1. Hépatite C
Le virus
Jean-Michel Pawlotsky
Centre National de Référence
des Hépatites Virales B, C et delta
Laboratoire de Virologie & INSERM U955
Hôpital Henri Mondor
Université Paris-Est
Créteil
2. Hépatite C : virus et marqueurs
Virus de l’Hépatite C
• Identifié par Houghton et coll. en 1989
• 1ère cause d’hépatites chroniques et de cirrhoses,
bientôt de CHC, en Europe et en Amérique du Nord
• 1ère indication de transplantation hépatique dans les
pays industrialisés
Afdhal, NH. 2004; Sem Liv Dis, 24(Supp 2): 3-8
3. Hépatite C : virus et marqueurs
Virus de l’Hépatite C
• Famille : Flaviviridae
• Genre : Hepacivirus
• Hôte naturel : Homme
• Tropisme : Hépatocyte
• Récepteurs de surface
• miRNA-122
4. Hépatite C : virus et marqueurs
Virus de l’Hépatite C
Kapoor et al. 2011; Proc Natl Acad Sci USA, 108: 11608-13
5. Hépatite C : virus et marqueurs
Organisation Structurale
Kapoor et al. 2011; Proc Natl Acad Sci USA, 108: 11608-13
6. Hépatite C : virus et marqueurs
Organisation Structurale
7. Hépatite C : virus et marqueurs
Lipoviroparticule VHC
Apolipoprotein B
Glycoprotéines
d’enveloppe E1 et E2
Apolipo-
protéine E
Bicouche de
phospholipides
Nucléocapside (protéin
de capside et ARN)
Penin et al, 2012. Trends Microbiol, 19:95-103.
8. Hépatite C : virus et marqueurs
Organisation Génomique
Protéines structurales Protéines non structurales
Popescu and Dubuisson, Biol Cell 2010, 102(1): 63-74.
9. Hépatite C : virus et marqueurs
Organisation Génomique
Bartenschlager et al, 2011. Trends Microbiol, 19:95-103.
10. Hépatite C : virus et marqueurs
Cycle cellulaire du VHC
Kapoor et al. 2011; Proc Natl Acad Sci USA, 108: 11608-13
11. Hépatite C : virus et marqueurs
Cycle cellulaire du VHC
Popescu and Dubuisson, Biol Cell 2010, 102(1): 63-74.
12. Hépatite C : virus et marqueurs
Etapes précoces (entrée, fusion)
Dubuisson J, 2012
13. Hépatite C : virus et marqueurs
Etapes précoces (entrée, fusion)
Dubuisson J, 2012
14. Hépatite C : virus et marqueurs
Inhibition des étapes précoces
• Ciblant le virus
• Anticorps polyclonaux (HCIg)
• Anticorps monoclonaux
• Ciblant les molécules réceptrices
• Anticorps monoclonaux
• Antiviraux directs
• Ciblant la fusion
15. Hépatite C : virus et marqueurs
Traduction du cadre de lecture
From Department of Structural Biology, Stanford University Medical School, USA.
16. Hépatite C : virus et marqueurs
Traduction du cadre de lecture
Popescu and Dubuisson, Biol Cell 2010, 102(1): 63-74.
17. Hépatite C : virus et marqueurs
Inhibition de la traduction
• Oligonucléotides antisens
• Ribozymes
• siRNA, shRNA
• Petites molécules
18. Hépatite C : virus et marqueurs
Maturation des protéines
virales
Popescu and Dubuisson, Biol Cell 2010, 102(1): 63-74.
19. Hépatite C : virus et marqueurs
Maturation des protéines
virales
NS3
Hélicase
Cytosol
Autoprotéase
Cana ionique Protéase NS5A
Capside (viroporine)
Cofacteur NS3
Protéine
d’ancrage
Glycoprotéines
membranaire
d’enveloppe
Lumière du RE
Moradpour et al., Nat Rev Microbiol 2007, 102(1): 63-74.
20. Hépatite C : virus et marqueurs
Inhibition de la protéolyse par NS3-4A
Raney et al., J Biol Chem 2010, 285(30): 22725-731.
21. Hépatite C : virus et marqueurs
Réplication
Membranous web (replication complex)
Raney et al., J Biol Chem 2010, 285(30): 22725-731.
22. Hépatite C : virus et marqueurs
Réplication
De Clercq., Nature Review Drug Discovery, 2007; 6: 1001-18
23. Hépatite C : virus et marqueurs
Inhibition de la réplication
ARN polymérase Protéine NS5A
dépendante de l’ARN Cyclophiline A
Inhibiteurs de cyclophilines
Analogues nucléos(t)idiques
Inhibiteurs non nucléosidiques
Inhibiteurs de NS5A
24. Hépatite C : virus et marqueurs
Assemblage des virions
Piodi et al., Hepatology 2008, 48(1): 16-27.
25. Hépatite C : virus et marqueurs
Assemblage des virions
Bartenschalger et al., Tends Microbiol, in press.
26. Hépatite C : virus et marqueurs
Cycle cellulaire du VHC
Popescu and Dubuisson, Biol Cell 2010, 102(1): 63-74.
27. Hépatite C : virus et marqueurs
Variabilité génétique virale
Kapoor et al. 2011; Proc Natl Acad Sci USA, 108: 11608-13
28. Hépatite C : virus et marqueurs
Propriétés de l’ARN polymérase du VHC
• Erreurs au cours de la réplication
– Fréquentes
• 10-4-10-5mutations par nucléotide copié au cours de la réplication du VHC
– Spontanées
– Au hasard
• Absence d’activité exonucléasique 3’⇒5’
("proofreading")
– Accumulation de mutations sur le génome
• Processus de sélection, à l’origine de :
– La diversification des génotypes et des sous-types
– La distribution en quasi-espèces
29. Hépatite C : virus et marqueurs
Diversification des Génotypes
Simmonds et al., Hepatology 2005, 42(4):962-73.
30. Hépatite C : virus et marqueurs
Diffusion des Génotypes
a
c
b
a
2 1
3
b
a 6
4
5
a
a
a
Simmonds et al., Hepatology 2005, 42(4):962-73.
31. Hépatite C : virus et marqueurs
Diffusion des Génotypes
Pybus et al., Infect Genet Evol 2005, 5:131-9.