Curso introductorio de ciencias básicas para posgrados de odontología. Universidad El Bosque. Instituto UIBO.

1. MICROORGANISMOS
ANAEROBICOS
Curso introductorio en ciencias
básicas para posgrados de
Odontología
Diana Marcela Castillo
Bcl, M.Sc Microbiología
Facultad de Odontología. Instituto UIBO
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

2. MICROORGANISMOS ANAEROBIOS
- Estrictas (pO2 menor de 0.5%):
- No catalasa
- Moderadas (pO2 : 2 – 8%): Sobreviven en
aerobiosis por 60 a 90 min
- Aerotolerantes
- Facultativas
- Microaerofílicas
- Capnofílicas
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

3. Escaso poder de síntesis.
Fuentes de energía: Proteínas y carbohidratos
Metabolismo: ácidos grasos de cadena corta
Olor fétido de los cultivos
CARACTERISTICAS Oportunistas
GENERALES
Crecimiento lento
Pleomórficos
Polimicrobianas
Tipo endógeno o exógeno
Bajo potencial redox
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

4. Potencial Redox (Eh)
Normal
+120 a +300 mV
Anaerobios
+10 a -250 mV
Diana Marcela Huala, Ausubel. Esp, Rev Genet 1989 / Miller Mekalanos, Falkow. Science 1989
Albright, Castillo. BCL, Ann M.Sc.

5. BACTEROIDES
Resistentes a bilis Sensibles a bilis
Bacteroides Sacarolíticos No sacarolíticos
pigmento + o - pigmento +
Prevotella Porphyromonas
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

6. Las infecciones polimicrobianas
pueden llevar a:
• Un microorganismo puede disminuir los
mecanismos de defensa del huésped:
Ej: Diversos Bacteroides obstaculizan in vitro la
fagocitosis y el ataque de los PMN a
microorganismos del género Proteus
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

7. Ubicación
• Fondo de ríos, aguas residuales, pantanos
• Panza de ganado vacuno
• Superficies mucocutáneas del hombre:
•Nasofaringe
•Orofaringe
•Boca
•Tracto gastrointestinal
•Orificios genitales
• Superficie de la piel
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

8. Flora Normal
Cavidad oral
Flora polimicrobiana
Diferentes ecosistemas
•Bacteroides •Actinomyces
•Tannerella
•Eikenella
•Prevotella
•Campylobacter
•Porphyromonas
•Capnocytophaga
•Fusobacterium
•Micromonas
•Peptoestreptococcus
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

9. Garganta, Nariz, Oidos:
-Peptoestreptococcus -Propionibacterium
-Veillonella -Bacteroides
-Actinomyces -Fusobacterium
OJO Conjuntiva, saco lagrimal y conducto lagrimal:
Propionibacterium
Poros, glándulas sebáceas:
PIEL Propionibacterium
Ombligo:
Peptostreptococcus
Prevotella
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

10. Tracto gastrointestinal
Depende de: Flora bucal, orofaringe, saliva y alimentos
Duodeno y yeyuno Peptoestreptococcus
Lactobacillus
Bilophila
Ileon Bacteroides
Aparato Urogenital
Lactobacillus
Vagina
Bifidobacterium
Veillonella
Bacteroides
Peptoestreptococcus
Uretra masculina: Bacteroides
Prevotella
Peptococcus
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

11. Floracuantitativo
Aspecto
normal
Lugar Cant. Relación
Bacterias Anaerobio/aerobio
Saliva 108 – 109 3 - 10 : 1
Boca Sup. Dental 109 - 1010 1:1
Surco 1011 - 1012 100 – 1000 : 1
gingival
Estomago 102 - 105 1:1
Tubo Yeyuno 102 - 104 1:1
Digestivo Ileon 104 - 107 1:1
Colon 1011 - 1012 1000 – 10000 : 1
Genitales Vagina 108 – 109 5 – 10 : 1
femeninos Endocervix 108 - 109 5 – 10 : 1
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

12. Interacciones
Streptococcus
Capnocytophaga
Actinomyces PABA S. mutans E. corrodens
Leptotrichia
A.actinomycetemcomitans
Lactobacillus
CO2
Fusobacterium
Eubacterium
Lactato NH4 Bacteroides
Formato Peptococcus
Veillonella H2 Peptostreptococcus
Prevotella
Porphyromonas
Acetato
Menadiona Pirofosfato de tiamina
Putrescina
E. alactolyticum Isobutirico
P. indolicus
Treponemas orales
Caproatro
Campylobacter
P. melaninogenica
Staphylococcus P. gingivalis
P. intermedia
NAD Haemophilus Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
Diana Marcela Protohemo

13. LOCALIZACIONES MÁS
FRECUENTES DE LAS
INFECCIONES POR BACTERIAS
ANAEROBIAS
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
Diagnostic Microbiology Koneman, Allen, Dowell, Sommers

14. Factores de riesgo
• Alteración de las barreras mucosas:
traumatismos, cirugías
• Cáncer
• Anoxia tisular: necrosis, disminucion del potencial
Redox
• Tumores
• Cuerpo extraño
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

15. •Sinergismo con otros microorganismos
•Tratamientos o patologías inmunosupresoras: diabates,
neoplasias
•Antibioticoterapia
•Otros: Edad, alcoholismo, desnutrición
•Bacterias aerobias
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

16. Clasificación
ANAEROBIOS ANAEROBIOS
ESPORULADOS NO ESPORULADOS
Gram positivos Gram positivos Gram Negativos
E
Bacilos Bacilos Cocos Bacilos Cocos S
P
Clostridium Actinomyces Peptococcus Bacteroides Acidominococcus
I
botulinum Arachnia Parvimonas Tannerella Veillonella
R
Clostridium tetani Bifidobacterium Peptostreptococcus Fusobacterium
O
Clostridium Lactobacillus Ruminoccoccus Leptotrichia
perfringens Q
Propionibacterium Sarcina Prevotella
Clostridium novyi U
Eubacterium Streptococcus Porphyromonas
Clostridium E
Selenomonas
septicum T
Dialister
Clostridium A
histolyticum Campylobacter
S
Clostridium welchii Actinobacillus
Eikenella
Capnocytophaga
Bilophila
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

17. Diagnóstico presuntivo
• Olor pútrido de la lesión
• Cercanía a las superficies mucosas
• Secundaria a mordeduras animales o humanas
• Producción de gas
• Necrosis tisular
• Abscesos
• Terapia previa con aminoglucósidos sin cubrimiento
para anaerobios
• Exudados sanguinolentos negros
• Coinfección con aerobios
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

18. Complejos de D. Haffajee & Socransky 2008
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

19. MICROORGANISMOS ANAEROBIOS
NO ESPORULADOS
GRAM POSITIVOS
Bacilos Cocos
• Actinomyces • Parvimonas(Micromonas)
• Lactobacillus • Ruminococcus
• Arachnia • Sarcina
• Bifidobacterium
• Propionibacterium
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

20. Género Actinomyces
Laboratorio de Microbiología Oral. UIBO Universidad El Bosque
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

21. Género Actinomyces
• Especies: naeslundii
israelii
odontolyticus
viscosus
• Produce: Actinomicosis cervicofacial
• Involucrado en: fracturas de mandíbula,
mordeduras humanas, heridas dentales
• Complicaciones: osteomielitis, endocarditis,
infección generalizada
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

22. Parvimonas micra (Micromonas
micros)
Laboratorio de microbiología oral. UIBO Universidad El Bosque
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

23. Laboratorio de microbiología oral. UIBO Universidad El Bosque
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

24. • Involucrado en: Abscesos cerebrales, otitis
media, sinusitis, neumonía necrosante,
empiema, infecciones intraabdominales,
infecciones del tracto genital femenino,
bacteremia, osteomielitis, periodontitis
• Virulencia: enzimas hidrolíticas, indol,
betalactamasa
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

25. MICROORGANISMOS ANAEROBIOS
NO ESPORULADOS
GRAM NEGATIVOS
BACILOS
COCOS
• Bacteroides
• Veillonella • Treponema
• Acidaminococcus • Eikenella
• Tannerella
• Fusobacterium
• Campylobacter
• Selenomonas
• Porphyromonas
• Prevotella
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

26. Bacteroides Negro-pigmentados (BNP)
Porphyromonas gingivalis
Porphyromonas asaccharolytica
Laboratorio de Microbiología Oral. UIBO.
Porphyromonas endodontalis Universidad El Bosque.
Prevotella intermedia
Prevotella nigrescens
Prevotella corporis
Prevotella melaninogenica
Prevotella loescheii
Prevotella denticola
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

27. Porphyromonas gingivalis
Laboratorio de microbiología oral. UIBO Universidad El Bosque
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

28. Clasificación
Familia: Bacterioceae
Genero: Porphyromonas
Especie: gingivalis
Anteriormente llamada Bacteroides gingivalis
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

29. Caracteristicas Generales
• NO esporulado
• NO móvil
• Asacarolitico
• BNP
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
Holt SC, Kesavalu L, Walker S, Genco CA. Virulence Factors of P. gingivalis. Periodontol 2000 199: 168-238.

30. Fimbrias
 Adhesión a la
superficie.
 Coagregación
bacteriana.
 Proceso de
quimiotaxis.
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/d/d4/E._c
oli_fimbriae.png/180px-E._coli_fimbriae.png
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

31. Cápsula
• Inhibe la fagocitosis
• Aumenta la virulencia
•
• Impide la activación del
complemento.
• Baja en la producción de
polimorfoucleares
en.citizendium.org/.../350px-P.gingivalis_2.jpg
• Mascara del
lipopolisacarido.
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
Holt SC, Kesavalu L, Walker S, Genco CA. Virulence Factors of P. gingivalis. Periodontol 2000 199: 168-238.

32. Lipopolisacarido
Jain and Darveau. Periodontol 2000. 2010 October; 54(1): 53–70.
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

33. Lípido A de P. gingivalis
LPS de P.gingivalis es menos potente que el de otros microorganismos Gram
negativos
Jain and Darveau. Periodontol 2000. 2010 October; 54(1): 53–70. M.Sc.
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp,

34. El lípido A induce
FNT  IL 1 
IL8 IL6
INF 
Activación de osteoblastos
y macrófagos
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
http://3.bp.blogspot.com/_0J9Mp--p9nY/SaNMgO4hBQI/AAAAAAAAAMs/6pojbbGSjh8/s400/rx.jpg

35. Enzimas
• Altera los mecanismos de defensa.
• Destruye los elementos que intervienen
el la inflamación.
• Destrucción de tisular.
Hunt DE, Jones JV , Dowell JR. Selective Medium for the Isolation of Bacteroides gingivalis .J clin Microbiol,
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
1986 Mar, 441-445.

36. Enzimas
Fibrinolisinas Colagenasas
Proteinasas
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

37. Enzimas
Proteasas: Gingipaínas (enzima tipo tripsina)
Arg-gingipaínas y Lys-gingipaínas
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
http://en.citizendium.org/wiki/File:P.gingivalis_2.jpg

38. Curtis et al, 1999, Imamura et al, 2003
rgpA
Adhesina
Pro Cat HA1 HA2 HA3 HA4
MK---------GR YTPVE----------------------LLR SGQEI-----------------------------GKR AD-------AK PQ----------VR ANE-----------AVK
1704
227 719 1136 1271 1429
RgpA (cat) mt- RgpA (cat)
~ 54kDa ~ 70 - 80kDa HRgpA
~ 110kDa
rgpB
Pro Cat
MK----------TR YTPVE-------------------------------------------VK
736
229 651
RgpB mt - RgpB
~ 54kDa ~ 70 - 90kDa

39. kgp
Adhesina
Pro Cat HA1 HA2 HA3 HA4
MK---------NR DVYTD---------------------DVR ANEAK-----------------------------GKR AD-------AK PQ----------VR ANE-----------AVK 1723
228 737 1155 1290 1448
Homología entre RgpA y Kgp
Pro-HRgpA MK---------GR YTPVE----------------------LLR SGQEI-----------------------------GKR AD-------AK PQ----------VR ANE-----------AVK 1704
227 719 1136 1271 1429
23% 28% 46% 98% 98% 98% 97%
Pro-Kgp MK---------NR DVYTD---------------------DVR ANEAK-----------------------------GKR AD-------AK PQ----------VR ANE-----------AVK 1723
228 737 1155 1290 1448
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc. Curtis et al, 1999, Imamura et al, 2003

40. Hemaglutininas:
 Parece estar constituidas por proteínas y
lípidos asociados a Lipopolisacáridos
parietales participa en la colonización de
tejidos.
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

41. Metabolitos
 Ácidos grasos de cadena corta
 Producción de indol
 Amoniaco Lesionan los
tejidos del
 Ácido sulfhidrico
hospedador.
 Metilmercaptar
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

42. Otros Compuestos
Inhibir la quimiotaxis leucocitaria
Inducir la activación policlonal de los linfocitos B
Inhibir la producción del fibroblasto
Formación de una colagenasa que en ausencia de la
respuesta local del hospedador determinaría un proceso de
autodestrucción.
Mayorga de Fayad I, Slots J, Contreras A. Comparación entre las técnicas de PCR y cultivo para la identificación de las especies
periodontopáticas P. gingivalis y B. forsythus. Revista Científica Facultad de Odontología Universidad El Bosque. 2000, 6: 30-36.
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

43. Transmisión
Individuos sanos Flora normal
Patógeno exógeno Antes del desarrollo
de la periodontitis
Von Toil-Liden B, Alaluusua S, Wolf J, JousimiesH,Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
Diana Torppa J, AsikainenS.Periodontitis patient and the spouse: Periodontal bacteria
before and after treatment. J Clin Periodontol,1997,24:893-899.

44. Asociación en la enfermedad Periodontal
Capnocytophaga ochracea
Vellonella parvula
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

45. Asociación en la enfermedad Periodontal
www.lalibreriadelau.com/catalog/images/446_en...
clinicacolina.com/.../periodoncia-2.jpg
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
www.doctorfernandofuentes.cl/Imagenes/nivel%2...

46. Asociación en otras enfermedades
Brodala et al, 2005
Xiaojing LI, Kristin M. Kolltveit, LeiftrO, Ingar O. Systemic Diseases Caused by Oral Infection. Clinical Microbiology
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
Reviews, oct. 2000, p. 547–558

47. Asociación en otras enfermedades
Neumonia
Infecciones ováricas.
Apéndice y líquido peritoneal de pacientes con
apendicitis..
Matto J, Asikainen S, Vaisanen ML, Rautio M, Saarela M, Summanen P, Finnegold. Role of P. gingivalis, P.
intermedia y P. nigresens in extraoral and some odontogenic infections. Clin Infect Dis. 1997. 25 (Suppl 2): S 194-8.
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

48. Tannerella forsythia
Diana MarcelaLaboratorioBCL, Esp, M.Sc. oral. UIBO Universidad El Bosque
Castillo. de microbiología

49. Tannerella forsythia
Factores de virulencia
• Inmunógeno pobre
• Poco invasivo
• Proteasa tipo tripsina
• Sialidasa
• Adherencia con GR, PMN y fibroblastos
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

50. “S layer
• Revestimiento protector
• Filtro molecular
• Trampa de iones
• Adherencia e invasividad
• Hemaglutinación
• Formación de abscesos
en ratón
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

51. • T forsythensis Factores de crecimiento
Capacidad de adherencia
+ P gingivalis Ecosistema alterado (Gmur)
Patogénesis en periodontitis
• T forsythensis
Pérdida de tejido conectivo
+ P gingivalis Reabsorción ósea (Zambon)
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

52. Fusobacterium nucleatum
Diana MarcelaLaboratorioBCL, Esp, M.Sc. oral. UIBO Universidad El Bosque
Castillo. de microbiología

53. Fusobacterium nucleatum
Diana MarcelaLaboratorioBCL, Esp, M.Sc. oral. UIBO Universidad El Bosque
Castillo. de microbiología

54. Fusobacterium nucleatum
• En: Infecciones de cabeza y cuello,
pulmonares, periamigdalares,
intraabdominales, gingivitis y periodontitis,
halitosis
• Virulencia: Inhibición de la quimiotaxis,
endotoxina, leucotoxina, fosfatasa, ácido
butírico, amoniaco
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

55. Eikenella corrodens
Diana MarcelaLaboratorioBCL, Esp, M.Sc. oral. UIBO Universidad El Bosque
Castillo. de microbiología

56. Eikenella corrodens
►Oportunista
► Después de: -Traumas
-Mordeduras
-Golpes en cara
Osteomielitis Bacteremia Absceso cerebral
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

57. Eikenella corrodens
►Oportunista
► Después de: -Traumas
-Mordeduras
-Golpes en cara
Osteomielitis Bacteremia Absceso cerebral
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

58. Eikenella corrodens
Virulencia
► LPS
► Capa exopolisacárida
► S layer
► Proteínas de membrana externa
- E. corrodens + Streptococcus
- E. corrodens + Actinomyces
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

59. Morfología típica de las
colonias en medios sólidos
Muchas colonias exhiben dimorfismo.
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

60. Características Bioquímicas
Asacarolitico. Pocas características positivas.
Oxidasa, lisina y ornitina descarboxidasa, reducción de
nitratos
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

61. Factores de virulencia
El lipopolisacárido .
Capa de Exopolisacarido
Fimbrias (algunas cepas).
Maria T. Villar, Jennifer T. Helber, Becky Hood, Michael R. Schaefer, and Rona L. Hirschberg. Eikenella corrodens Phase Variation
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
Involves a Posttranslational Event in Pilus Formation . ournal of Bacteriology, July 1999, p. 4154-4160, Vol. 181, No. 14

62. • Diversas especies genética, fenotípica y
antigénicamente distintas.
• > 90% de individuos sanos están colonizados por E.
corrodens por 2-8 cepas genéticamente distintas
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

63. Enfermedad periodontal:
patógeno putativo
Osteomielitis de la
falange terminal del
dedo.
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

64. Infecciones de cabeza y cuello
•Infecciones en extremidades, abdomen,
SNC, tracto genital, ojo, glándula tiroidea y
pecho.
•Abscesos cerebrales, submaxilares
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
http://mundoinfo2010.blogspot.com/2010/10/todo-sobre-el-cancer.html

65. Septicemias y meningitis
Haemophilus
Aggregativacter actinomycetemcomitans
Grupo HACEK Cardiobacterium hominis
Eikenella corrodens
Kingella kingae
Endocarditis bacteriana: válvulas
naturales o protésicas
Harrison Principios de Medicina Interna, 17a edición. Parte 7. Enfermedades infecciosas . Sección 6.
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.
Enfermedades causadas por bacterias Gam negativas

66. Campylobacter rectus
Laboratorio de microbiología oral. UIBO Universidad El Bosque
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

67. Género Campylobacter
Especies: ► C. jejuni ► C. rectus
► C. coli ► C. concisus
► C. fetus ► C. curvus
► C. lari ► C. showae
► C. sputorum
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

68. Factores de Virulencia
Producción de toxinas, adhesinas, enterotoxinas similares a las de E. coli
García E, Cravioto A. Campylobacter y enfermedades asociadas . Rev Fac Med UNAM Vol.50 No.1 Enero-Febrero, 2007
http://www.lookfordiagnosis.com/images.php?term=Campylobacter+Rectus&lang=2&from2=48
www.google.com/imgres?imgurl=http://www.sigmaaldrich.com/etc/medialib/life-science/molecular-biology

69. Aggregatibacter actinomycetemcomitans
Laboratorio de Microbiología oral. UIBO Universidad El Bosque
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

70. Aggregatibacter actinomycetemcomitans
Involucrado en:
• Periodontitis agresivas
• Endocarditis
• Infecciones intracraneales
• Infecciones toráxicos
• Infecciones pulmonares
• Pneumonía necrotizante
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

71. Aggregatibacter actinomycetemcomitans
Involucrado en:
• Osteomielitis vertebral
• Artritis séptica
• Infecciones del tracto urinario
• Abscesos en: - Abdomen
- Cerebro
- Cara
- Manos
- Glándula tiroides
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

72. Factores de virulencia
Fives-Taylor, Meyer, Mintz. J periodontol

73. Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

74. Medios de transporte
Viability Medium Göteborg Anaerobically (VMGA III).
Transporte de muestras de placa subgingival.
Largos periodos de tiempo.
Transporte de otros especímenes.
Dahlén G, PipattanagovitP, RoslingB, Möller JR . A comparason of two transport media for saliva and subgingival samples.. Oral Microbiology and Innunology,
1993; 8: 375-382.

75. VMGA III
Solución salina Stock:
- Acetato fenilmercurico 0.05gr disuelto en 300 ml de agua destilada
- Glicerofosfato de sodio 100gr disuelto en 200ml de agua
- CaCl2 . 6H2O 1.6gr
- KCl 4.2gr
- NaCl 10gr
- MgSO4 - 7 H2O
- Agua destilada desionizada 300ml
- Azul de metileno 3gr
Solución A
- Triptosa 0.5gr
- Tiotona 0.5gr
- Agua destilada desionizada
Solución B
- Agar agar al 4% diluido en 50 ml de agua
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

76. Solución C
- Gelatina 50gr
- 300 ml de agua
Solución D:
- Ácido tioglicólico 0.5 ml
Solución E:
- Solución salina stock 100 ml
Solución F:
- Solución de cisteina 0.5gr disuelta en 10 ml de agua destilada
desionizada
Dahlén G, PipattanagovitP, RoslingB, Möller JR . A comparason of two transport media for saliva and subgingival
samples.. Oral Microbiology and Innunology, 1993; 8: 375-382.

77. Medios de transporte
Reduced Transport Fluid (RTF)
Medio liquido
Recomendado para el transporte de muestras de placa
subgingival y saliva
Transporte mas corto.
RTF
Dahlén G, PipattanagovitP, RoslingB, Möller JR . A comparason of two transport media for saliva and subgingival
samples.. Oral Microbiology and Innunology, 1993; 8: 375-382.

78. Embalaje de Muestras
Se deben enviar en un recipiente de paredes duras protegido
de los golpes, evitar los cambios de presión.
No refrigeradas
Transporte en corto tiempo
http://www.mediavida.com/foro/6/laboratorio-bioseguridad-nivel-4-402973/4

79. Procesamiento de la muestra
VMGA III
TSBV -1 -2 -3 -4 -5
TSBV
Brucella
Brucella Brucella
5-10% de
CO2
http://www.labplaza.co.kr/mallimg/m37615.jpg Condiciones anaeróbicas

80. Sistemas anaeróbicos para cultivo
Jarras de anaerobiosis Gas pack:
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

81. Sistemas anaeróbicos para cultivo
Jarras de anaerobiosis con sobres descartables:
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

82. Sistemas anaeróbicos para cultivo
Bolsas para anaerobiosis:
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

83. Sistemas anaeróbicos para cultivo
Cámara de guantes:
Koneman Elmer. Diagnostico Microbiológico. Texto y Atlas a color. Editorial panamericana Quinta edición, 1999. Cap 14
Henry D. Isenberg. Essential procedures for Clinical Microbiology. ASM (American Society for Microbiology. PRESS.1998. Section 3.

84. Sistemas anaeróbicos para cultivo
Jarras de mantenimiento:
Koneman Elmer. Diagnostico Microbiológico. Texto y Atlas a color. Editorial panamericana Quinta edición, 1999. Cap 14
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

85. Coloración de Gram
Fusobacterium spp
Laboratorio de Microbiología Oral. Instituto UIBO
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

86. Coloración de Gram
Micromonas micros
Laboratorio de Microbiología Oral. Instituto UIBO Actinomyces spp
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

87. Coloración de Gram
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

88. Morfología de la colonia
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO:
.
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO
Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.

89. Morfología de la colonia
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO
Diana Marcela Castillo. Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO:
BCL, Esp, M.Sc.

90. Morfología de la colonia
.
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO
.
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO

91. Morfología de la colonia
.
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO
.
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO

92. Morfología de la colonia
.
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO
Koneman Elmer. Diagnostico Microbiológico. Texto y Atlas a color.

93. Pruebas rápidas
 Indol
Triptofanasa Triptofano
Indol
Reactivo Kovacs.

94. Pruebas rápidas
2
Catalasa H2O2
H2O
Actinobacillus actnomycetemcomitans Actinobacillus actnomycetemcomitans
Laboratorio de Microbiología Oral.Instituto UIBO Laboratorio de Microbiología Oral.Instituto UIBO

95. Pruebas rápidas
• Disco SPS (polianetol sulfonato de sodio):
Utilizados para diferenciar cocos anaerobios.
P. anaerobius > o = a 12mm
P. micra < o = a 10 mm
P. asaccharolyticus no presenta halo de inhibición

96. Pruebas rápidas
Capmylobacter rectus
Movilidad:
http://www.wikidict.de/de/toplist/es/Motilidad

97. Pruebas rápidas
• Fluorescencia: exposición a la luz ultravioleta de onda larga
(366nm).
Prevotella spp (Pigmentadas). Positivo
Porphyromonas gingivalis Negativo
Prevotella spp, UV Positivo
Laboratorio de Microbiología Oral. Instituto UIBO .

98. Pruebas rápidas
• Producción de pigmentos: Porphyromonas spp y Prevotella spp
Prevotella spp. Prevotella spp.
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO: Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO

99. Pruebas rápidas
•CAAM: 7- (N-carbobenoxy-gly-cylglycylargininamido)-4 methylcoumarin.
Hcl, (un péptido fluorogénico)
•Hidrólisis de proteasas
Prueba de CAAM
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO

100. Laboratorio de Microbiología Oral. Instituto UIBO.

101. IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
www.google.com/images/prevotella
Laboratorio de Microbiologia Oral. Instituo UIBO.

102. IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
(S) >2ug/ml
VANCOMICINA ENZIMAS PROTEOLITICAS
VIT. K
HIERRO
UV (-)
CAAM (+)
INDOL(+)
Porphyromonas gingivalis Micromonas micros
(R)VANCOMICINA
VIT. K
HALITOSIS
HIERRO
SH2+
UV (+)
METILMERCAPTANO
CAAM (-)
INDOL(+)
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO:
Fusobacterium nucleatum Prevotella sp.
Laboratorio de Microbiologia Oral. Instituo UIBO.

103. IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
5-10% CO2
CATALASA (-)
OXIDASA (-)
GLUCOSA (+)
SUCCINATO
Dialyster pneumosintes Capnocytophaga ochracea
5-10% CO2 2-5% OXIGENO
CATALASA (+) CATALASA (-)
MOVILIDAD (-) RAFINOSA OXIDASA (+)
XILOSA MOVILIDAD (+
ACIDO SULFHIDRICO
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO:
Campylobacter rectus
Actinomyces sp.
Laboratorio de Microbiologia Oral. Instituo UIBO.

104. IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
5-10% CO2
CATALASA (+)
OXIDASA (+)
LACTOSA (+)
MOVILIDAD (-)
Actinobacillus actinomycetemcomitans Catalasa
NEURAMINIDASA CATALASA (-)
BANA (+) OXIDASA (+)
PELOS ASIMETRICOS
MOVILIDAD (-)
Laboratorio de microbiología Oral. Instituto UIBO
Tanerella forsithya Eikenella corrodens
Laboratorio de Microbiologia Oral. Instituo UIBO.

105. IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS
Laboratorio de Microbiologia Oral. Instituo UIBO.

106. SUSCEPTIBILIDAD MICROBIANA

107. Métodos moleculares
http://es.wikipedia.org/wiki/PCR_en_tiempo_real
Castillo DM, Sanchez-Beltran MC, Castellanos JE, Sanz I, Mayorga-Fayad I, Sanz M, Lafaurie GI. Detection of specific periodontal microorganisms
from bacteraemia samples after periodontal therapy using molecular-based diagnostics. J Clin Periodontol 2011.

108. Diana Marcela Castillo. BCL, Esp, M.Sc.