1. “Nada es veneno , Todo es veneno, La diferencia esta en la dosis”
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
“Calidad, Pertinencia y Calidez”
UNIDAD ACADÉMICA DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
PRÁCTICA N° BF.8.01-1
TEMA: SINTOMATOLOGIA Y DIAGNOSTICO DE LAS INTOXICACIONES,
SINDROME TOXICOS, TOXICOS VOLATILES Y MINERALES.
NOMBRE DE LA PRÁCTICA:
INTOXICACIÓN POR METANOL.
DATOS INFORMATIVOS
ALUMNA: Andrea Estefanía Cuenca Chimbo
CARRERA: Bioquímica y Farmacia
CICLO/NIVEL: 8vo Semestre “B”
FECHA DE REALIZACIÓN DE LA PRÁCTICA: 31 de Mayo del 2017.
FECHA DE ENTREGA DE LA PRÁCTICA: 7 de Junio del 2017.
DOCENTE RESPONSABLE: DR. CARLOS GARCÍA MSc
GRUPO: 3
1. OBJETIVOS
realizar pruebas de reacciones de identificación para la presencia de
metanol en las vísceras de pollo.
Adquirir destrezas en el reconocimiento de intoxicación por metanol
positiva, mediante la coloración de dichas pruebas de identificación
2. FUNDAMENTOS TEÓRICOS
El metanol, es un compuesto químico del grupo de los alcoholes, también
conocido bajo el nombre de alcohol metílico, siendo además, el alcohol más
sencillo del grupo. Su fórmula es CH3OH, teniendo una estructura química
muy similar a la del agua, diferenciándose tan sólo en los ángulos de enlace.
Cuando el metanol está a temperatura ambiente, en condiciones normales, se
presenta en estado líquido e incoloro, siendo bastante tóxico, e inflamable.
Tiene poca viscosidad y posee un olor característico a frutas bastante
penetrable, y perceptible a partir de los 2 ppm. Es un compuesto que puede
CALIFICACIÓN
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ser utilizado tanto como disolvente o como combustible, siendo bastante
miscible tanto en agua como en otros solventes de tipo orgánico.
El Metanol es muy toxico y de acción rápida, en la cual se realizó la
experimentación en viseras de pollo. Mediante una solución madre que se
obtuvo por medio de un proceso de destilaciones le realizaron pruebas de
identificación para dar a conocer la presencia de metanol en los órganos de
experimentación.
3. INSTRUCCIONES
Trabajar con orden, limpieza y sin prisa.
Mantener las mesas de trabajo limpias y sin productos, libros, cajas o
accesorios innecesarios para el trabajo que se esté realizando.
Llenar ropa adecuada para la realización de la práctica: bata, guantes,
mascarilla, gorro, zapatones.
Utilizar la campana extractora de gases siempre que sea necesario.
4. MATERIALES, EQUIPOS, REACTIVOS Y SUSTANCIAS.
MATERIALES EQUIPOS SUSTANCIAS MUESTRA
Vasos de
precipitación
Pipetas
Erlenmeyer
Tubos de
ensayo
Probeta
Perlas de vidrio
Agitador
Embudo
Guantes
Mascarilla
Gorro
Mandil
Cronómetro
Estuche de
disección
Fosforo
Pinzas
Cocineta
Espátula
Gradilla
Aparato de
destilación
Balanza
Baño maría
Campana
Cloruro de
fenilhidracina
Nitroprusiato
sódico
Hidróxido de
sodio
Cloruro de fenil
hidracina
Sulfato férrico
Ácido sulfúrico
Leche
Cloruro férrico
Sulfato ferroso
Ácido clorhídrico
Formol
Destilado de vísceras
del animal de
experimentación
5. PROCEDIMIENTO
Limpiar el mesón de trabajo y tener a mano todos los materiales a utilizarse
Preparar una solución de formaldehido al 4%.
Recolectar sus fluidos y vísceras picadas lo más finas posibles en un vaso
de precipitación.
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Verter las vísceras en un vaso de precipitación y agregar 50 mL ácido
tartárico al 4% y perlas de vidrio.
Destilar, recoger el destilado en NaOH 0.1 N.
Con aproximadamente 15mL del destilado recogido (muestra) realizar las
reacciones de reconocimientos.
6. REACCIONES DE IDENTIFICACIÓN
REACCIÓN DE SCHIFF: A una pequeña porción de la muestra, se añade
1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona
unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y
agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que
decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora
totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido
sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada
(Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en
caso de positivo.
REACCIÓN DE RIMINI: A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de
cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de
sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio,
se produce una coloración azul intensa.
CON LA FENILHIDRACINA: En un medio fuertemente acidificado con
ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un
pedacito de cloruro de fenil hidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro
de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se
obtiene una coloración rojo grosella.
CON EL ÁCIDO CROMOTRÓPICO: Con este ácido en un medio
fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una
coloración roja después de calentarla ligeramente.
REACCION DE MARQUIS: Se toma 1ml de destilado se agregan 5ml de
ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de
morfina(0,2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico
concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color
violeta.
REACCIÓN DE HEHNER: Se mezcla una gota de destilado con algunos
mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se
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le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en
500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se
produce un color violeta o azul violeta.
7. GRÁFICOS
Trituramos las vísceras
completamente para
llevarlas a destilación.
Agregamos metanol en el
vaso de precipitación
donde se encuentra la
muestra.
Se pasa a la destilación,
donde obtendremos la
solución madre, con las que
haremos las reacciones de
identificación,
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8. RESULTADOS OBTENIDOS
REACCIÓN DE SCHIF
Positivo no característico
REACCIÓN DE RIMINI
Positivo característico
REACCIÓN CON FENILHIDRACINA
Positivo característico
REACCIÓN DE MARQUIS
Positivo no característico
REACCIÓN DE ÁCIDO
CRONOTROPICO
Positivo característico
REACCIÓN DE HEHNER
Positivo no caracteristico
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9. OBSERVACIONES
A través de las pruebas en medios biológicos, observamos la coloración de las
reacciones lo cual corroboro para determinar la presencia del toxico (metanol)
en el animal de experimentación.
10.CONCLUSIONES
Gracias a esta práctica se logró determinar la presencia de metanol en las vísceras de
pollo por medio de las reacciones de identificación de metanol, previamente
establecidas por la guía de prácticas, dando como resultado positivos a excepción de la
Reacción de Schif , reacción de Marquis y la Reacción de Hehner que formaron una
precipitación dando como negativas la pruebas.
11.RECOMENDACIONES
Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
Preparar correctamente las sustancias a la concentración requerida.
Obtener una buena cantidad del destilado para así realizar las diferentes
reacciones de reconocimiento.
12.CUESTIONARIO
Farmacocinética del metanol?
El metanol es absorbido y rápidamente distribuido por el agua del cuerpo. No
se une a proteínas. Es metabolizado lentamente por el alcohol-
deshidrogenasa. La vida media oscila entre 2 y 24 horas. Apenas cerca del
3% es excretado sin cambios por el riñón y menos del 10% a través del
pulmón. (Instiruto Nacional de Salud, 2010)
Cuáles son los síntomas que se presentan durante el periodo de latencia
en un paciente intoxicado por metanol?
Cefalea precoz (generalmente pulsátil), gastritis, náuseas, vómito, vértigo,
incoordinación motora. Depresión leve del Sistema Nervioso Central. (Instiruto
Nacional de Salud, 2010)
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Cuáles son los dos metabolitos causantes del cuadro clínico de
intoxicación por metanol?
El formaldehído y el ácido fórmico. Se ha identificado al ácido fórmico como
el metabolito responsable de los efectos tóxicos del metanol, el cual inhibe la
citocromo oxidasa, interfiriendo así directamente con el transporte de
electrones en la cadena respiratoria Existe evidencia de que este ácido inhibe
la función mitocondrial en la retina y aumenta el estrés oxidativo (Instiruto
Nacional de Salud, 2010)
cuáles son los dos antídotos aplicados para controlar una intoxicación
aguda por metanol?
Existen dos antídotos que actúan bloqueando la enzima alcohol
deshidrogenasa, el 4-methylpyrazole (fomepizole) y el alcohol etílico (etanol)
(10). Cuando no se dispone de ampollas de etanol absoluto se puede
suministrar por vía oral una bebida de alto contenido de éste alcohol (etanol),
como el vodka, el whisky (45-50%) o el aguardiente al 30%. (Instiruto Nacional
de Salud, 2010)
13.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Instiruto Nacional de Salud. (13 de Agosto de 2010). PROTOCOLO DE
VIGILANCIA Y CONTROL DE INTOXICACIONES POR METANOL .
Obtenido de
https://www.minsalud.gov.co/comunicadosPrensa/Documents/INTOXICA
CION_POR_METANOL.pdf
Macbell, C. (s.f.). Centro de control y Nivel de enfermedades. Recuperado el 4
de Junio de 2015, de http://emergency.cdc.gov/agent/cyanide/espanol/
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14.ANEXOS
15.GLOSARIO
Neuropatía periférica.- La neuropatía periférica significa que estos
nervios no funcionan apropiadamente. Esta neuropatía puede ser un daño
a un solo nervio o a un grupo de nervios.
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Irritación.- Estado inflamatoria o una reacción dolorosa del organismo
causado principalmente por algún tipo de alergia a agentes químicos o a
otros estímulos.
Dosis letal.- Necesaria para provocar la muerte de un determinado
porcentaje de individuos.
Aerobios.-Se denominan aerobios o aeróbicos a los organismos que
pueden vivir o desarrollarse en presencia de oxígeno.
Anaerobios.-Son los que no utilizan oxígeno (O2) en su metabolismo,
más exactamente que el aceptor final de electrones es otra sustancia
diferente del oxígeno
Xenobiótico: Es todo compuesto químico que no forme parte de la
composición de los organismos vivos.
Tóxico: Se utiliza como adjetivo para designar y calificar a todos aquellos
elementos o sustancias que resulten nocivos y dañinos para algún tipo de
organismo.
Toxicidad: Al grado de efectividad que poseen las sustancias que, por su
composición, se consideran tóxicas. Se trata de una medida que se
emplea para identificar al nivel tóxico de diversos fluidos o elementos.
Toxicocinética.- Es el conjunto de fenómenos que experimenta el tóxico
desde su entrada a un organismo hasta su eliminación.
Acidosis.- Es un término clínico que indica un trastorno
hidroelectrolítico que puede conducir a academia, y que viene definido por
un pH sanguíneo inferior a 7.35. La acidosis puede ser metabólica o
respiratoria.
16. AUTORIA
DR. CARLOS GARCÍA MSc
FIRMA DE RESPONSABILIDAD
__________________________
ANDREA CUENCA CH.
0706744075
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