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Práctica10 elisa.embarazo

  • 1. Dra. Patricia Gómez Ruelas Práctica #10 Laboratorio de Inmunología
  • 2. La mujer embarazada excreta grandes cantidades de HGC por la orina la cual podemos detectar por medio de la reacción de aglutinación indirecta utilizando partículas de látex. En plasma  ELISA, en la cual se utilizan tubos especiales que contienen acs anti HGC unidos a sus paredes.
  • 3. Fundamento Para su realización se utilizan tubos especiales que contienen acs anti-HGC unidos a las paredes por la fracción Fc y sus porciones Fab quedan expuestos a la luz del tubo. Al agregar la orina que contenga la HGC, la hormona se fija al anticuerpos formando el complejo HGC-HGC anti-HGC. Cuando a este complejo se le agrega un conjugado enzimático, el cual contiene acs anti-HGC con peroxidasa unida a su fracción Fc originando un complejo anti-HGC-HGC-anti- HGC-peroxidasa. Después de lavar el tubo con agua destilada, todo el complejo permanece en él, y al agregar agua oxígenada va a ser desdoblado por la peroxidasa
  • 4. Procedimiento En un tubo especial para prueba poner una gota de orina o plasma. Agregar una gota de conjugado enzimático. Incubar a 37°C durante 5 min. Lavar el tubo 5 veces con agua destilada. Agregar una gota de solución A/Agua oxigenada. Agregar una gota de la solución B (desarrolladora del color). Incubar a 37°C durante 5 minutos.
  • 5. Resultados Positivo: Todo el contenido del tubo adquirirá una coloración azul débil. Negativo: No habrá formación de complejos, por lo tanto el contenido permanece incoloro.