1. Virus de l'hépatite A et E Virus et marqueurs diagnostiques Vincent THIBAULT Laboratoire de Virologie Groupe Hospitalier Pitié-Salpêtrière Assistance Publique Hôpitaux de Paris

2. Hépatites virales parentéral non A, non B féco-oral mode de transmission préférentiel B 1965 D 1977 A 1972 F, G, TTV, autres… C 1990 E 1991

4. Virus de l'hépatite A

6. 3D (POL) 3C (PRO) 2C 2B 1D 1C 1B 3 A-B 2A P1 prot. Capside Vpg 2.5kDa P2 P3 0 7478 1A AAA Structurales Non structurales IRES Traduction         VP1 VP3 VP2 VP4 2A Protéines de surface immunogénicité 3D (POL) 3C (PRO) 2C 2B VP1 VP3 VP2 3 A-B VP4 2A poly- protéine 2 227 AA ? Liaison NTP Hélicase Vpg Protéase ARN Polymérase Réplication VP1 VP3 VP2 VP4 2A VP0 Maturation finale X5 – X12

7. Cycle de multiplication du VHA en culture de cellules Relargage Membrane cellulaire Réticulum endoplasmique Espace de Disse Canalicule biliaire P3 P2 P1 Traduction Synthèse de la polyprotéine + - - + Réplication Maturation Libération du génome Attachement Empaquetage

9. Propriétés Physiques du VHA Virus très Stable HYGIENE

11. Génotypes et phylogénie IV Nonhuman primate, Philippines V Nonhuman primate, Kenya VI Nonhuman primate, Indonesia D'après Nainan et al. 2006 Clin. Microb. Rev. ; 19:63-79 Phylogenetic analysis of 3,582 HAV isolates in the VP1/P2B region (315-bp fragment). VP1/P2A Génotypes : >15% variations Sous types : 7.5% variations

12. Répartition mondiale des génotypes Génotypes infectant l'homme en noir , les singes en rouge . Souche PA21 (génotype IIIA), isolée d'un singe Panamanian Owl en vert . Cristina J, Costa-Mattioli M. Virus Res. 2007 Aug;127(2):151-7.

13. VHA : épidémiologie http://wwwn.cdc.gov/travel/image.ashx?i=255

14. VHA : Paramètres Biologiques Semaines 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 24 protection contre réinfection Ac anti-VHA = hépatite A ancienne ou vaccination IgM anti-VHA = hépatite aiguë A (clinique) Symptomes Ictère Ag foie VHA Sang VHA Selles IgM IgG

19. Difficultés diagnostiques En routine · Adresser prélèvements au Centre national de référence du VHA Pr E Dussaix Laboratoire de virologie Hôpital Paul Brousse 12-14 av Paul Vaillant Couturier 94804 Villejuif cedex Tel : 01 45 59 37 21 http://invs.sante.fr/surveillance/cnr/liste

20. Grippe aviaire ? SRAS ? Hépatite E ? Hépatite E ?

23. VHE Virus non enveloppé Sphérique (SRV) Surface irrégulière Capside 27-34 nm Symétrie icosaédrique ARN simple brin hélice droite polarité + 7,5kb poly-A extrémité 3’ Stabilité Au laboratoire : instable(-70 à +8°C) Décongélation/congélation Tractus GI : stable (pH) Famille : Hepeviridae Genre : Hepevirus

26. 301 nt 5' end of ORF2 sequences from 275 HEV strains, 1 2 3 4 1a 1b 1c 1e 1d 0.05 4d 4c 4b 4a 4e 3f 3e 3c 3d 3b 3a D'après Lu et al. Rev. Med. Virol. 2006;16:5-36 Inde, Népal, Birmanie, Japon, Espagne Chine, Pakistan, Bengladesh Chine, Inde, Nepal, Russie Maroc, Algérie Algérie, Namibie, Afrique C. Mexico, Nigeria US, Japon, Corée, NL + porc Japon + porc NL (porc) Taiwan (porc) France, UK, Japon, Espagne + porc Espagne, UK, Grèce, NL, Japon + porc Chine, Taiwan Chine, Taiwan Japon, Vietnam Chine (porc) Inde (porc) Génotype < 20% hétérogénéité ORF2

27. Similarités des souches humaines et animales Borgen et al. BMC Infectious Diseases 2008, 8 :61 Genetic relatedness between HEV strains from human and non-human sources and from various countries . Minimal spanning trees of 81 sequences of 148 nucleotides HEV RNA showing genetic distances between genotype 3 HEV strains from humans and animals. Dutch cases are marked with ID numbers inside the colored circles.

30. HEV – virémie- transmission Matsubayashi K, et al. Transfusion. 2008 Jul;48(7):1368-75. Concentré de plaquettes à J0 Transfusé à un homme de 64 ans traité pour Lymphome non-Hodgkinien par GM autologue serum salive selle IgG IgM

31. VHE : Paramètres Biologiques Jours 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 200 Titre peu élevé protection contre réinfection ? Symptomes Ictère VHE Sang VHE Selles IgM IgG

34. Performance des tests J. Izopet Comm. Pers. CVV 2008 Panels 50 sérums ARN HEV (+), G3 406 sérums IgG ARN HEV (-)

35. Stratégie Diagnostique Se donner les moyens de faire le diagnostic Diagnostic Direct Recherche du génome sur prélèvements sang et selles Diagnostic Indirect Recherche de l'immunité antivirale IgM anti VHE IgG anti VHe - - + Immunité ancienne - - +++ Douteux + - - ou + Probable + ++ ++ Certain RT-PCR IgM IgG Diagnostic

36. Immunodépression, hépatite chronique et stratégie diagnostique Kamar et al. American Journal of Transplantation 2008; 8: 1744–1748

37. VHE et vaccination Risque cumulé d'un premier épisode d'hépatite E Moyenne géométrique du taux d'anticorps anti-VHE 20 μg d'antigène rHEV (capside exprimée dans baculovirus) dans 0.5 ml de PBS sur 0.5 mg d'hydroxyde d'aluminum. 3 injections Shrestha,et al 2007 N Engl J Med 356;9 Efficacité : 95,5% après 3 doses

38. Adresser les prélèvements au Centre national de référence du VHE Dr E Nicand Laboratoire de biologie HIA Val de Grâce Tel : 01 40 51 40 00 http://invs.sante.fr/surveillance/cnr/liste