Este documento describe un procedimiento para determinar la concentración de triglicéridos en suero humano. Se utilizan reactivos químicos y un espectrofotómetro para medir la absorbancia a 510 nm de muestras, un calibrador y un blanco. Los resultados se usan en una fórmula para calcular la concentración de triglicéridos, la cual se encontró dentro de los valores normales para el paciente. El procedimiento permite evaluar el riesgo cardiovascular mediante la medición de los niveles de triglicéridos en sangre.

1. DETERMINACIÓN CUANTITATIVADE TRIGLICÉRIDOS EN SUERO HUMANO
OBJETIVOS:
 Determinar la concentración de los triglicéridos en el suero. Mediante fórmula de
absorbencia para obtener la concentración de triglicéridos de un paciente.
MATERIALES:
• Micropipetas de 10 μL y 1000 μL
• Tubos de prueba 5ml
• Gradillas
• Espectrofotómetro
• Puntas para micropipetas
• Reactivos : triglicéridos(GPO-PAP)
•
Conservados entre 2° y 8°C. y protegidos de la luz, estables hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta.
Composición del Reactivo Enzimático:
o Buffer Pipes pH 7,2 50 mM
o Lipasa (microbial) >1000 U/l
o Glicerokinasa >500 U/l
o Glicerol-3-fosfato oxidasa >2000 U/l
o Peroxidasa >1000 U/l
o 4-Amino antipirina 1 mM
o Acido 3,5-Dicloro-2-Hidroxibencensulfónico 1.5 mM
o Adenosín trifosfato (ATP) 0.50 mM
o Mg2+ 5 mM
o Estabilizantes y preservantes no reactivos c.s

2. PROCEDIMIENTO:
1. Llevar todos los reactivos a temperatura de trabajo en el laboratorio. Después de su uso
refrigerarlos
2. Rotular los 3 tubos: B=blanco, M=muestra, C=Calibrador
- En nuestra mesa nos tocó rotular la M=muestra
3. Tener las siguientes recomendaciones para el tratamiento de la muestra, ya denotados
en la práctica anterior.
4. Agregar las diferentes reactivos y suero, en el siguiente esquema:
- Luego de echar el reactivo enzimático mL (Valtek) , la muestra reposo 15 minutos a
temperatura ambiente, después se agregó el suero o plasma reposo y cambien de
color.
5. Mezclar e incubar 5 minutos a 37°C o temperatura ambiente (20° a 25°C).
6. Calibrar el espectrofotómetro a una λ 510 nm
Tubo B Tubo C Tubo M
Suero (mL) - - 0,01
Calibrador
(mL)
- 0,01 -
Reactivo (mL) 1,00 1,00 1,00
Agregamosel suero Agregamosel reactivo(mL)

3. 7. Leer las absorbancias ajustando a cero el espectrofotómetro con el blanco de reactivo.
El color resultante es estable por lo menos treinta minutos.
8. Realizar los cálculos usando la siguiente fórmula
-En grupo con las otras mesas juntamos valores del resultado del el espectrofotómetro a una λ
510 nm y resolvimos:

4. RESULTADOS:
 Encontramos los valores de concentración de triglicéridos del paciente gracias a las
formula de la absorbancia
 A la longitud de 510 nanómetros obtuvimos las tres distintas observancias.
CONCLUCIONES:
 Por medio de esta práctica, se lograron determinar que el nivel de triglicéridos en la
sangre, el resultado obtenido se encuentra en los valores normales.
 La prueba de triglicéridos es un análisis que se utiliza para determinar el nivel de estos
en la sangre, así como también para evaluar la función hepática y un posible riesgo
cardiovascular. Los triglicéridos son transportados a todo el organismo para dar energía
o bien para ser almacenados como grasa.
CUESTIONARIO
1. La hipertrigliceridemia, como afecta la salud cardiovascular
La evaluación de triglicéridos en sangre es importante para el diagnóstico y seguimiento de
lashipertrigliceridemias, ya sean de origen genético o secundario entre otras enfermedades.
Valores elevados aumentan el riego de arteriosclerosis y de enfermedad coronaria.
Hipertrigliceridemia
o Pancreatitis
o Agrandamiento del hígado
o Agrandamiento del bazo
o Depósitos grasos en la piel conocidos como xantomas.-Fuera de esto, los triglicéridos
pueden no provocar otros síntomas hasta quese presentan enfermedades cardiacas o
de los vasos sanguíneos.
o Factor importante de riesgo de arterosclerosis.-Arteriopatía coronaria