Tema: Perspectivas actuales del Cáncer Disertante: Dr. Martin Sangueza Acosta (Médico Patólogo

1. La Biopsia: su importancia en el
diagnostico, pronostico, prediccion y
respuesta terapeutica en el cancer.
DR. MARTIN SANGUEZA ACOSTA
Consultorio de Patologia
LA PAZ BOLIVIA

2. Que es la Biopsia?
Una biopsia es un procedimiento que
consiste en la extraccion de una muestra total
o parcial de tejido para ser examinada con el
fin de establecer un diagnostico.

3. Cuando se realiza una biopsia?

4. 9-08-17

5. Fase Pre-analitica
• Toma de la muestra

6. El envio a laboratorio
Dar una historia clinica minina sobre el paciente y
una adecuada descripcion de la(s) lesiones
Hipotesis dx
Rendimiento de la Bx

7. IMPORTANCIA DE LA CLINICA EN LA BIOPSIA
• Como se envia una biopsia y en que?

8. IMPORTANCIA DE LA CLINICA EN LA BIOPSIA
• MITO
– Una vez tomanda una biopsia representativa no
hay que tener mayor cuidado.

9. IMPORTANCIA DE LA CLINICA EN LA BIOPSIA
• ES EL PROCESO MEDIANTE
EL CUAL SE PRODUCE UNA
PARALIZACION INMEDIATA
DE LA ACTIVIDAD CELULAR
IMPIDIENTO EL PROCESO
DE AUTODIGESTION
CITOPLASMATICA Y
NUCLEAR, PERMITIENDO ASI
LA POSIBILIDAD DE SER
ESTUDIADA DE UNA
MANERA ADECUADA

10. IMPORTANCIA DE LA CLINICA EN LA BIOPSIA
Caracteristicas de recipiente
– trasparente
– boca ancha
– tapa rosca
– de volumen adecuado a la muestra
– Identificado
– irrompible

13. EXPLORANDO LA MITOLOGIA DE LA BIOPSIA
• Macroscopia

14. – ENCAPSULACION
– CORTE
– TINCION

22. WSI scanners
Aperio
Omnyx
Olympus
Bioimagene/ Ventana
Leica
Zeiss
Philips
Mikroscan

23. Scanners de lamina completa
Hallazgos
• Auto-loading mechanism

25. Company Confidential – DO NOT
DISTRIBUTE4/24/19
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27. MICROSCOPIA CONFOCAL in vivo

28. MICROSCOPIA CONFOCAL in vivo

29. MICROSCOPIA CONFOCAL in vivo

32. A 4 mm thick section is
mounted onto an
indium-tin oxide coated
MALDI target
A serial section is
placed on a
microscope slide for
histology staining
Many tissues are analyzed
simultaneously on one MALDI
target
A pathologist marks areas of
interest using a color code on a
photomicrograph of the stained
tissue section. Spots placed are
300 µm in diameter, slightly
larger than size of the matrix
spots to be deposited
The spotted
photomicrograph and
the MALDI plate image
are merged and pixel
coordinates of the
spots determined
The coordinates are
transferred to an
acoustic robotic
spotter that deposits
trypsin and matrix at
the designated
locations
The matrix spots deposited on
the tissue are slightly smaller
than the desired location of the
colored spots on the
photomicrograph
Mass spectra are collected from the
matrix spots. Peptide profiles show
differences depending on the cell type
from which they were collected
1 cm 1 cm
1 mm melanoma
Spitz nevi

33. Tecnicas especiales

34. Inmunohistoquimica

37. S - 100

38. LA BIOPSIA
• ESTUDIOS ESPECIALES
– H & E
– HISTOQUIMICA
– INMUNOHISTOQUIMICA
– HIBRIDIZACION IN SITU
– INMUNOFLUORESCENCIA
– PCR
– DNA MICROARRAY
– TISSUE MICROARRAY

40. Estudio del DNA, GENES y sus
alteraciones

41. Laser Capture Microscope

42. Microdissection
• It is a very simple concept
• Technical challenge
– Amount of material
• Several ways to microdissected
– Semi-microdissection from frozen tissue blocks
– Manual Microdissection
• Tumor in a needle
• Stroma in a needle
– Micromanipulation
– Microdissection by LCM

43. Laser Capture Microscope

44. Laser Capture Microscope

46. Tissue Microarray

47. TMA - Needles
Algunas agujas pueden variar de diametro
0,6mm – 1mm – 1,5mm – 2,0mm
500 300 120 80

48. TMA

49. Tissue Microarray

50. TMA

52. Human Array CGH with ~ 1 Mb Resolution
2500 BACs
Triplicate spots
130 mm centers
864 well plates
0.5 mg DNA
Random Primed
Cy3 and Cy5
16 hr Hybe
12 mm

53. TISSUE-ARRAY (MATRICES TISULARES)
•Preservación del bloque original
• 2 “tissue” de melanomas en fase de crecimiento vertical
• 1 “tissue” de Nevus de Spitz

54. Tissue Microarray

59. Aspectos terapeuticos

60. Importancia de los biomarcadores en la medicina
personalizada
• Cambio del papel del patólogo
• Participación en equipos multidisciplinares:
– Her2 neu y cáncer de mama
– K-Ras y cáncer de colon
– EGFR y carcinoma pulmonar
– EML4-ALK y carcinoma de pulmón
– Braf y melanoma metastásico

61. CANCER DE MAMA
• EL CANCER DE MAMA ES
UNA NEOPLASIA EPITELIAL
MALIGNA CON UNA
EVOLUCION Y PRONOSTICO,
QUE DEPENDERA DE LA
EXTENSION DEL TUMOR AL
MOMENTO DEL
DIAGNOSTICO.

71. Baseline, 3/15/2011 Cycle 4 Day 1, 6/8/2011
PLX4032 = RG7204 = vemurafenib
Tumor Response to Vemurafenib

72. McDermott U et al. N Engl J Med 2011;364:340-350.
Metabolic response to treatment with
Vemurafenib

73. Vemurafenib treatment:
1.- Flaherty KT, et al. N Engl J Med 2010;363:809–19.
Computer tomography revealed regression of lung, liver and bone
metastases following 8 weeks Vemurafenib treatment (with each pair of
images shown for a different patient)
23

86. Biopsia liquida

87. Definiciones
• cfDNA = cell-free DNA
• ctDNA = circulating tumoral
DNA
• CTCs = Circulating tumor
cellsas
• Exosomas = vesículas con
acidos nucleicos en su interior

90. Utilidad de Biopsia liquida
Analisis de blancos terapeuticos y de resistencia a drogas conferidos
por mutaciones genicas que detectamos en muestras de sangre
periferica:
• Estimacion del riesgo de metastasis, recurrencia y progression
• Permite entender el proceso de desarrollo de metastasis
• Prediccion de respuesta a terapias dirigidas
• Monitoreo de enfermedad minima residual
• Seguimiento de resistencia secundaria (adquirida)