% de la población normal puede tener positividad para la prueba.0 El FR clásico, es una IgM de Peso molecular de 900.000 KD, es multivalente, lo que explica su capacidad de aglutinarse eficientemente con partículas antigénicas. Alonso Ruiz Alberto. Sociedad española de Reumatología, Técnicas de Diagnostico y tratamiento en Reumatologia.III edición 2004. Pág. 29 – 35.
  28. 28. Factor Reaumatoideo
  29. 29. Positividad del FR El FR del isotipo IgM es positivo en 70 % - 80 % de los casos deAR. 20 % en los de artritis juvenil, principalmente en la formapoliarticular, pero su positividad, aun en pacientes conmanifestaciones articulares, no siempre significa AR.Probablemente el FR de tipo IgG o igA se asocia conmanifestaciones sistémicas y de peor pronostico.Los títulos bajos asociados a patologías no inflamatorias, secaracterizan por ser se poliespecificos y de baja afinidad.
  30. 30. Positividad del FR
  31. 31. Positividad del FRAlonso Ruiz Alberto. Sociedad española de Reumatología,Técnicas de Diagnostico y tratamiento en Reumatologia.IIIedición 2004. Pág. 29 – 35.
  32. 32. Anticuerpos antipeptido cíclico citruliano (Anti-CCP).0 Recientemente descubierto, se une a determinantes antigénicos que contienen aminoácido el cual esta citrulinado,Lo que implica la modificación postranslacional de los residuos de arginina por la enzima peptidil arginina desaminasa.0 Para su detección se generaron péptidos sintéticos ideales como sustratos antigénicos.0 Por medio de múltiples estudios se encontró que la sensibilidad es de 78 % y especificidad de 96 %.
  33. 33. Efectividad de la prueba0 Cuando se combina el factor reumatoide clásico con el anti –CCP La especificidad diagnostica es del 99.5 %, lo cual nos indica que es un marcador efectivo y que probablemente nos puede ayudar a detectar tempranamente y a predecir complicaciones como la enfermeded articular erosiva.
  34. 34. Anticuerpos Anticomponentes Del Núcleo (AAN Y Citoplasma)0 En 1948 hargraves, richmon y morton. Describieron las células LE en la medula ósea de pacientes con LES.0 Posteriormente se dio inicio a la investigación de autoanticuerpos dirigidos contra antinucleares y citoplasmáticos, los cuales se encuentran asociados a varias patologías inmunitarias y de otra índole no inmunológica.0
  35. 35. Anticuerpos antinucleares0 Por carencia de sensibilidad, especificidad y valor predictivo y por las dificultades técnicas, procedimiento los ANN fueron remplazados por la determinación de los anticuerpos intranucleares.0 El mecanismo de detección es la Inmunofluorescencia indirecta, inicialmente se utilizaron tejidos de ratón(riñón- hígado). En la actualidad HEP-2 que son células epiteliales humanas derivadas de un carcinoma laríngeo.
  36. 36. Otro mecanismo de detección0 Más recientemente se estableció un nuevo método, mediante el empleo de las células HEP-2000(células HEP-2 transfectados con antígeno RO), se puede detectar fácilmente el anti-RO, pero aunque la sensibilidad de la prueba mejora, disminuye notablemente la especificidad.0
  37. 37. Pacientes con LES0 Pacientes con lupus eritematoso sistémico y fiebre, la determinación de la PCR puede ser de utilidad para diferenciar actividad e infección, pues los valores muy elevados(mayores de 8mg/dl) , sugieren un proceso infeccioso, hay que tener en cuente que en estos pacientes puede estar elevada cuando presentan serositis activa o sinovitis crónica.
  38. 38. 0 Si bien esta técnica es la 0 La determinación de los AAN prueba tamiz para identificar es muy útil para el los patrones, no determina la diagnostico y seguimiento – especificidad del anticuerpo. pronostico de los pacientes Para ello, se recurre a técnicas con enfermedades autoinmunes. Se encuentran especiales como principalmente en: lupus inmunodifusion, inmunoblot y eritematoso sistémico, principalmente ELISA que es esclerosis sistémica, la la más frecuentemente enfermedad mixta del tejido utilizada. conectivo y el síndrome de0 Un paciente con AAN (-) y Sjogren sospecha clínica de 0 Un resultado de AAN (-) enfermedad autoinmune persistente es un argumento requiere determinación en contra de diagnostico de LES. antiRo.
  39. 39. SENSIBILIDAD DE LOS AAN EN ENFERMEDADES REUMATICAS Y NO REUMATICAS
  40. 40. 0 Los patrones que se observan a la inmunofluorescencia son la clave de la especificidad del anticuerpo pero no determinar su tipo.0 Los AAN producen gran variedad de patrones de fluorescencia que pueden variar en el mismo individuo según las circunstancias.0 Por inmunofluorescencia indirecta (células Hep- 2) se identifican 6 patrones.
  41. 41. De doble cadena (anti-dsDNA) tienen gran importancia en el lupus eritematoso sistémico y en la nefritis lupica. Se consideran unmarcador serológico de lupus, y se incluye como criterio diagnostico.
  42. 42. 0 En general se puede afirmar que al anticuerpo anti-Sm es especifico para LES, que el anti- Ro y anti-La se asocian principalmente con el Síndrome de Sjogren.Se incluye el anti-Sm, el anti- 0 Títulos altos de anti-Sm criterioRNF, el anti.Ro (SSA) y el anti- dx para el LES aunque solo es elLa (SSB). Estos anticuerpos secaracterizan por poseer 15-30% de los pacientes pero espotencial diagnostico y útil cuando anti-ADN de doblepronostico, pueden aparecervarios años antes que las cadena es (-). Puede estar enmanifestaciones clínicas. pacientes hasta 1 año y medio antes de desarrollar LES.
  43. 43. Dirigidos contra proteínas del citoplasma de neutrofilos y monocitos. Marcadores serológicos de vasculitis necrosantes sistémicas(granulomatosa de Wegner y poliangeitis microscópica). Se detectan principalmente por inmunofluorescencia, se observa dos patrones: (c-ANCA) y perinuclear (p-ANCA)
  44. 44. 0 En el caso del ANCA es característico la inmunofluorescencia difusa fina del citoplasma. C- anca0 Granulomatosis de Wegener (80% en no tratados)0 Poliangeitis microscópica0 Glomerulonefritis rápidamente progresiva0 LES0 No especifico
  45. 45. 0 Asociados a incremento de riesgo de trombólisis vascular, perdida fetal recurrente, livedo reticularis y trombocitopenia.0 AnticardiolipinaSíndrome antifosfolípido:Prueba anticardiolipina IgM o IgG positiva en mas de una ocasión separada de 12 semanas.
  46. 46. 0 Detectar los títulos de anticuerpos en los pacientes con sospecha de enfermedades reumaticas autoinmune es de gran ayuda diagnostica porque hay enfermedades donde la prevalencia de ciertos anticuerpos es mayor que en otras entidades.0 La calidad de los resultados depende en gran parte del laboratorio que realiza la prueba.0 Una prueba es considerada útil cuando tiene alta sensibilidad y especificidad.0 En la actualidad existe algunos métodos conocidos como lo son La inmunofluorescencia indirecta (IFI) y el enzime- linked inmunosorbent assay (ELISA); Siendo este ultimo uno de los más utilizados debido a su fácil manejo y buenos resultados.
  47. 47. 0 Velez, H. Rojas, W. Borrero J y Restrepo J. Reumatologia. Corporaciòn para investigaciones biologicas. Sexta edición. Pags 181-196.0 Alonso Ruiz Alberto. Sociedad española de Reumatología, Técnicas de Diagnostico y tratamiento en Reumatologia.III edición 2004. Pag 29 – 35.0 Romero Gracia Eliel Rafael. TURBIDIMETRÍAY NEFELOMETRÍA Química analítica II INSTITUTO TECNOLÓGICO DE MORELIA, Mayo del 2011.http://es.scribd.com/doc/54885577/Turbidimetria-y- Nefelometria0 HERNAN VELEZ, WILLIAM ROJAS, REUMATOLOGIA, SEPTIMA EDICION.

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