1. Martin Imhof
Abt. f. Gynäkologie und Geburtshilfe
Klinikum Weinviertel Korneuburg
Gewinnung undGewinnung und
Bedeutung vonBedeutung von
Stammzellen aus demStammzellen aus dem
NabelschnurblutNabelschnurblut

2. - Mutterzelle aller Körperzellen
Grundlagen
- Besondere Langlebigkeit

3. Stammzellen
Stammzelle Idente Stammzelle
Differenzierte Zelle
Teilung

4. Stammzellen – Hierarchie
totipotente Stammzellen
pluripotente Stammzellen
Embryonale Stammzellen
Fetale Stammzellen
Adulte Stammzellen

5. Quelle:
http://www.bats.ch/publications/stammzellreport/04.htm
Stammzellen – Hierarchie

6. Stammzellquellen
 Embryonale Stammzellen
 Postembryonale Stammzellen
(Adulte Stammzellen)
 reprogrammierte Stammzellen

7. - Einlagerungstechniken -
A l l o g e n = Nabelschnurblut als
Fremdspende
 HLA-Bestimmung und Kryopräservation
 Zentral registriert
 Vorwiegend zur Knochenmarksrekonstituierung

8. - Einlagerungstechniken -
A u t o l o g = Nabelschnurblut für den
„Eigenbedarf“
 keine HLA Bestimmung vor Kryopräservation
 Eigenleistung bzw. Privatversicherung

9. Therapeutischer Einsatz von
Stammzellen
• Stammzelltherapie bei Krebs
Und Autoimmunerkrankungen
• Stammzelle und Gentherapie
• Stammzellen zur Gewebeerzeugung

10. Heutiger Stand der
Stammzelltherapie
 Blutkrankheiten, z.B. Leukämie
 Erkrankungen des Lymphsystems, wie
Hodgkin-Lymphom
 Knochenmark-TX
 Autoimmunerkrankungen

11. Krebstherapie
Krebspatient
Gewinnung von Nabelschnur-
blut-Stammzellen bei der
Geburt
Chemotherapie/
Radiotherapie
Stammzelltransplantation
zur Wiederherstellung des
blutbildenden Systems
Gewinnung eigener
Stammzellen aus dem Blut
Suche nach Fremdspendern

12. Entwicklung der
Stammzelltransplantationen in
Europa
A. Gratwohl et al., BMT 1998, 22:227; 1999, 24:231; Infusionsther
Transfusionsmed 1999, 26 (suppl. 1):6
473
880
2786
2175
4645
3092
10200
4393
12199
4751
13919
5391
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
1983 1991 1993 1996 1997 1998
Eigentransplantat
Fremdtransplantat
Anzahl
Transplantationen

13. Überlebensraten insgesamt –
nach TX von
Nabelschnurstammzellen
Gluckman et al. NEJM (1997) 337: 373-381

14. Behandlung von
Autoimmunerkrankungen
Lupus Ery.
Chemotherapie u/o
Radiotherapie
Zerstörung der autoaggressiven
Zellen
Stammzelltrans-
plantation
Gewinnung von Nabelschnur-
blut-Stammzellen bei der
Geburt

15. Autoimmunerkrankungen und
Stammzell-Transplantationen
Lupus 2001;10(3):214-5
Immunoablation and haemopoietic stem cell
transplantation for severe autoimmune
disease with special reference to systemic
lupus erythematosus.
Tyndall A.

16. Experimentelle Ansätze
Stoffwechselerkrankungen
• Krabbe Krankheit (Leukodystrophie) Erkrankung d. Nervensystems
Escolar ML et al.Transplantation of umbilical-cord blood in babies with infantile Krabbe's disease
• N Engl J Med. 2005 May 19;352(20):2124-6.
• Stammzelltransplantation bei Hurler Syndrom (Mucopolysaccharidose)
Staba SL et al. Cord-blood transplants from unrelated donors in patients with Hurler's syndrome
N Engl J Med.2004 May 6;350(19):1960-9
• Stammzelltransplantation bei systemischer Amyloidose
Vesole DH.High-dose therapy and autologous hematopoietic stem cell transplantation for patients with
primary systemic amyloidosis: a Center for International Blood and Marrow Transplant Research Study.
Mayo Clin Proc. 2006 Jul;81(7):880-8.

17. Anwendungsmöglichkeiten für
Stammzellen
• Stammzelltherapie bei Krebs
• Stammzelle und Gentherapie
• Stammzellen zur Gewebeerzeugung

18. 88,7
7,6
1,9 1,0 0,4 0,3 0,1
0
100
Autolog Allogen Syngen Xenogen Autolog,
Allogen
Allogen,
Syngen
Unbekannt
erkunft von Zellen bei Gentherapien
Quelle: The Journal of Gene Medicine; http://www.wiley.co.uk/genetherapy/clinical/cell-sources.html; 1. März 1999
(Weltweit 3134 behandelte Patienten)
(%)

19. Anwendungsmöglichkeiten für
Stammzellen
• Stammzelltherapie und Krebs
• Stammzellen und Gentherapie
• Stammzellen zur Gewebeerzeugung

20. Anwendung von Stammzellen
Humaner Ohrknorpel auf Nude-Maus gewachsen

21. Pluripotenz von
Stammzellen
Zwischenstufen
Pluripotente
Stammzelle
Stammzellen-
Vermehrung
Knochenmark Neuronen Herzmuskel Inselzellen

22. Multipotenz von adulten
Stammzellen
Mögliche Mechanismen der Multipotenz von adulten Stammzellen. Bereits festgelegte
(z. B. hämatopoetische) Stammzellen transdifferenzieren unter bestimmten
Gewebseinflüssen in Vorläuferzellen verschiedener Gewebe (= echte Plastizität) (A)
oder multipotente Stammzellen differenzieren in hämopoietische oder verschiedene
nichthämopoetische Präkursoren (B)

23. Anwendung von Stammzellen
z.B.:
Diabetes Inselzellen
Leberzirrhose Leberzellen
Angina Pectoris Herzmuskel

24. Gefäßprothese mit
autologem Endothel
Mögliche Anwendungen
endothelialer/mesenchymaler
Stammzellen
Schmidt et al Umbilical cord blood derived endothelial
progenitor cells for tissue engineering of vascular grafts.
Ann Thorac Surg 2004, 2094- 2098

25. Mögliche Anwendungen
endothelialer/mesenchymaler
Stammzellen
Mitwachsende
Herzklappen bei
konnatalem Klappenfehler
Schmidt et al.. Engineering of biologically active living heart valve leaflets using
human umbilical cord-derived progenitor cells.
Tissue Eng. 2006 Nov;12(11):3223-32

26. Anwendung neuronaler Stammzellen
Beobachtung
Experiment
Newt-
Rattenmodell
Nabelschnurblut
Stimulierung
zur neuronalen
Differenzierung
Schlaganfall
• Symptombesserung
• Bildung neuer Zellen
im Infarktgebiet
Intravenöse
Injektion

27. Aktuelle
ForschungsprojekteDifferentiation of cord blood and placenta derived pluripotent
progenitor cells into neural and muscle cells in vitro.
Dr. Pavlova, Boltzmanninstitut für Nabelschnur(blut) und Stammzellmedizin, Wien

28. Experimentelle Ansätze
Neovascularization of ischemic myocardium by human bone-marrow-derived
angioblasts prevents cardiomyocyte apoptosis, reduces remodeling and
improves cardiac function. Kocher AA. et. al. Nat Med 2001 Apr;7(4):430-6
Herzinfarkt
Diabetes
Directed engineering of umbilical cord blood stem cells to produce C-
peptide and Insulin Cell Proliferation, June 2007. Vol 40 Issue 3 pages 367-
380

29. Experimentelle Ansätze
Schlaganfall
Newman MB, Emerich DF, Borlongan CV, Sanberg CD, Sanberg PR.Use of
human umbilical cord blood (HUCB) cells to repair the damaged brain.
Curr Neurovasc Res. 2004 Jul;1(3):269-81. Review.
Rückenmarksverletzungen
Moviglia GA et al. Combined protocol of cell therapy for chronic spinal
cord injury. Report on the electrical and functional recovery of two
patients. Cytotherapy. 2006;8(3):202-9

30. Stammzelltherapie
Kausalen Behandlung

31. Phasen der CB-Abnahme
 Vorbereitungsphase
 Nabelschnurblutabnahme
 Versendung des gewonnen CB
 Dokumentation der Abnahme

32. Vorbereitungsphase
• Aufklärung
• Einverständniserklärung
• Voruntersuchung
Vorzugsweise in der 24-28. Woche im Zuge einer
MuKi-Untersuchung

33. Aufklärung
• Geplantes Procedere
• Vor- und Nachteile
• Hinweise auf die notwendige
Weiterverarbeitung
• Art und Dauer der Lagerung
• Möglichkeit der Beschädigung oder Nicht-
Verwendbarkeit
• Noch keine klinische Standardtherapie

34. Einverständniserklärung
• Freiwillige, kostenpflichtige vereinbarte
Abnahme von CB
• Bestimmung der notwendigen
Infektionsmarker
• anonymisierte Dokumentation (Beachtung
des Datenschutzes!!!)
• Entsorgung des CB nach Vertragsablauf

35. Voruntersuchung
• Anamnese
• Untersuchung der Schwangeren
• Infektionsmarker (TPHA, Hepatitis B und
C, HIV-Genome)
• Ausschluss einer Kontraindikation

36. Kontraindikationen zur CB-
Abnahme
• Infektionskrankheiten mit Gefahr der perinatalen
Infektion des Neugeborene
• Schwere Komplikationen in der
Spätschwangerschaft
• Schwere perinatale Asphyxie des Neugeborenen
• Frühgeburtlichkeit beziehungsweise intrauterine
Dystrophie (Geburtsgewicht unter 1500 g)

37. CB- Entnahme
• Ärzte
• Hebammen
• Diplomiertes Pflegepersonal
• MTA
Gewinnung durch:
Nur nach entsprechender Schulung!!!
Letztverantwortung: leitender Geburtshelfer

38. Cord Blood Abnahmeteam
• jährliche Absolvierung einer facheinschlägigen
Schulung
• abgeschlossene Ausbildung zu Facharzt,
Hebamme, DKS und DKP oder MTA
• Teilnahme an mindestens 100 Geburten
• mindestens 3 Nabelschnurblutabnahmen unter
Aufsicht vor erstem Einsatz
Mindesterfordernisse:
Qualitätsbeauftragter ....

39. Abnahmetechnik
Auf einem sterilen Tuch mit undurchlässiger Unterseite
oder zusätzlicher Plastikunterlage sind vorzubereiten:
• 1 sterile Schale mit z.B. Betaseptic
• 3 sterile Tupfer
• 1 Paar sterile Latexhandschuhe
• 1 steriles Einmal-Tuch

40. Abnahmetechnik
1. Abnahmesystem auspacken und bereitlegen (bei
Sectio steril auf einen separaten Instrumententisch)
2. Die Abnahme erfolgt durch eine zur Abnahme
berechtigten Person unterstützt von einer
durchgehend anwesenden Assistenz.
3. Sterile Handschuhe anziehen und das sterile Tuch
unter Nabelschnur legen.
4. Nabelschnur auf einer Länge von 10 cm, 3 mal
desinfizieren und mindestens 30 Sekunden einwirken
lassen.

41. Leitlinie - Geburtshilfe
Zweck: Gewährleistung eines sicheren und effektiven Vorgehens in ausgewählten Situationen
Anleitung zur Abnahme von Nabelschnurblut
Für MACO Pharma Abnahmebeutel (MSE 2204D) und alle baugleichen Systeme
Bestandteile des Abnahmesets:
- Blutbeutel+Abnahmesystem
- Transport-Behältnis
- Verschlußklebestreifen
- Patientendatenformulare
1 Blutbeutel
2 Abnahmenadel + blaue Sicherheitskappe
3 Zitratbeutel (Ventil = Pfeil)
4+5 Klemmenverschluss
6 Reservenadel + blaue Sicherheitskappe
7 Klemmenverschluss Reservenadel
A b n a h m e t e c h n i k
Die Abnahme erfolgt unmittelbar nach Abnabelung des Neugeborenen und bei noch
ungeborener Plazenta. Die Abnabelung des Neugeborenen sollte idealerweise
(Blutmenge!) spätestens 1-2 Minuten nach der Geburt erfolgen.
Ist es medizinisch unumgänglich, kann auch nach Entwicklung der Plazenta
Nabelschnurblutabgenommen werden.
Achtung Zwillingsschwangerschaften: erst nach Abnabelung beider Zwillinge
Nabelschurblut abnehmen!
Auf einem sterilen Tuch mit undurchlässiger Unterseite oder zusätzlicher
Plastikunterlage sind vorzubereiten:
1. Abnahmesystem auspacken und bereitlegen (bei Sectio steril auf einen
separaten Instrumententisch).
2. Kindnahe abnabeln. Die Abnahme erfolgt vom Geburtshelfer oder Hebamme
unterstützt von einer durchgehend anwesenden Assistenz. Sterile
Handschuhe anziehen und das sterile Tuch mit undurchlässiger Unterseite
unter die Nabelschnur legen
Blutbeutel mit Abnahmesystem
1 sterile Schale mit Betaseptic
3 sterile Tupfer
1 Paar sterile Latexhandschuhe
1 steriles Einmal-Tuch

42. 1. Nabelschnur von Auflagerungen befreien und auf einer Länge von 10 cm im
ganzen Umfang 2 mal mit Betaseptic desinfizieren und dieses insgesamt
mindestens 60 Sekunden einwirken lassen.
2. Klemme (4 + 5) öffnen, Klemme (7) muss
geschlossen sein! Abb.1,
3. Schutzhülle von Nadel (2) abziehen Abb.1,
4. NabelschnurVENE punktieren Nadel zu
2/3 in Vene vorschieben Abb.2,
5. Blutbeutel (3) tief Lagern und bewegen.
(Gesamtabnahmedauer etwa 60-90s)
6. Wenn die Abnahme beendet ist, Klemme (4)
verschliessen Abb.3,
7. Schutzkappe über die Abnahmenadel ziehen.
( ) Abb.3,
8. Ventil (Pfeil) nahe Zitratbeutel brechen und
Zitratbeutel (3) ausrollen Abb.4+5,
9. Klemme (5) verschliessen und Blutbeutel
Beschriften Abb.6,
Blutbeutel nach Vorschrift verpacken und
Gemeinsam mit Patientendatenformular
und ev. Thermoelementen in die Transportbox
legen und diese versiegeln.
!!!!Wichtig!!! bei Zimmertemperatur lagern
Abb.2
Abb.3
Abb .1
Abb.4
Abb.5
5
Abb.6

43. Nabelschnurblut-
Entnahmeset
3
2
5
4
6
1
7
1 Blutbeutel mit
Etikett
2 Abnahmekanüle mit
Schutzkappe und
Sicherheitshülse
3 Zitratbeutel
(Ventil = Pfeil)
4+5+7
Klemmverschluss
6 Reservekanüle

44. Nabelschnurblutentnahme
Punktion der
Nabelschnur
nach der Geburt
Abb.1

45. Einstich in die Vene
3/4 der Nadel
vorschieben
Nabelschnurblutentnahme

46. Während Abnahme: Beutel tief
lagern und
bewegen
Nabelschnurblutentnahme

47. 1. Nadelhülse
überziehen
und Klemme
verschließen
Nabelschnurblutentnahme
2. Ventil
brechen

48. 3. Zitrat
ausrollen
Nabelschnurblutentnahme
4. Klemme
verschließen

49. Beschriftung des Abnahmebeutels:
• Name, Geburtsdatum der Mutter
• Nachname, Geburtsdatum,
Geburtszeit und Geschlecht des
Kindes
• Abnehmende Stelle, abnehmende
Person
Nabelschnurblutentnahme

50. Versand
• Verständigung des Transportdienstes unmittelbar
nach der Geburt
• Transport zum Verarbeitungszentrum innerhalb
von 24 Stunden
• Zwischenlagerung bei Raumtemperatur in einem
dafür vorgesehenen Raum der geburtshilflichen
Abteilung (Kreissaalbereich)
• Beschriftung des Präparates und des
Transportcontainers muss eine eindeutige
Identifizierung des Präparates gewährleisten

51. Einfluss der Transport- und
Prozessdauer auf die Funktionalität
der Stammzellen
p < 0,05
0
2
4
6
8
10
12
14
CFU-GM(x103
/mL)
< 24 h 24 - 30 h > 30 h

52. Dokumentation
• Einverständniserklärung
• Daten der Kindesmutter: Alter, Blutgruppe (AB0,
Rhesus), Schwangerschaftskomplikationen,
klinischer Status zum Zeitpunkt der Entbindung
• Neugeborenes: Zeitpunkt der Geburt, errechneter
Termin beziehungsweise Schwangerschafts-
woche, Art der Entbindung, Komplikationen bei
der Entbindung, Geschlecht, Geburtsgewicht,
Geburtslänge, APGAR
• Protokoll über die Entnahme des CB.

53. Verantwortung und
Zuständigkeit
• Aufklärung über das festgelegte Procedere
• Einholung der Einverständnisserklärung
• Überprüfung der Eignung zur
autologen Einlagerung von CB
• Korrekte Entnahme des CB
• Verständigung des Transportdienstes
• Dokumentation
Der Geburtshelfer ist
letztverantwortlich für:

54. Aktuelle Situation
Gewebesicherheitsgesetz gültig seit
Anfang 2008
6 Monate Übergangsfrist
Meldung der Entnahmestellen
Danach ohne Genehmigung
verboten
(20. September 2008)

56. Etablierung von Entnahmestellen

57. Aktuelle Situation
Entnahme in Krankenhaus erschwert
möglich
- ungeeignete Räumlichkeiten
- fluktuierendes Personal
- organisierte Schulungen und
Qualitätskontrolle schwierig
- Zellgewinnung nicht in
Grundkonzept einer

58. Aktuelle Situation

59. Umbilicale Stammzellen
PRO
- Teilungsfreudig
- Differenzierungsfreudig
- Infektions- und Tumorzellfrei
- Leicht und ökonomisch zu gewinnen
- Gut „sortierte“ Bank möglich

60. - Menge (Aplasiezeit)
Umbilikale Stammzellen
CONTRA
- Fehlende Graft versus Leukemia Reaction
- Wiederübertragung einer genetischen Anlage?
- Privatleistung, selten autologe Spende
- Vor allem hämatopoetische Stammzellen

62. Conclusio
• Die Gewinnung von Nabelschnurblut -
Stammzellen ist unkompliziert und ethisch
unbedenklich
• Erste Behandlungserfolge ermutigend
• Weg von der kurativen hin zur kausalen
Therapie

63. Danke für Ihre Aufmerksamkeit!