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UNIVERSIDAD PUBLICA DE EL ALTO
FACULTAD DE MEDICINA
CARRERA DE MEDICINA
CATEDRA DE CIRUGIA CABEZA Y CUELLO.
FELIPE SALCEDO JAVERCATO
DR. Alejandro Ponce
PROCEDIMIENTO
MÉDICO REALIZADO POR EL MEDICO , EL CUAL CONSISTE EN LA
EXTRACCIÓN DE UNA MUESTRA TOTAL O PARCIAL DE TEJIDO PARA
SER EXAMINADA, EL ESTUDIO TANTO MACROSCÒPICO
COMO MICROSCÓPICO QUE ESTUDIA LOS TEJIDOS OBTENIDOS, A FIN
DE
EMITIR UN DIAGNÓSTICO, PRONOSTICO Y SEGUIMIENTO.
BIOS = VIDA
OPSIS = VISI NÓ

MÉTODOS DE LA ANATOMÍA
PATOLÓGICA
• Patología Postmortem. Autopsias
•Patología Quirúrgica (CABEZA Y CUELLO). Biopsias
• Citopatología
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TIPOS DE BIOPSIA
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Incisional
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Consiste en el estudio de materiales obtenidos
durante un acto quirúrgico, generalmente el
material está representado por todo o parte de un
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Biopsias endoscópicas: es un tipo de biopsia dirigida que
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BIOPSIA INTRAOPERATORIA
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acto operatorio para determinar la naturaleza de
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adecuada.
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•Requiere de instrumental (criostato) y ambiente adecuados.
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• Consiste en la obtención de un cilindro de tejido del
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• Se aplica para el diagnóstico de patologías que
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localizada solida (tumor)
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BIOPSIA POR PUNCIÓN
Puede realizarse :
• A ciegas: sobre el sitio donde se sospecha que se encuentra la
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BIOPSIA POR PUNCIÓN
BIOPSIA POR PUNCIÓN DIRIGIDA
BIOPSIA POR PUNCIÓN
BIOPSIA POR PUNCIÓN
PASOS A SEGUIR
• Recepción del material: todo el material ingresado
deberá ir acompañado de los datos personales del
paciente, breve resumen de la Historia clínica, tipo y
características, motivo del estudio solicitado y
diagnóstico presuntivo.
• Fijación: permite preservar la estructura y funcion de
los tejidos e impedir la autolisis.
Consiste en sumergir el material en una solución de
formol al 10 % en recipiente de boca ancha.
PASOS A SEGUIR
• Macroscopía: consiste en la inspección del material y su descripción, lo más
semejante a la realidad, indicando los siguientes aspectos:
ÓRGANOS PARENQUIMATOSOS
• Tamaño, color, forma, superficie externa
• Peso
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PASOS A SEGUIR
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PASOS A SEGUIR
• Existen protocolos de descripción macroscópica tipo.
• Se complementa con la selección de muestras representativas, lo
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PASOS A SEGUIR
• Procesamiento histológico: Los pasos a seguir son:
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Permite extraer el agua de los tejidos.
• Baño e inclusión en parafina
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PASOS A SEGUIR
• Diagnóstico: en algunos casos se utilizan protocolos microscópicos o breves
descripciones microscópicas seguidas por uno o más diagnósticos que incluirán
datos de valor pronóstico y de orientación terapéutica.
INFORME ANATOMOPATOLÓGICO
Debe reunir las siguientes condiciones:
• Datos del paciente
• Descripción macro y microscópica detallada pero concreta
• Protocolo
• Diagnóstico jerarquizado
• Debe concretarse a los aspectos relacionados con el pronóstico y la terapéutica.
BIBLIOGRAFÍA
• Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992
• Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed.
Doyma.1989.
• Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional.
4º Ed. 1990
• “Guía de Métodos”. Sánchez Segura, M.; Nieman Y.;Cátedra de
Anatomía Patológica, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de
Tucumán, 2001.


CATEDRA DE CIRUGIA CABEZA Y CUELLO.
FACULTAD DE MEDICINA
CARRERA DE MEDICINA
INFORME ANATOMOPATOLÓGICO
Debe reunir las siguientes condiciones:
• Datos del paciente
• Descripción macro y microscópica detallada pero concreta
• Protocolo
• Diagnóstico jerarquizado
• Debe concretarse a los aspectos relacionados con el pronóstico y la terapéutica.
BIOPSIA
• Técnica de rutina:
Hematoxilina- eosina
• Coloraciones especiales:
Giemsa (Helicobacter Pylori)
Azul Alcian (Esófago de Barret)
Ziehl Nielsen (BAAR)
Rojo Congo (Amiloide)
PAS (Hongos)
OTROS MÉTODOS
• Microscopía electronica
• Inmunofluoresencia
• Polarización
• Inmunomarcación
• Patología Molecular:
Captura híbrida
PCR
MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
-Alcanza una magnificación de 500.000 aumentos.
-Utiliza un haz de electrones.
-Se enfoca por campos magnéticos sobre pantalla
fluorescente o placas fotográficas.
-Se usa por ej. en patología glomerular para detectar
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basales,mesangio, etc.
INMUNOFLUORESCENCIA
•En tejidos sin fijación.
•Usa coloración fluorescente que debe registrarse
microfotograficamente por que se degrada.
•Forma un trípode diagnóstico para las enfermedades
glomerulares con la ME y los cortes de rutina con H-E,
PAS y Tricrómico
Depósitos lineales de IgG en Riñón. Sindrome de Goodpasture.
X 100
POLARIZACIÓN
•Identifica el carácter birrefringente de ciertos
tipos de depósito fibrilar colágeno.
•Por ejemplo: amiloide
INMUNOMARCACIÓN
Consiste en la detección de antígenos existentes en células o
tejidos
Utiliza anticuerpos monoclonales o policlonales copulados
con una enzima (peroxidasa) que se unen con dicho
antígeno.
Se visualiza con microscopía óptica mediante coloración
marrón del núcleo o citoplasma.
INMUNOMARCACIÓN
Epiteliales: citoqueratina 7 y 20.
Mesenquimáticos: vimentina, desmina.
Linfoides: antígeno común leucocitario-
SNC: S100, PGFA-
HMB 45: melanoma
CANCER DE MAMA
Inmunomarcación
Estrogénicos
Progesterónicos
Catepsina D
C-erb B-2 (HER2-neu)
PATOLOGÍA MOLECULAR
•Permite conocer el mecanismo por el
cual se origina una neoplasia.
•Aporta información de valor pronóstico.
•Predice en algunos casos la respuesta a
la terapia.
VALOR PRONÓSTICO
• Cambio cromosómico primario: asociado a los mecanismos
moleculares responsables de la neoplasia.
• Cambio cromosómico secundario: la enfermedad sigue un curso
más agresivo, haciéndose más resistente a la terapia y difícil de
obtener una remisión completa.
• Presencia o ausencia de células normales: La ausencia indica peor
pronóstico.
• Presencia de dobles diminutos: confiere mayor resistencia a la
terapia.
TÉCNICA DE HIBRIDIZACIÓN IN SITU
(HIS)
•Permite detectar y localizar secuencias específicas de
ADN o ARN.
•Requiere de una desnaturalización (rotura de los
enlaces) de ADN de la muestra y de la sonda utilizada.
•Hibridación de los ADN de la muestra y la sonda por
complementariedad de bases.
•Interpretación microscópica de acuerdo a la sonda
utilizada.
TIPOS DE SONDA
• Centroméricas: marcan la región centromérica. Puede
valorar la presencia o ausencia de alteraciones numéricas.
• De pintado cromosómico: abarcan todo el cromosoma. Para
alteraciones numéricas y estructurales en metafase y
translocaciones complejas.
• De secuencia única: marcan regiones cromosómicas muy
concretas. Para alteraciones numéricas y estructurales en
metafase e interfase.
NUEVAS TÉCNICAS DE HIS
• Multicolor FISH: 24 sondas de marcado cromosómico marcados con
fluorescencia sobre metafase.
• Mulibanding FISH: alteración estructural dentro de un mismo cromosoma, utiliza
células en división.
• Hibridación Genómica comparada (HGC): detecta cambios numéricos de
secuencias de ADN en tumores de índice proliferativo bajo.
MICROARRAYS
• Son soportes sólidos en los que moléculas de ADN de cadena simple se fijan y
permiten identificar por hibridación la expresión de una multitud de genes de
una muestra biológica.
• Aislamiento de ARN de tejido normal y de una muestra de referencia.
• Síntesis de ADN y marcaje con dos colorantes fluorescentes (Cy3 y Cy5).
• Hibridación sobre el array.
• La diferencia de expresión del ARN entre ambos tejidos se puede evaluar a
partir de la relación Cy3/Cy5 para cada gen.
• El análisis nos permite definir el patrón de expresión génica para cada
muestra concreta.
MICROARRAYS
Principales aplicaciones:
• Clasificación de neoplasias morfológicamente similares pero con
comportamiento biológico heterogéneo.
• Evaluación del pronóstico.
• Respuesta al tratamiento.
PCR
• Preparación y dosaje de ácidos nucleicos (ADN-ARN) por reacción en
cadena de polimerasa (PCR), técnica de amplificación in vitro de
secuencias conocidas del genoma, que permite la detección de
deleciones, mutaciones o rearreglos cromosómicos
PCR
NO OLVIDAR
• Conocer datos clínicos y exámenes complementarios del paciente.
• Seleccionar el tipo de biopsia a realizar según la patología y órgano afectado.
• Envío del material en óptimas condiciones y con los datos pertinentes.
• Fijación y procesamiento adecuados.
• Descripción macroscópica.
• Diagnósticos microscópicos.
• Aspectos relacionados con el pronóstico y terapéutica.
BIBLIOGRAFÍA
• Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992
• Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989.
• Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional. 4º Ed. 1990
• XXII Congreso de la SEAP. Curso largo de Patología Molecular. 2005
• XXII Congreso de la SEAP. Aplicaciones diagnósticas del FISH en Patología. 2005
• XXII Congreso de la SEAP. Seminario del club de Inmunohistoquímica y Patología
Molecular. 2005
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Biopsia

  • 1.  UNIVERSIDAD PUBLICA DE EL ALTO FACULTAD DE MEDICINA CARRERA DE MEDICINA CATEDRA DE CIRUGIA CABEZA Y CUELLO. FELIPE SALCEDO JAVERCATO DR. Alejandro Ponce
  • 2. PROCEDIMIENTO MÉDICO REALIZADO POR EL MEDICO , EL CUAL CONSISTE EN LA EXTRACCIÓN DE UNA MUESTRA TOTAL O PARCIAL DE TEJIDO PARA SER EXAMINADA, EL ESTUDIO TANTO MACROSCÒPICO COMO MICROSCÓPICO QUE ESTUDIA LOS TEJIDOS OBTENIDOS, A FIN DE EMITIR UN DIAGNÓSTICO, PRONOSTICO Y SEGUIMIENTO. BIOS = VIDA OPSIS = VISI NÓ 
  • 3. MÉTODOS DE LA ANATOMÍA PATOLÓGICA • Patología Postmortem. Autopsias •Patología Quirúrgica (CABEZA Y CUELLO). Biopsias • Citopatología • Experimental • Otros
  • 4. TIPOS DE BIOPSIA De órgano Total Parcial Intraoperatoria Punción Biopsia Incisional Excisional Dirigidas No dirigidas
  • 6. BIOPSIA INCISIONAL Cuando toma parte de la lesión. Ej: punch de en lesion extensa de piel biopsia endoscópica en tumor > 2cm
  • 7. BIOPSIA ESCISIONAL Cuando en la muestra se extrae la lesión en su totalidad. Ej: losange de piel polipectomía
  • 8. BIOPSIA DE ÓRGANO Consiste en el estudio de materiales obtenidos durante un acto quirúrgico, generalmente el material está representado por todo o parte de un órgano. El procesamiento se realiza en base a un protocolo pre establecido que indica pautas que van desde la apertura de la pieza hasta obtención de muestras representativas.
  • 12. BIOPSIAS DIRIGIDAS Biopsias endoscópicas: es un tipo de biopsia dirigida que permite la obtención del material de órganos huecos ( tubo digestivo, árbol respiratorio, vias urinarias) o cavidades (pleural, pericardica, abdominal)
  • 13. BIOPSIAS DIRIGIDAS Biopsias colposcopicas : se utilizan en lesiones precursoras de cuello uterino.
  • 14. BIOPSIAS DIRIGIDAS Biopsias estereotáxicas: con la ayuda de métodos imagenológicos se localiza tridimensionalmente la lesión y se obtiene tejido. Ej mama y SNC
  • 16. BIOPSIA INTRAOPERATORIA Es el estudio del material obtenido durante el acto operatorio para determinar la naturaleza de la lesión y emitir un diagnóstico que permita al cirujano adoptar una conducta quirúrgica adecuada.
  • 17. BIOPSIA INTRAOPERATORIA •Requiere de instrumental (criostato) y ambiente adecuados. •Se utiliza el tejido en fresco. •Fijador es el frío.
  • 23. BIOPSIA POR PUNCIÓN • Consiste en la obtención de un cilindro de tejido del órgano afectado, utilizando agujas especiales de grueso calibre 0.2cm de diametro. • Se aplica para el diagnóstico de patologías que afectan a órganos parenquimatosos en forma difusa (cirrosis hepatica, glomerulopatias) o localizada solida (tumor) • El material obtenido se incluye totalmente y se procesa en forma seriada.
  • 24. BIOPSIA POR PUNCIÓN Puede realizarse : • A ciegas: sobre el sitio donde se sospecha que se encuentra la lesión. • Dirigida: mediante aparatos que permiten visualizar el sitio de punción (ecografía, TAC) Ej: punción biopsia de mama con mammotome.
  • 29. PASOS A SEGUIR • Recepción del material: todo el material ingresado deberá ir acompañado de los datos personales del paciente, breve resumen de la Historia clínica, tipo y características, motivo del estudio solicitado y diagnóstico presuntivo. • Fijación: permite preservar la estructura y funcion de los tejidos e impedir la autolisis. Consiste en sumergir el material en una solución de formol al 10 % en recipiente de boca ancha.
  • 30. PASOS A SEGUIR • Macroscopía: consiste en la inspección del material y su descripción, lo más semejante a la realidad, indicando los siguientes aspectos: ÓRGANOS PARENQUIMATOSOS • Tamaño, color, forma, superficie externa • Peso • Consistencia • Hallazgos • Superficie de corte
  • 31. PASOS A SEGUIR ÓRGANOS HUECOS • Tamaño, forma, serosa • Peso • Pared (espesor, consistencia, hallazgos) • Mucosa (color, pliegues, aspecto, hallazgos) • Luz
  • 32. PASOS A SEGUIR • Existen protocolos de descripción macroscópica tipo. • Se complementa con la selección de muestras representativas, lo cual también está pre-establecido en los protocolos
  • 33. PASOS A SEGUIR • Procesamiento histológico: Los pasos a seguir son: • Deshidratación: pases sucesivos en alcohol 96º, acetato (2) y Xilol (2). Permite extraer el agua de los tejidos. • Baño e inclusión en parafina • Corte • Coloración
  • 34. PASOS A SEGUIR • Diagnóstico: en algunos casos se utilizan protocolos microscópicos o breves descripciones microscópicas seguidas por uno o más diagnósticos que incluirán datos de valor pronóstico y de orientación terapéutica.
  • 35. INFORME ANATOMOPATOLÓGICO Debe reunir las siguientes condiciones: • Datos del paciente • Descripción macro y microscópica detallada pero concreta • Protocolo • Diagnóstico jerarquizado • Debe concretarse a los aspectos relacionados con el pronóstico y la terapéutica.
  • 36. BIBLIOGRAFÍA • Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992 • Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989. • Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional. 4º Ed. 1990 • “Guía de Métodos”. Sánchez Segura, M.; Nieman Y.;Cátedra de Anatomía Patológica, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Tucumán, 2001.
  • 38. INFORME ANATOMOPATOLÓGICO Debe reunir las siguientes condiciones: • Datos del paciente • Descripción macro y microscópica detallada pero concreta • Protocolo • Diagnóstico jerarquizado • Debe concretarse a los aspectos relacionados con el pronóstico y la terapéutica.
  • 39. BIOPSIA • Técnica de rutina: Hematoxilina- eosina • Coloraciones especiales: Giemsa (Helicobacter Pylori) Azul Alcian (Esófago de Barret) Ziehl Nielsen (BAAR) Rojo Congo (Amiloide) PAS (Hongos)
  • 40. OTROS MÉTODOS • Microscopía electronica • Inmunofluoresencia • Polarización • Inmunomarcación • Patología Molecular: Captura híbrida PCR
  • 41. MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA -Alcanza una magnificación de 500.000 aumentos. -Utiliza un haz de electrones. -Se enfoca por campos magnéticos sobre pantalla fluorescente o placas fotográficas. -Se usa por ej. en patología glomerular para detectar cambios mínimos en podocitos,membranas basales,mesangio, etc.
  • 42. INMUNOFLUORESCENCIA •En tejidos sin fijación. •Usa coloración fluorescente que debe registrarse microfotograficamente por que se degrada. •Forma un trípode diagnóstico para las enfermedades glomerulares con la ME y los cortes de rutina con H-E, PAS y Tricrómico
  • 43. Depósitos lineales de IgG en Riñón. Sindrome de Goodpasture. X 100
  • 44. POLARIZACIÓN •Identifica el carácter birrefringente de ciertos tipos de depósito fibrilar colágeno. •Por ejemplo: amiloide
  • 45. INMUNOMARCACIÓN Consiste en la detección de antígenos existentes en células o tejidos Utiliza anticuerpos monoclonales o policlonales copulados con una enzima (peroxidasa) que se unen con dicho antígeno. Se visualiza con microscopía óptica mediante coloración marrón del núcleo o citoplasma.
  • 46. INMUNOMARCACIÓN Epiteliales: citoqueratina 7 y 20. Mesenquimáticos: vimentina, desmina. Linfoides: antígeno común leucocitario- SNC: S100, PGFA- HMB 45: melanoma
  • 48. PATOLOGÍA MOLECULAR •Permite conocer el mecanismo por el cual se origina una neoplasia. •Aporta información de valor pronóstico. •Predice en algunos casos la respuesta a la terapia.
  • 49. VALOR PRONÓSTICO • Cambio cromosómico primario: asociado a los mecanismos moleculares responsables de la neoplasia. • Cambio cromosómico secundario: la enfermedad sigue un curso más agresivo, haciéndose más resistente a la terapia y difícil de obtener una remisión completa. • Presencia o ausencia de células normales: La ausencia indica peor pronóstico. • Presencia de dobles diminutos: confiere mayor resistencia a la terapia.
  • 50. TÉCNICA DE HIBRIDIZACIÓN IN SITU (HIS) •Permite detectar y localizar secuencias específicas de ADN o ARN. •Requiere de una desnaturalización (rotura de los enlaces) de ADN de la muestra y de la sonda utilizada. •Hibridación de los ADN de la muestra y la sonda por complementariedad de bases. •Interpretación microscópica de acuerdo a la sonda utilizada.
  • 51. TIPOS DE SONDA • Centroméricas: marcan la región centromérica. Puede valorar la presencia o ausencia de alteraciones numéricas. • De pintado cromosómico: abarcan todo el cromosoma. Para alteraciones numéricas y estructurales en metafase y translocaciones complejas. • De secuencia única: marcan regiones cromosómicas muy concretas. Para alteraciones numéricas y estructurales en metafase e interfase.
  • 52. NUEVAS TÉCNICAS DE HIS • Multicolor FISH: 24 sondas de marcado cromosómico marcados con fluorescencia sobre metafase. • Mulibanding FISH: alteración estructural dentro de un mismo cromosoma, utiliza células en división. • Hibridación Genómica comparada (HGC): detecta cambios numéricos de secuencias de ADN en tumores de índice proliferativo bajo.
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  • 56. MICROARRAYS • Son soportes sólidos en los que moléculas de ADN de cadena simple se fijan y permiten identificar por hibridación la expresión de una multitud de genes de una muestra biológica. • Aislamiento de ARN de tejido normal y de una muestra de referencia. • Síntesis de ADN y marcaje con dos colorantes fluorescentes (Cy3 y Cy5). • Hibridación sobre el array. • La diferencia de expresión del ARN entre ambos tejidos se puede evaluar a partir de la relación Cy3/Cy5 para cada gen. • El análisis nos permite definir el patrón de expresión génica para cada muestra concreta.
  • 57. MICROARRAYS Principales aplicaciones: • Clasificación de neoplasias morfológicamente similares pero con comportamiento biológico heterogéneo. • Evaluación del pronóstico. • Respuesta al tratamiento.
  • 58. PCR • Preparación y dosaje de ácidos nucleicos (ADN-ARN) por reacción en cadena de polimerasa (PCR), técnica de amplificación in vitro de secuencias conocidas del genoma, que permite la detección de deleciones, mutaciones o rearreglos cromosómicos
  • 59. PCR
  • 60. NO OLVIDAR • Conocer datos clínicos y exámenes complementarios del paciente. • Seleccionar el tipo de biopsia a realizar según la patología y órgano afectado. • Envío del material en óptimas condiciones y con los datos pertinentes. • Fijación y procesamiento adecuados. • Descripción macroscópica. • Diagnósticos microscópicos. • Aspectos relacionados con el pronóstico y terapéutica.
  • 61. BIBLIOGRAFÍA • Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992 • Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989. • Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional. 4º Ed. 1990 • XXII Congreso de la SEAP. Curso largo de Patología Molecular. 2005 • XXII Congreso de la SEAP. Aplicaciones diagnósticas del FISH en Patología. 2005 • XXII Congreso de la SEAP. Seminario del club de Inmunohistoquímica y Patología Molecular. 2005