Beginners Guide to TikTok for Search - Rachel Pearson - We are Tilt __ Bright...
MỤ C L U C
1. MỤC LỤC
Lời mở đầu
Chương 1: GIỚI THIỆU
1.1 Đặt vấn đề
3
1.2 Mục tiêu đề tài
4
1.3 Ứng dụng của đề tài
4
Chương 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.1. Tổng Quan Về Probiotics
5
2.1.1 .Lịch sử nghiên cứu Probiotics
5
2.1.2. Định nghĩa về Probiotic
7
2.1.3. Thành phần vi sinh của chế phẩm probiotics
8
2.1.4. Cơ chế hoạt động của probiotics.
8
2.1.4.1. Tác động kháng khuẩn của probiotics
8
2.1.4.2. Tác động của probiotic trên biểu mô ruột
9
2.1.4.3. Tác động miễn dịch của probiotics
10
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
2. 2.1.4.4. Tác động của probiotics đến vi khuẩn đường ruột
10
2.1.5. Chức năng của probiotics
10
2.2. Tổng quan về vi khuẩn lactic
13
2.2.1. Khái niệm.
13
2.2.2. Đặc tính chung
14
2.2.3. Đặc điểm hình thái 15
2.2.3.1 Giống Lactobacillus
15:
2.2.3.2. Giống Streptococcus
18
2.2.3.3. Giống Leuconostoc
20
2.2.3.4. Giống Pediococcus
21
2.2.4. Đặc điểm sinh lý- sinh hóa
22
2.2.4.1 Nhu cầu dinh dưỡng của vi khuẩn lactic
22
2.2.4.1.1.Nhu cầu dinh dưỡng cacbon
22
2.2.4.1.2. Nhu cầu dinh dưỡng nitơ
22
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
3. 2.2.4.1.3. Nhu cầu về vitamin
23
2.2.4.1.4. Nhu cầu các hợp chất hữu cơ khác
23
2.2.4.1.5. Nhu cầu các muối vô cơ khác
23
2.2.4.1.6. Nhu cầu dinh dưỡng oxi
23
2.2.4.2. Quá trình trao đổi chất
24
2.2.4.2.1 Lên men lactic đồng hình
24
2.2.4.2.2 Lên men lactic dị hình
26
2.2.5. Sản phẩm của quá trình lên men ở vi khuẩn lactic
26
2.2.5.1 Các enzyme tiêu hóa 26
2.2.5.2 Các vitamin và các chất trao đổi có lợi cho sự tăng trưởng
27
2.2.5.3 Các chất khác có khả năng kháng bệnh28
2.2.6. Đối tượng cạnh tranh của vi khuẩn probiotic
29
2.2.6.1 Escherichia coli
29
2.2.6.2 Salmonella
31
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
4. 2.2.6.3 Listeria monocytogenes.
31
2.2.6.4 Staphylococcus aureus
32
2.2.6.5 Vi khuẩn Edwardsiellaictalri
34
2.3. Tổng Quan Về Phương Pháp Phân Lập Và Tuyển Chọn Vi khuẩn Lactic
34
2.3.1 Nhu cầu tìm kíếm các nguồn Probiotic mới.
34
2.3.2. Các tiêu chuẩn để chọn các chủng probiotics
34
2.3.3 Các phương pháp tìm kiếm các nguồn probiotic mới.
35
2.3.4. Các phương pháp xác định, phân loại vi sinh vật vừa phân lập
36
2.3.4.1 Các phương pháp định danh cổ điển đối với vi sinh vật
36
2.3.4.2. Các phương pháp định danh vi sinh vật dựa theo kỹ thuật sinh học phân
tử
38
2.4. Ứng Dụng Của Probiotic
39
2.4.1. Các dạng chế phẩm probiotic trong thương mại.
39
2.4.2. Những chủng vi khuẩn probiotic đã được thương mại hóa
40
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
5. 2.4.3. Các thành tựu nghiên cứu probiotic trong và ngoài nước.
45
2.4.3.1 Trong nước
45
2.4.3.2 Nước ngoài
47
2.4.4. Các lĩnh vực ứng dụng của Probiotics
50
2.4.4.1. Trong dược phẩm
50
2.4.4.2 Trong thực phẩm
50
2.4.4.3 Trong mỹ phẩm
51
2.4.4.4 Trong chăn nuôi
51
2.4.4.4.1 Probiotic trong chăn nuôi heo
51
2.4.4.4.2 Điều trị bện cho trâu bò..............................................................................
2.4.4.4.3 Lợi ích của probiotic trong nuôi trồng thủy sản
53
2.4.4.4.4 Lợi ích của probiotic trên các loài khác
55
CHƯƠNG 3: VẬT LIỆU & PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.1. Vật liệu
57
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
6. 3.1.1. Địa điểm nghiên cứu
57
3.1.2. Thời gian thực hiện
57
3.1.3. Thiết bị và dụng cụ
57
3.1.4. Hóa chất
57
3.2. Phương pháp nghiên cứu
58
3.2.1 Phương pháp luận
58
3.2.2 Phương pháp thí nghiệm
60
3.2.2.1 Thu thập mẫu
60
3.2.2.2 Phương pháp phân lập vi khuẩn lactic.
62
3.2.2.2.1. Tăng sinh
62
3.2.2.2.2. Phân lập
62
3.2.2.3 Các thí nghiệm dùng để định danh vi khuẩn lactic.
63
3.2.2.3.1 Nhuộm Gram
63
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
7. 3.2.2.3.2 Nhuộm bào tử
63
3.2.2.3.3 Nhuộm kháng acid
64
3.2.2.3.4 Thử nghiệm catalaza.
64
3.2.2.3.5 Thử nghiệm khả năng di động.
65
3.2.2.3.6 Thử nghiệm khả năng sinh acid.
65
3.2.2.3.7 Thử nghiệm oxidase.
65
3.2.2.3.8 Thử nghiệm khả năng lên men đường
66
3.2.2.3.9 Thử nghiệm khả năng kháng vi sinh vật bằng phương pháp đo độ đục 67
Chương 4: KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN
4.1 Kết quả phân lập
69
4.2 Thử nghiệm Catalaza
71
4.3. Thử nghiệm tính sinh acid lactic bằng thuốc thử Ufelmann
72
4.4. Kết quả nhuộm Gram.
73
4.5. Thử nghiệm khả năng di động bằng phương pháp thạch mềm.
79
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
8. 4.6. Kết quả nhuộm bào tử
80
4.7. Nhuộm kháng acid
81
4.8. Thử nghiệm kiểm tra khả năng lên men đường và khả năng sinh khí.
83
4.9. Kết quả khả năng kháng vi sinh vật bằng phương pháp đo độ đục
87
Chương 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
Tài liệu tham khảo
Phụ lục
DANH MỤC CÁC BẢNG
Stt Tên bảng Trang
Bảng 2.1: Phân loại khoa học giống Lactobacillus 16
Bảng 2.2: Phân loại khoa học Giống Streptococcus 18
Bảng 2.3: Phân loại khoa học giống Leuconostoc 20
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
9. Bảng 2.4: Phân loại khoa học giống Pediococcus 21
Bảng 2.5: Sản phẩm biến dưỡng và kiểu hoạt động đối kháng 29
Bảng 2.6: Những chủng vi khuẩn probiotic đã được thương mại hóa 40
Bảng 3.1: Bảng kí hiệu các nguồn phân lập 60
Bảng 4.1: Bảng kí hiệu các chủng vi khuẩn phân lập 70
Bảng 4.2: Hình thái khuẩn lạc dưới kính hiển vi x100 và hình thái vi 75
khuẩn dưới kính hiển vi x1000
Bảng 4.3: Kết quả của các thí nghiệm dùng để định danh vi khuẩn 84
Bảng 4.4: Kết quả kiểm tra khả năng kháng E. coli của 8 chủng phân 88
lập từ dược phẩm.
Bảng 4.5: Kết quả kiểm tra khả năng kháng E. coli của 7 chủng 90
phân lập từ sữa chua
Bảng 4.6: Kết quả kiểm tra khả năng kháng E. coli vật của 4 chủng 91
phân lập từ nem chua.
Bảng 4.7: Kết quả kiểm tra khả năng kháng E. coli của 3 chủng phân 92
lập từ dưa cà muối chua.
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
10. DANH MỤC HÌNH ẢNH
Hình 2.1: Lactobacillus(L. Acidophilus)
16
Hình2.2: Streptococcus
19
Hình2.3: Leuconostoc
20
Hình 2.4: Pediococcus sp
21
Hình2.5: Escherichia coli
30
Hình2.6: Salmonella enteritidis
31
Hình 2.7: Listeria monocytogenes
32
Hình 2.8: Staphylococcus aureus
33
hình 4.1: Hình thái khuẩn lạc vi khuẩn lactic
70
Hình 4.2: thử nghiệm Catalaza âm tính
72
Hình 4.3: thử nghiện Catalaza dương tính.
72
Hình 4.4:Vi khuẩn sinh acid
72
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
11. Hình 4.5: Vi khuẩn không sinh acid
72
Hình 4.6: Vi khuẩn Bacillus subtilis bắt màu gram dươn
73
Hình 4.7: Vi khuẩn E. coli bắt màu gram âm
73
Hình 4.8: vi khuẩn Gram dương hình que.
74
Hình 4.9: Vi khuẩn Gram dương hình cầu.
74
Hình 4.10: Vi khuẩn Gram dương hình ovan
75
Hinh 4.11: Kiểm tra tính di động của vi khuẩn
80
Hình 4.12: Vi khuẩn Bacillus subtilis sinh bào tử
81
Hình 4.13: vi khuẩn không sinh bào tử
81
Hình 4.14: Vi khuẩn Mycobacterium smegmatis có tính kháng acid
82
Hình 4.15: Vi khuẩn bắt màu không có tính kháng acid
82
Hình 4.16: Thử nghiệm kiểm tra khả năng lên men đường
84
Hình 4.17: Thí nghiệm ủ E. coli với dịch nuôi cấy vi khuẩn lactic ly tâm
88
.
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy
12. DANH MỤC ĐỒ THỊ VÀ SƠ ĐỒ
TÊN ĐỒ THỊ
Stt Tên đồ thị Trang
Đồ thi 4.1: Biểu diễn khả năng kháng vi sinh vật của 8 chủng phân lập 89
từ dược phẩm
Đồ thi 4.2: Biểu diễn khả năng kháng vi sinh vật của 7 chủng phân lập 90
từ sữa chua
Đồ thi 4.3: Biểu diễn khả năng kháng vi sinh vật của 4 chủng phân lập 91
từ nem chua.
Đồ thi 4.4: Biểu diễn khả năng kháng vi sinh vật của 3 chủng phân lập 92
từ dưa cà muối chua.
TÊN SƠ ĐỒ
Stt Tên sơ đồ Trang
Sơ đồ 2.1 Cây phân loại vi khuẩn lactic, gồm một số vi khuẩn hiếu 14
khí và kỵ khí tùy nghi, gram dương.
Sơ đồ 2.2: Sơ đồ chuyển hóa glucose thành acid lactic 25
Sơ đồ 3.1: Sơ đồ các bước phân lập và định danh vi khuẩn lactic 59
Sơ đồ 3.2: Sơ đồ tiến hành thử nghiệm khả năng kháng vi sinh vật 68
bằng phương pháp đo độ đục
SVTH: Nguyễn Thị Bích Thùy