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Técnicas imunologicas 
Janio Lopes 
www.bioconcursos.com
Precipitação 
• Ocorre pela interação de antígenos (Ag) solúveis 
“multivalentes” e seus anti-soros (Ac). 
• Simples: ( Ac ou Ag fixo e o outro se difunde no gel) 
• Dupla: (Ac e Ag se difundem no gel) 
• Dupla (Ouchterlony) 
• Forma “linhas” 
• Simples (Mancini) 
• Forma “alos”
Floculação - VDRL 
• Teste não treponêmico 
• Reagentes 
– Cardiolipina (lipídeo de 
mamifero) 
– Lecitina 
– Cristal de colesterol 
– Anticorpos anti-lipídio 
ou reagininas
Elisa 
• É um método quantitativo em que a reação Ac-Ag é 
monitorada por medida da atividade enzimática. 
• Alta sensibilidade 
• Enzimas utilizadas: Peroxidade e Fosfatase alcalina 
• Leitura por Absorbância.
Imunofluorescencia 
• Anticorpos ligados covalentemente a fluorocromos. 
• Fluorocromos mais utilizados: 
– Fluoresceína, Isotiocianato, Lisamina-Rodamina B. 
• Direta: Usado para 
pesquisar Ag em tecidos 
– Ag + Ac-marcado 
• Indireta: Usada para 
pesquisa de Ac ou Ag. 
• + sensível 
– Ag+ Anti Ag + Anti-Ac 
Marcado
• Reação de Montenegro: Aplicação intradérmica de 
antígenos (leishmaniose tegumentar). 
• Reação de Paul Bunnel Davidison: pesquisa de anticorpos 
heterófilos contra hemácias de carneiro ou cavalos ( fase 
aguda da mononucleose infecciosa / V. Epstein-Barr) 
• Reação de PPD: Derivado protéico purificado de 
tuberculina aplicado na intraderme. (tuberculose) 
• Reação de Widal: ensaio imunologico de aglutinação 
para diagnostico de salmoneloses
Nefelometria 
• Quantifica as reações 
de precipitação entre 
Ag-Ac medindo o 
espalhamento de luz 
(ângulo) provocado pela 
formação de 
imunocomplexos. 
• Diminuição da 
trasmitâcia
Testes rápidos 
• Imunocromatográficos 
• Qualitativo 
• Rápido 
• Simples 
• Amostra: 
– Soro 
– Sangue total 
– Urina 
• Enzima, corante coloidal 
ou ouro coloidal. 
• Captura de Ac ou Ag

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Técnicas imunológicas para detecção de antígenos e anticorpos

  • 1. Técnicas imunologicas Janio Lopes www.bioconcursos.com
  • 2. Precipitação • Ocorre pela interação de antígenos (Ag) solúveis “multivalentes” e seus anti-soros (Ac). • Simples: ( Ac ou Ag fixo e o outro se difunde no gel) • Dupla: (Ac e Ag se difundem no gel) • Dupla (Ouchterlony) • Forma “linhas” • Simples (Mancini) • Forma “alos”
  • 3. Floculação - VDRL • Teste não treponêmico • Reagentes – Cardiolipina (lipídeo de mamifero) – Lecitina – Cristal de colesterol – Anticorpos anti-lipídio ou reagininas
  • 4. Elisa • É um método quantitativo em que a reação Ac-Ag é monitorada por medida da atividade enzimática. • Alta sensibilidade • Enzimas utilizadas: Peroxidade e Fosfatase alcalina • Leitura por Absorbância.
  • 5. Imunofluorescencia • Anticorpos ligados covalentemente a fluorocromos. • Fluorocromos mais utilizados: – Fluoresceína, Isotiocianato, Lisamina-Rodamina B. • Direta: Usado para pesquisar Ag em tecidos – Ag + Ac-marcado • Indireta: Usada para pesquisa de Ac ou Ag. • + sensível – Ag+ Anti Ag + Anti-Ac Marcado
  • 6. • Reação de Montenegro: Aplicação intradérmica de antígenos (leishmaniose tegumentar). • Reação de Paul Bunnel Davidison: pesquisa de anticorpos heterófilos contra hemácias de carneiro ou cavalos ( fase aguda da mononucleose infecciosa / V. Epstein-Barr) • Reação de PPD: Derivado protéico purificado de tuberculina aplicado na intraderme. (tuberculose) • Reação de Widal: ensaio imunologico de aglutinação para diagnostico de salmoneloses
  • 7. Nefelometria • Quantifica as reações de precipitação entre Ag-Ac medindo o espalhamento de luz (ângulo) provocado pela formação de imunocomplexos. • Diminuição da trasmitâcia
  • 8. Testes rápidos • Imunocromatográficos • Qualitativo • Rápido • Simples • Amostra: – Soro – Sangue total – Urina • Enzima, corante coloidal ou ouro coloidal. • Captura de Ac ou Ag