Este documento presenta la planificación del curso de Microbiología y Parasitología Clínica impartido en la Facultad de Ciencias de la Salud. Incluye la descripción de las unidades que componen el curso, las evaluaciones, los profesores a cargo y breves descripciones sobre clasificación de microorganismos, diagnóstico microbiológico y técnicas para la identificación de agentes infecciosos. También presenta información sobre el coronavirus SARS-CoV-2 y COVID-19.

1. Facultad de Ciencias de la Salud
TME 130
Tecnología médica y Enfermería
Primer semestre 2020
Microbiología y Parasitología
Clínica
Clase 1
Profesoras: TM. Claudia Castillo, TM. Laura Estrella, TM. Mónica Espinoza

2. Qué vamos a ver hoy….
• Planificación del curso
• Conocer la clasificación de los
microorganismos
• Conocer los tipos de muestras
clínicas asociadas al diagnóstico de
infecciones producidas por
microorganismos

3. Planificación del curso
• Nombre del profesor: Claudia Castillo Vega
• Contacto: claudiacastillove@santotomas.cl
claucastillopuc@gmail.com
Descripción de la asignatura
El curso consta de sesiones teóricas de Cátedra y Talleres virtuales de Laboratorio
• Dos unidades :
Unidad I -Describir principales estructuras y sus funciones de los
microorganismos
-Conocer los fundamentos del diagnóstico clínico
Unidad II -Reconocer los mecanismos que generan las enfermedades
infecciosas y su prevención
-Identificar los principales métodos diagnósticos de laboratorio

4. Evaluaciones
• Unidad I
• Evaluación diagnóstica……..Formativa
• Quiz teórico (contenidos/lecturas)………10%
• Prueba cátedra y laboratorio escrita 25%
• Quiz /interrogaciones de laboratorio…..10%
• Unidad II
• Presentación de seminarios …….10% (Fechas por definir)
• Quiz de laboratorio……….. 5% (al azar)
• Prueba laboratorio…………10%
• Prueba cátedra y laboratorio escrita 30%
• Semana del 25-29 de mayo

5. Varios
• Asistencia: 75% cátedra
• 100% laboratorio
• Reglas generales
• Respeto mutuo
• Código de honor (no copiar, plagiar,
ingresos falsos, etc.)
• Puntualidad
• Respetar acuerdos
• Celular en silencio

6. SARS CoV- 2
COVID – 19
TM. Mg. Laura Estrella Cedeño

7. Coronavirus
• Los coronavirus son una extensa familia de virus que pueden causar
enfermedades tanto en animales como en humanos.
• En los humanos, se sabe que varios coronavirus causan infecciones
respiratorias que pueden ir desde el resfriado común hasta
enfermedades más graves como el síndrome respiratorio de Oriente
Medio (MERS) y el síndrome respiratorio agudo severo (SRAS).
• El coronavirus que se ha descubierto más recientemente causa la
enfermedad por coronavirus COVID-19.
Who.int. (2020). Coronavirus (CoV) GLOBAL. [online] Available at: https://www.who.int/es/health-topics/coronavirus [Accessed 4 Mar.
2020].

8. Síntomas COVID-19
Fiebre Tos seca
Algunos pacientes:
- Dolores
- Congestión nasal
- Rinorrea
- Dolor de garganta
- Diarrea
Cansancio
Who.int. (2020). Coronavirus (CoV) GLOBAL. [online] Available at: https://www.who.int/es/health-topics/coronavirus [Accessed 4 Mar. 2020].

9. Who.int. (2020). Coronavirus (CoV) GLOBAL. [online] Available at: https://www.who.int/es/health-topics/coronavirus [Accessed 4 Mar.
2020].
• Período de incubación: La mayoría de las
estimaciones respecto al periodo de incubación
de la COVID-19 oscilan entre 1 y 14 días, y en
general se sitúan en torno a cinco días
• Puede subsistir en una superficie desde unas
pocas horas hasta varios días, esto depende de el
tipo de superficie, la temperatura o la humedad
del ambiente.
La mayoría de las personas (alrededor del
80%) se recupera de la enfermedad sin
necesidad de realizar ningún tratamiento
especial.

10. Población de riesgo
• Las personas mayores y las que padecen afecciones médicas
subyacentes, como hipertensión arterial, problemas cardiacos,
diabetes o enfermedades respiratorias crónicas.
• 1 de cada 6 personas que contraen COVID-19 desarrolla una
enfermedad grave y tiene dificultad para respirar
• Mortalidad 2%
Who.int. (2020). Coronavirus (CoV) GLOBAL. [online] Available at: https://www.who.int/es/health-topics/coronavirus [Accessed 4 Mar.
2020].

11. Transmisión
• Contacto con otra que esté infectada por el virus, por gotitas de la
nariz o la boca que salen despedidas cuando una persona infectada
tose o exhala.
• Superficies inanimadas contaminadas con el virus
• El riesgo de contraer la COVID-19 por contacto con las heces o de
alguien que no presente ningún síntoma parece ser bajo.
Who.int. (2020). Coronavirus (CoV) GLOBAL. [online] Available at: https://www.who.int/es/health-topics/coronavirus [Accessed 4 Mar.
2020].

12. Medidas de protección
• Lávese las manos a fondo y con frecuencia usando un desinfectante a base
de alcohol o con agua y jabón.
• Mantenga una distancia mínima de 1 metro (3 pies) entre usted y cualquier
persona que tosa o estornude.
• Evite tocarse los ojos, la nariz y la boca.
• No saludar de beso a extraños, ni darse la mano.
• Cubrirse la boca y la nariz con el codo doblado o con un pañuelo de papel
al toser o estornudar. El pañuelo usado debe desecharse de inmediato.
• Permanezca en casa si no se encuentra bien. Si tiene fiebre, tos y dificultad
para respirar, busque atención médica y llame con antelación.
Who.int. (2020). Coronavirus (CoV) GLOBAL. [online] Available at: https://www.who.int/es/health-topics/coronavirus [Accessed 4 Mar.
2020].

13. Importante
• No hay vacuna ni tratamiento para el virus.
• Uso de mascarillas en caso de tener sintomatología y en el de
quienes cuidan de personas que tienen síntomas como tos o
fiebre. Las mascarillas dan una falsa sensación de protección, se
debe considerar que al humedecerse, ya no son útiles.
• Si eres menor de 14 años, las probabilidades de que te contagies
de coronavirus son casi nulas (0,06%)
Who.int. (2020). Coronavirus (CoV) GLOBAL. [online] Available at: https://www.who.int/es/health-topics/coronavirus [Accessed 4 Mar. 2020].

15. Enlaces
• Sitio web sobre la COVID-
19: https://www.who.int/es/emergencies/diseases/novel-
coronavirus-2019
Who.int. (2020). Coronavirus (CoV) GLOBAL. [online] Available at: https://www.who.int/es/health-topics/coronavirus [Accessed 4 Mar.
2020].

16. Microbiología

17. Definición de microbiología
“Ciencia que se dedica al estudio de los microorganismos” (organismos microscópicos)
Disciplina científica: Estudio sistemático y metódico que genera conocimiento básico y
aplicado
Tipos de microorganismos:
Bacterias
Hongos
Parásitos
Virus (*)

18. Antecedentes históricos
• Robert Hooke (1665)
• Primeras células, muertas
• Antonie van Leeuwenhoek (1684)
• Realizó la primera observación de microorganismos libres
(“animáculos”).
• Creador del microscopio primitivo.
• Louis Pasteur (1822-1895)
• Pone fin a la teoría de la generación espontánea
• Identificó a los microorganismos como agentes causales de
enfermedades (teoría germinal de la enfermedades infecciosas).
• Generó la vacuna para la cólera aviar y rabia.
• Inventó Pasteurización
• Robert Koch (1876)
• Definió los postulados sobre la identificación de microorganismos
patógenos (Actualmente vigentes). Trabajos sobre la etiología del
carbunco (Bacillus anthracis)
• Bacilo de la Tuberculosis (Bacilo de Koch)

19. Postulados de Koch
• El microorganismo debe estar presente en todos los
individuos con la misma enfermedad.
• El microorganismo debe ser recuperado del individuo
enfermo y poder ser aislado en medio de cultivo.
• El microorganismo proveniente de ese cultivo debe causar
la misma enfermedad cuando se lo inocula a otro
hospedero.
El individuo experimentalmente infectado debe contener el
microorganismo.

20. Clasificación de
microorganismos
• Virus
• Partículas infecciosas de menor tamaño (18-300nm)
• Se han descrito más de 40 géneros asociados a enfermedad
humana (sigue aumentando)
• Pueden estar formados por ADN o ARN
• Son parásitos intracelulares
• El desarrollo de la enfermedad depende de las células infectadas
• Bacterias
• Son estructuras simples, procariontes
• No tienen organelos citoplasmáticos
• Pared celular compleja
• Miden entre 1 y 20 µm
• Pueden estar en el ambiente, microbiota, patógeno

21. Clasificación de microorganismos
• Hongos
• Estructura compleja, son eucariontes
• Poseen organelos citoplasmáticos
• Pueden ser unicelulares (levaduras)
• Pueden ser pluricelulares (filamentosas)
• Parásitos
• Son organismos complejos, eucariontes
• Pueden ser unicelulares (protozoos, 1-2µm)
• Pueden ser pluricelulares (artrópodos, cestodos
(hasta 10 mt))
• Tienen ciclos de vida complejos, que pueden incluir
otros animales.

22. Diagnóstico microbiológico
• El laboratorio de microbiología juega un importante papel en el
diagnóstico y prevención de las enfermedades infecciosas.
• Dependencia de la calidad de la muestra recogida en el paciente
• Zona representativa de la infección
• Contaminación de las muestras
• Cantidad suficiente
• Transporte de las muestras
• Medio de transporte adecuados para los microorganismo que se
investigan
• Tiempo de transporte
• Temperatura de transporte adecuada
• La mayoría de las pruebas diagnósticas se basan en la capacidad de
crecimiento de los microorganismos
• Procurar todas las condiciones para que los microorganismos se
mantengan viables.
• Técnicas utilizadas para demostrar la presencia del microorganismo
• Existen microorganismos que no son cultivables o de muy lento
desarrollo

23. Técnicas para identificación
de los agentes infecciosos
• Observación directa del agente infeccioso
• Cultivo
• Detección de componentes estructurales o productos del agente
infeccioso
• Antígenos estructurales
• Enzimas, toxinas o metabolitos
• Detección de ácidos nucleicos
• Cito-histopatología
• Detección de anticuerpos específicos (serología)
• Cada una de estas técnicas tiene usos definidos y limitaciones. Su
utilidad varía según la infección que se esté investigando, la muestra
disponible para estudio y los antecedentes clínicos del paciente.

24. 1.Observación
• La observación directa de la muestra puede demostrar la presencia
de microorganismos en una muestra clínica. La principal ventaja es la
rapidez con que se logra obtener un resultado. La observación directa
puede ser:
• Observación macroscópica: es aquella que se realiza a ojo desnudo
para identificar a simple vista algunos microorganismos como
artrópodos, arácnidos, gusanos que afectan al hombre.
• Observación microscópica: la capacidad de resolución del ojo
humano es de 100 micrones, la mayoría de los virus, bacterias,
hongos y protozoos miden menos que eso, por esta razón es
necesario la utilización de microscópios

25. Microscopía
Microscopía óptica
Campo claro (luz)
Campo oscuro
Fluorescencia, etc.
Aumento efectivo: 1.200 veces
Microscopía electrónica
Transmisión (en 2D)
Barrido (3D)
Aumento efectivo: 1.000.000 de veces

26. Campo claro
Cianobacteria
(al fresco)
Bacterias
(teñidas)
Gram +
Gram -
Es descendiente de los microscopios primitivos
La muestra a observar debe ser fina para que pueda
ser atravesada por la luz
Generalmente se utilizan tinciones porque el
campo claro no produce contraste
Microscopía óptica.

27. Campo oscuro
Espermios Treponema pallidum
El objetivo recibe la luz dispersa o refractada
La muestra se ilumina con luz fuerte indirecta
Permite observar células sin teñir y resulta
especialmente útil para células vivas
Microscopía óptica.

28. Fluorescencia
Permite marcar estructuras específicas o células
determinadas con fluoróforos (emiten luz cuando son
excitados)
Bacterias
Células de ratón
Microscopía óptica.

29. Transmisión
Virus Bacteria en división
Es análogo al microscopio óptico de campo claro pero
utiliza electrones en vez de luz
Microscopía electrónica.

30. Barrido
Permite tomar imágenes tridimensionales porque
capta los electrones que rebotan en las células
cubiertas con una delgadísima película de un metal
denso
Bacterias creciendo en el estoma Bacilos
Microscopía electrónica.

31. Aislamiento y técnicas de
cultivo
• Desarrollo in vitro del microorganismo, mediante su inoculación en un
medio que contenga los factores nutritivos y ambientales para su
desarrollo.
• La mayoría de los microorganismos crecen en medios de cultivos inertes,
sin embargo, los virus necesitan cultivos celulares o tejidos para
reproducirse.
• Ventajas:
• Es el estándar de comparación con otras técnicas de identificación
• Es muy sensible, con un solo microorganismo se puede obtener una
colonia en un cultivo
• Desventajas:
• Hay microorganismos que son difíciles de cultivar
• Treponema pallidum, Mycobacterium leprae, virus de la hepatitis,
rotavirus, la mayoría de los parásitos y algunos hongos

32. Detección de componentes estructurales o
productos del agente infeccioso
• Cápsula, pared celular, fimbrias, flagelos, toxinas, glicoproteínas, pueden ser identificados
directamente en muestras clínicas, sin necesidad de hacerlos crecer en un medio de
cultivo.
• Resultados en corto tiempo (técnicas rápidas)
• Orientan tratamiento
• Dentro de los componentes más detectados en laboratorio están:
• Antígenos de virus respiratorio, Rotavirus
• Antígenos de pared bacterianas causantes de meningitis y neumonias ; antígeno
capsular de (Cryptococcus neoformans), toxinas (citotoxina Clostridium difficile),
sustancias producidas por el huésped como resultado de la infección (adenosín
deaminasa en infecciones por Mycobacterium tuberculosis)
• Las técnicas más utilizadas: *Enzimo inmunoanálisis o ELISA
*Inmunofluorescencia
*Radioinmunoanálisis
*Aglutinación de látex
Rotavirus
Placa de ELISA

34. Detección de ácidos nucleicos
• Detección de material genético del agente infeccioso (DNA o RNA) en
muestras clínicas.
• Utiles para detectar agentes difíciles de cultivar.
• El material genético puede ser detectado mediante:
• Unión de un trozo de DNA complementario (hibridización de
ácidos nucleicos usando sondas genéticas)
• Amplificación y posterior detección (clonación por vectores o por
reacción de polimerasa en cadena PCR)
• Aislar el material genético de un microorganismo permite su estudio y
clasificación a nivel molecular, entregando información taxonómica,
epidemiológica y patogénica.
• Alta sensibilidad para detectar los agentes infecciosos (cualitativos y
cuantitativos)

35. PCR

36. Citohistopatología
• Consiste en el estudio de las células o tejidos del huésped para determinar si existen
alteraciones que sean características del daño producido por agente infeccioso específico.
• Se pueden observar extendido de células (citopatología)
• Se pueden observar muestras de tejidos extraídas del enfermo por biopsias y autopsias
(histopatología)
• Citología: las muestras pueden ser secreciones (expectoración), fluidos corporales estériles
(LCR, L. Articular, peritoneal, pleural), orinas, lavados o cepillados endoscópicos, tejidos
obtenidos por punción.
• Histología: las muestras corresponden a tejidos, deben ser obtenidas por procedimientos
invasivos (biopsia, autopsia). Para la observación microscópica es necesario realizar cortes finos
del tejido.
• Se utilizan diferentes tinciones para la observación de células, tejidos y agentes infecciosos, las
más usadas son: Papanicolau, May Grünwald Giemsa y Hematoxilina-eosina.
• http://www.sld.cu/sitios/histologia/temas.php?idv=15445
Tinción de Papanicolau,
normal
Tinción de Papanicolau,
células impregnadas con
Papilomavirus

37. Detección de anticuerpos específicos (serología)
• Diagnóstico indirecto: Estudia la respuesta inmune humoral
(anticuerpos específicos) que la presencia del agente infeccioso genera
en el huésped.
• Infección aguda: se puede utilizar una medición de IgM o
determinaciones pareadas de IgG (separadas por 15 días) para
demostrar la conversión de negativa a positiva o ascenso de títulos en 4
diluciones.
• Diagnóstico presuntivo, ya que dependen de la capacidad del huésped
de generar una adecuada respuesta inmune.
• Ejemplos:
• Infecciones virales (hepatitis A,B,C,VIH, rubeóla y sarampión
• Parasitarias (toxoplasmosis, Chagas, toxocariasis, triquinosis)
• Bacterianas (Legionella pneumophila, Bartonella henselae )
• Técnicas para la detección de anticuerpos séricos:
• Fijación del complemento, inhibición de hemaglutinación,
neutralización, inmunofluorescencia, aglutinación de látex, ELISA,
radioinmunoensayo, Western blot

38. Detección de anticuerpos específicos (serología)

39. Preguntas de repaso
• 1- ¿La microbiología es una ciencia básica dedicada al estudio de la
historia de la biología? ¿Verdadero o Falso? Argumente su respuesta.
• 2-Dé un ejemplo concreto que sustente alguno(s) de los postulados de
Koch
• 3- ¿De qué depende el buen resultado del diagnóstico microbiológico?
• 4-¿ De qué depende la técnica escogida para realizar la identificación
del agente infeccioso?
• 5-¿Cuál es la microscopía utilizada para la observación de bacterias?
• 6- Qué son las técnicas de cultivo microbiológico? Qué ventajas tiene
sobre otras técnicas?
• 7-Indique las ventajas y desventajas de usar técnicas de detección de
ácidos nucleicos
• 8-¿ Porqué la serología se considera diagnóstico indirecto de algunas
enfermedades infecciosas?