Suche senden
Hochladen
Us Stem Cells Report 2009
•
3 gefällt mir
•
3,172 views
Ministry of Science and Technology
Folgen
เอกสารรายละเอียดเพิ่มเติม
Weniger lesen
Mehr lesen
Melden
Teilen
Melden
Teilen
1 von 184
Jetzt herunterladen
Downloaden Sie, um offline zu lesen
Empfohlen
Doc2
Doc2
ฟลุ๊ค ลำพูน
3เฉลย 31
3เฉลย 31
krupornpana55
แผนการเรียนรู้โครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์
แผนการเรียนรู้โครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์
korakate
Science1 110904043128-phpapp01
Science1 110904043128-phpapp01
korakate
ศูนย์ที่ 1 ชุดที่ 1.1
ศูนย์ที่ 1 ชุดที่ 1.1
ชโลธร กีรติศักดิ์กุล
รายงานโครงการกฐิน ๒๕๕๖
รายงานโครงการกฐิน ๒๕๕๖
Manoonpong Srivirat
๑.๖ แผนปฏิบัติราชการ ๔ ปี ศธ.จักราวุธ คำทวี
๑.๖ แผนปฏิบัติราชการ ๔ ปี ศธ.จักราวุธ คำทวี
นายจักราวุธ คำทวี
ความเหลื่อมล้ำฉบับพกพา
ความเหลื่อมล้ำฉบับพกพา
WiseKnow Thailand
Empfohlen
Doc2
Doc2
ฟลุ๊ค ลำพูน
3เฉลย 31
3เฉลย 31
krupornpana55
แผนการเรียนรู้โครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์
แผนการเรียนรู้โครงสร้างและหน้าที่ของเซลล์
korakate
Science1 110904043128-phpapp01
Science1 110904043128-phpapp01
korakate
ศูนย์ที่ 1 ชุดที่ 1.1
ศูนย์ที่ 1 ชุดที่ 1.1
ชโลธร กีรติศักดิ์กุล
รายงานโครงการกฐิน ๒๕๕๖
รายงานโครงการกฐิน ๒๕๕๖
Manoonpong Srivirat
๑.๖ แผนปฏิบัติราชการ ๔ ปี ศธ.จักราวุธ คำทวี
๑.๖ แผนปฏิบัติราชการ ๔ ปี ศธ.จักราวุธ คำทวี
นายจักราวุธ คำทวี
ความเหลื่อมล้ำฉบับพกพา
ความเหลื่อมล้ำฉบับพกพา
WiseKnow Thailand
เราจะศึกษาวิทยาศาสตร์กันอย่างไร
เราจะศึกษาวิทยาศาสตร์กันอย่างไร
supreechafkk
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม3
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม3
korakate
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.3
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.3
korakate
วิทยาศาสตร์ ปลาย
วิทยาศาสตร์ ปลาย
กลุ่มงาน วิชาการ
Cell project 1 : Cell studying
Cell project 1 : Cell studying
IPST Thailand
Science2 110904044724-phpapp01
Science2 110904044724-phpapp01
korakate
Intro sciproject
Intro sciproject
Taweesak Poochai
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.2
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.2
korakate
2
2
sillverbulet
เทคโนโลยีวีวภาพ
เทคโนโลยีวีวภาพ
peter dontoom
4.วิเคราะห์โครงสร้างการจัดการเรียนรู้สุขศึกษาม.4
4.วิเคราะห์โครงสร้างการจัดการเรียนรู้สุขศึกษาม.4
Kruthai Kidsdee
ข้อสอบวิทย์เรื่องเซลล์ 1
ข้อสอบวิทย์เรื่องเซลล์ 1
สายฝน ต๊ะวันนา
บทที่2 ส่งเทคโน
บทที่2 ส่งเทคโน
Pew Juthiporn
Science3 110904045426-phpapp02
Science3 110904045426-phpapp02
korakate
โครงงานคอม
โครงงานคอม
Prangwadee Sriket
หน่วยของสิ่งมีชีวิต
หน่วยของสิ่งมีชีวิต
supreechafkk
Biology m4
Biology m4
kominoni09092518
2011 drug system_report
2011 drug system_report
Surang Judistprasert
Excretory system ม.5
Excretory system ม.5
Kantida SilverSoul
บทที่ 11 การสืบพันธ์และการเจริญเติบโต
บทที่ 11 การสืบพันธ์และการเจริญเติบโต
ฟลุ๊ค ลำพูน
ผลการดำเนินงาน ศูนย์ประสานงานกระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีประจำภูมิภาค ประจำ...
ผลการดำเนินงาน ศูนย์ประสานงานกระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีประจำภูมิภาค ประจำ...
Ministry of Science and Technology
ผลการดำเนินงานประจำปีงบประมาณ 2561 สำนักส่งเสริมและถ่ายทอดเทคโนโลยี
ผลการดำเนินงานประจำปีงบประมาณ 2561 สำนักส่งเสริมและถ่ายทอดเทคโนโลยี
Ministry of Science and Technology
Weitere ähnliche Inhalte
Ähnlich wie Us Stem Cells Report 2009
เราจะศึกษาวิทยาศาสตร์กันอย่างไร
เราจะศึกษาวิทยาศาสตร์กันอย่างไร
supreechafkk
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม3
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม3
korakate
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.3
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.3
korakate
วิทยาศาสตร์ ปลาย
วิทยาศาสตร์ ปลาย
กลุ่มงาน วิชาการ
Cell project 1 : Cell studying
Cell project 1 : Cell studying
IPST Thailand
Science2 110904044724-phpapp01
Science2 110904044724-phpapp01
korakate
Intro sciproject
Intro sciproject
Taweesak Poochai
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.2
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.2
korakate
2
2
sillverbulet
เทคโนโลยีวีวภาพ
เทคโนโลยีวีวภาพ
peter dontoom
4.วิเคราะห์โครงสร้างการจัดการเรียนรู้สุขศึกษาม.4
4.วิเคราะห์โครงสร้างการจัดการเรียนรู้สุขศึกษาม.4
Kruthai Kidsdee
ข้อสอบวิทย์เรื่องเซลล์ 1
ข้อสอบวิทย์เรื่องเซลล์ 1
สายฝน ต๊ะวันนา
บทที่2 ส่งเทคโน
บทที่2 ส่งเทคโน
Pew Juthiporn
Science3 110904045426-phpapp02
Science3 110904045426-phpapp02
korakate
โครงงานคอม
โครงงานคอม
Prangwadee Sriket
หน่วยของสิ่งมีชีวิต
หน่วยของสิ่งมีชีวิต
supreechafkk
Biology m4
Biology m4
kominoni09092518
2011 drug system_report
2011 drug system_report
Surang Judistprasert
Excretory system ม.5
Excretory system ม.5
Kantida SilverSoul
บทที่ 11 การสืบพันธ์และการเจริญเติบโต
บทที่ 11 การสืบพันธ์และการเจริญเติบโต
ฟลุ๊ค ลำพูน
Ähnlich wie Us Stem Cells Report 2009
(20)
เราจะศึกษาวิทยาศาสตร์กันอย่างไร
เราจะศึกษาวิทยาศาสตร์กันอย่างไร
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม3
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม3
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.3
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.3
วิทยาศาสตร์ ปลาย
วิทยาศาสตร์ ปลาย
Cell project 1 : Cell studying
Cell project 1 : Cell studying
Science2 110904044724-phpapp01
Science2 110904044724-phpapp01
Intro sciproject
Intro sciproject
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.2
การวิเคราะห์ตัวชี้วัด Science ม.2
2
2
เทคโนโลยีวีวภาพ
เทคโนโลยีวีวภาพ
4.วิเคราะห์โครงสร้างการจัดการเรียนรู้สุขศึกษาม.4
4.วิเคราะห์โครงสร้างการจัดการเรียนรู้สุขศึกษาม.4
ข้อสอบวิทย์เรื่องเซลล์ 1
ข้อสอบวิทย์เรื่องเซลล์ 1
บทที่2 ส่งเทคโน
บทที่2 ส่งเทคโน
Science3 110904045426-phpapp02
Science3 110904045426-phpapp02
โครงงานคอม
โครงงานคอม
หน่วยของสิ่งมีชีวิต
หน่วยของสิ่งมีชีวิต
Biology m4
Biology m4
2011 drug system_report
2011 drug system_report
Excretory system ม.5
Excretory system ม.5
บทที่ 11 การสืบพันธ์และการเจริญเติบโต
บทที่ 11 การสืบพันธ์และการเจริญเติบโต
Mehr von Ministry of Science and Technology
ผลการดำเนินงาน ศูนย์ประสานงานกระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีประจำภูมิภาค ประจำ...
ผลการดำเนินงาน ศูนย์ประสานงานกระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีประจำภูมิภาค ประจำ...
Ministry of Science and Technology
ผลการดำเนินงานประจำปีงบประมาณ 2561 สำนักส่งเสริมและถ่ายทอดเทคโนโลยี
ผลการดำเนินงานประจำปีงบประมาณ 2561 สำนักส่งเสริมและถ่ายทอดเทคโนโลยี
Ministry of Science and Technology
รายงานประจำปี 2558 กระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี Annual report 2015
รายงานประจำปี 2558 กระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี Annual report 2015
Ministry of Science and Technology
Thesearch index-information54
Thesearch index-information54
Ministry of Science and Technology
Mos taction plan2555-2558
Mos taction plan2555-2558
Ministry of Science and Technology
Policy24jan55
Policy24jan55
Ministry of Science and Technology
Scius55 1-out-most
Scius55 1-out-most
Ministry of Science and Technology
Semina boi
Semina boi
Ministry of Science and Technology
S ci us54-shift-2
S ci us54-shift-2
Ministry of Science and Technology
กรอบแนวทางในการทำงานของกระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี Framework of MOST
กรอบแนวทางในการทำงานของกระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี Framework of MOST
Ministry of Science and Technology
Gov policy-55
Gov policy-55
Ministry of Science and Technology
MOST-Annual-report-2010
MOST-Annual-report-2010
Ministry of Science and Technology
V532
V532
Ministry of Science and Technology
V531
V531
Ministry of Science and Technology
Gmo in-usa
Gmo in-usa
Ministry of Science and Technology
P 20101027-map60
P 20101027-map60
Ministry of Science and Technology
Interview106magazine
Interview106magazine
Ministry of Science and Technology
Interview106magazine
Interview106magazine
Ministry of Science and Technology
แบบตอบรับการเข้าสัมมนาฯ
แบบตอบรับการเข้าสัมมนาฯ
Ministry of Science and Technology
กำหนดการ
กำหนดการ
Ministry of Science and Technology
Mehr von Ministry of Science and Technology
(20)
ผลการดำเนินงาน ศูนย์ประสานงานกระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีประจำภูมิภาค ประจำ...
ผลการดำเนินงาน ศูนย์ประสานงานกระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีประจำภูมิภาค ประจำ...
ผลการดำเนินงานประจำปีงบประมาณ 2561 สำนักส่งเสริมและถ่ายทอดเทคโนโลยี
ผลการดำเนินงานประจำปีงบประมาณ 2561 สำนักส่งเสริมและถ่ายทอดเทคโนโลยี
รายงานประจำปี 2558 กระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี Annual report 2015
รายงานประจำปี 2558 กระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี Annual report 2015
Thesearch index-information54
Thesearch index-information54
Mos taction plan2555-2558
Mos taction plan2555-2558
Policy24jan55
Policy24jan55
Scius55 1-out-most
Scius55 1-out-most
Semina boi
Semina boi
S ci us54-shift-2
S ci us54-shift-2
กรอบแนวทางในการทำงานของกระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี Framework of MOST
กรอบแนวทางในการทำงานของกระทรวงวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี Framework of MOST
Gov policy-55
Gov policy-55
MOST-Annual-report-2010
MOST-Annual-report-2010
V532
V532
V531
V531
Gmo in-usa
Gmo in-usa
P 20101027-map60
P 20101027-map60
Interview106magazine
Interview106magazine
Interview106magazine
Interview106magazine
แบบตอบรับการเข้าสัมมนาฯ
แบบตอบรับการเข้าสัมมนาฯ
กำหนดการ
กำหนดการ
Us Stem Cells Report 2009
1.
รายงานการสืบคนขอมูลความกาวหนาและสถานะ เทคโนโลยีชีวภาพดานสเต็มเซลลในประเทศสหรัฐอเมริกา
โดย นางสาว ทิพยอาภา ภูวนัตตรัย ที่ปรึกษาโครงการ เสนอตอสํานักงานปลัดกระทรวงวิทยาศาสตรและเทคโนโลยี (สํานักงานที่ปรึกษาดานวิทยาศาสตรและเทคโนโลยี ประจํากรุงวอชิงตัน ดี.ซี.) 28 พฤศจิกายน 2552
2.
รายงานการสืบคนขอมูลความกาวหนาและสถานะเทคโนโลยีชีวภาพดานสเต็มเซลลในประเทศ
สหรัฐอเมริกาภายใตโครงการการดําเนินภารกิจ (ทีมประเทศไทย) ประจําปงบประมาณ 2552 (ธันวาคม 2551 – พฤศจิกายน 2552) สํานักงานที่ปรึกษาดานวิทยาศาสตรและเทคโนโลยี ประจํากรุงวอชิงตัน ดี.ซี. (ภาพจากหนาปก, ที่มา: Serrano, 2009) รายงานฉบับนี้เปนลิขสิทธิ์ของสํานักงานปลัดกระทรวงวิทยาศาสตรและเทคโนโลยี (สํานักงานที่ปรึกษาดานวิทยาศาสตร และเทคโนโลยี ประจํากรุงวอชิงตัน ดี.ซี.) หากนําไปใชประโยชนโปรดอางอิงชื่อ สํานักงานปลัดกระทรวงวิทยาศาสตรและ เทคโนโลยี (สํานักงานที่ปรึกษาดานวิทยาศาสตรและเทคโนโลยี ประจํากรุงวอชิงตัน ดี.ซี.) ดวย -1-
3.
คํานํา
รายงานการสืบคนขอมูลความกาวหนาและสถานะเทคโนโลยีชีวภาพดานสเต็มเซลลในประเทศ สหรัฐอเมริกา มีวัตถุประสงคการจัดทําเพื่อสืบเสาะแสวงหาและเขาถึงองคความรูและเทคโนโลยีสําคัญใน ประเทศสหรัฐอเมริกาเพื่อสนับสนุนการวิจัย พัฒนา และการทํานวัตกรรม เพื่อเพิ่มขีดความสามารถในการ แขงขันของประเทศและเปนการสรางฐานความรูดานวิทยาศาสตรและเทคโนโลยีใหเขมแข็งมากขึ้น ซึ่ง วัตถุประสงคดังกลาวเปนภารกิจสวนหนึ่งของสํานักงานที่ปรึกษาดานวิทยาศาสตรและเทคโนโลยี ประจํา กรุ ง วอชิ ง ตั น ดี . ซี . อั น เป น หน ว ยงานภายใต ก ารสั ง กั ด ของสํ า นั ก งานปลั ด กระทรวงวิ ท ยาศาสตร แ ละ เทคโนโลยี คณะผูจัดทําหวังวารายงานฉบับนี้จะเปนประโยชนตอหนวยงานวิจัยและพัฒนา หนวยงานนโยบาย และสถาบันการศึกษา ในการพัฒนางานดานสเต็มเซลลของประเทศไทยตอไป ทั้งนี้รายงานฉบับนี้สามารถ สืบคนไดทางเว็บไซต http://www.ostc.thaiembdc.org อีกทางหนึ่งดวย สํานักงานที่ปรึกษาดานวิทยาศาสตรและเทคโนโลยี ประจํากรุงวอชิงตัน ดี.ซี. 28 พฤศจิกายน 2552 -2-
4.
สารบัญ เนื้อหา
หนา บทสรุปผูบริหาร 8 ความรูเกี่ยวกับเซลลตนตอ 9 บทนํา 9 ประเภทของเซลลตนตอและความสําคัญ 9 คุณลักษณะพิเศษเฉพาะของเซลลตนตอ 10 เซลลตนตอจากตัวออน 11 เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลว 17 ความเหมือนและความแตกตางระหวางเซลลตนตอจากตัวออนและเซลลตนตอ จากเซลลทเจริญวัยเต็มที่แลว ี่ 22 ประโยชนของเซลลตนตอจากมนุษยและอุปสรรคของการนํามาประยุกตใช ทางการแพทย 23 เซลลตนตอชนิดพลูริโพเทนทซึ่งมีความจําเพาะกับโรคหรือมีความจําเพาะกับผูปวย 27 การสรางเซลลตนตอจากตัวออนโดยการใชเทคนิคการยายฝากนิวเคลียส 27 อินดิวสพลูริโพเทนทเซลลหรือไอพีเอสเซลล 28 การนําเซลลตนตอมาประยุกตใชในทางการแพทย 30 การประยุกตใชเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวในทางการแพทย 30 การประยุกตใชเซลลตนตอจากตัวออนมนุษยในทางการแพทย 30 เซลลตนตอที่เหมาะสมสําหรับนํามาใชในการบําบัดรักษาโรค 31 ตัวอยางของเซลลตนตอในเนื้อเยื่อและการนํามาใชเพื่อรักษาโรค 32 การบําบัดรักษาโรคโดยใชเซลลตนตอ 41 การประยุกตใชอินดิวสพลูริโพเทนทสเต็มเซลลในทางการแพทย 43 ประวัติและความเปนมาของเซลลตนตอ 47 สรุปลําดับเหตุการณประวัติของงานวิจัยเซลลตนตอจากตัวออนมนุษย 47 กฎหมายและนโยบายของสหรัฐอเมริกาที่เกี่ยวของกับงานวิจัยเซลลตนตอ 53 -3-
5.
การคนพบครังยิ่งใหญของวงการวิทยาศาสตร
้ 53 การหามทํางานวิจัยที่เกี่ยวกับตัวออน 53 แนวทางในการขอรับเงินทุนสนับสนุนงานวิจัยเซลลตนตอของสถาบันสุขภาพแหงชาติ ของสหรัฐอเมริกา 54 การตัดสินใจของประธานาธิบดีบุช 55 ประเด็นโตแยงในเรื่องจํานวนของกลุมเซลลตนตอที่สามารถนํามาใชได 56 ความกดดันทีเกิดขึ้นในปของการเลือกตั้งประธานาธิบดี ่ 57 การใชสิทธิ์ยบยั้งของประธานาธิบดีบุชครั้งแรก ั 59 การใชสิทธิ์ยบยั้งของประธานาธิบดีบุชครั้งที่สอง ั 59 การตัดสินใจของประธานาธิบดีโอบามา 60 ประเด็นทางดานจริยธรรมที่เกี่ยวของกับงานวิจัยเซลลตนตอ 61 กฎระเบียบของสหรัฐอเมริกาในการใหเงินทุนสนับสนุนงานวิจัยเซลลตนตอ 64 การใหเงินทุนสนับสนุนงานวิจัยตัวออนและมติดิกกี้ 64 มติดิกกี้กับงานวิจัยเซลลตนตอ 64 นโยบายของประธานาธิบดีบุชที่เกียวกับงานวิจัยเซลลตนตอจากตัวออน ่ 65 การสนับสนุนงานวิจัยเซลลตนตอของแตละมลรัฐ 66 นโยบายของประธานาธิบดีโอบามาที่เกี่ยวกับงานวิจัยเซลลตนตอจากตัวออนและ เอกสารแนวทางสําหรับงานวิจัยเซลลตนตอจากมนุษยของสถาบันสุขภาพแหงชาติ ของสหรัฐอเมริกาฉบับสมบูรณ 68 ทะเบียนรายชื่อเซลลตนตอจากตัวออนมนุษยที่ผานเกณฑในการนํามาใชในงานวิจัย และสามารถขอเงินทุนสนับสนุนจากรัฐบาลกลางได 69 งบประมาณของรัฐบาลกลางที่ใชในการสนับสนุนงานวิจัยเซลลตนตอ 71 หนวยงานที่เกี่ยวของกับการวิจัยและพัฒนาดานเซลลตนตอในสหรัฐอเมริกา 72 สถาบันสุขภาพแหงชาติของสหรัฐอเมริกา 72 องคการอาหารและยาของสหรัฐอเมริกา 72 องคกรบริหารทรัพยากรดานสุขภาพและการบริการ 74 สถาบันแหงชาติของสหรัฐอเมริกา 75 ธนาคารเซลลตนตอแหงชาติ 75 หนวยงานที่สนับสนุนงานวิจัยเซลลตนตออื่นๆ 76 -4-
6.
รายละเอียดที่ติดตอหนวยงานที่เกี่ยวของกับการวิจัยและพัฒนาดานเซลลตนตอใน
สหรัฐอเมริกา 81 รายชื่อบริษัทในประเทศสหรัฐอเมริกาและแคนาดาที่เกี่ยวของกับการวิจัยและพัฒนา เซลลตนตอเพื่อนําไปใชในเชิงพาณิชย 88 บริษัทดานเซลลตนตอในประเทศสหรัฐอเมริกา 88 บริษัทดานเซลลตนตอในประเทศแคนาดา 114 วิธีการสืบคนขอมูลสิทธิบัตรทีเกี่ยวกับงานวิจัยเซลลตนตอของสหรัฐอเมริกา ่ 119 สํานักงานสิทธิบตรและเครืองหมายการคาแหงสหรัฐอเมริกา ั ่ 119 สเต็มเซลลแพทเทนทดอทคอม 129 วิเคราะหแนวโนมในอนาคตของเซลลตนตอในประเทศสหรัฐอเมริกา 134 แนวโนมในอนาคตของเซลลตนตอจากเซลลทเจริญวัยเต็มที่แลว ี่ 134 แนวโนมในอนาคตของเซลลตนตอจากตัวออนและอินดิวสพลูริโพเทนทสเต็มเซลล 135 แนวโนมของการนําเซลลตนตอมาประยุกตใชทางการแพทยในอนาคต 136 นโยบายของประธานาธิบดีโอบามาที่สงผลตอแนวโนมของงานวิจัยเซลลตนตอในอนาคต 142 กฎหมายเบย-โดล (Bayh-Dole Act) กับการพัฒนางานวิจัยดานเซลลตนตอ 143 ประเด็นที่เกี่ยวกับสิทธิบัตรดานเซลลตนตอ 144 แนวโนมการเจริญเติบโตของธุรกิจที่เกี่ยวของกับเทคโนโลยีเซลลตนตอ 145 แนวโนมในอนาคตของความรวมมือในเรื่องงานวิจัยเซลลตนตอระหวางประเทศ 147 มุมมองที่เกี่ยวกับงานวิจัยเซลลตนตอในระดับโลก 148 องคกรสาธารณประโยชนกบงานวิจัยที่เกียวกับดานพันธุกรรมและเซลลตนตอ ั ่ 152 เชิงอรรถ 154 เอกสารแนบ 166 อภิธานศัพท 172 บรรณานุกรม 177 -5-
7.
สารบัญตาราง ตารางที่
หนา 1 โรคที่สามารถนําเซลลในผูปวยไปสรางกลุมไอพีเอสเซลลที่มีความจําเพาะกับผูปวยได 44 2 หองทดลองที่มีกลุมเซลลตนตอซึ่งผานเกณฑในการนํามาใชเพื่อขอทุนสนับสนุนจาก รัฐบาลกลาง 56 3 นโยบายที่เกียวกับการใหทุนสนับสนุนงานวิจัยเซลลตนตอของแตละมลรัฐในสหรัฐอเมริกา ่ 66 4 งบประมาณของสถาบันสุขภาพแหงชาติของสหรัฐอเมริกาที่นํามาใชในการสนับสนุนงาน วิจัยเซลลตนตอ 71 5 รายรับของธุรกิจที่เกี่ยวของกับเซลลตนตอในกลุมวิทยาศาสตรชีวภาพในสหรัฐอเมริกา 147 6 ตัวอยางขอแตกตางในกฎหมายดานงานวิจัยเซลลตนตอจากตัวออนมนุษยของบางประเทศ 149 -6-
8.
สารบัญรูป รูปที่
หนา 1 โครงสรางของบลาสโตซิสต 12 2 การสกัดแยกเซลลตนตอจากมวลเซลลชนในเพื่อนํามาเพาะเลี้ยงในหองทดลอง ั้ 13 3 การเปลี่ยนแปลงของเซลลตนตอจากตัวออนไปเปนเซลลจําเพาะชนิดอื่นๆ 15 4 ไดเรคท ดิฟเฟอเรนทิเอชัน (Direct Differentiation) 16 5 การเปลี่ยนแปลงเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวไปเปนเซลลจําเพาะ โดยกระบวนการปกติ (Normal Differentiation) 19 6 การเปลี่ยนแปลงของเซลลตนตอจากเซลลทเจริญวัยเต็มที่แลวจากเนื้อเยื่อชนิดหนึ่ง ี่ ไปเปนเซลลชนิดจําเพาะของเนื้อเยื่อชนิดอื่น (Plasticity and Transdifferentiation) 21 7 การปลูกถายเซลลตนตอใหกับผูปวยโดยใชเซลลตนตอจากตัวออน 24 8 การปลูกถายเซลลตนตอใหกับผูปวยโดยใชเซลลตนตอจากเซลลทเจริญวัยเต็มที่แลว ี่ 25 9 การซอมแซมกลามเนื้อหัวใจโดยการใชเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวของ หนูทดลอง 26 10 เปรียบเทียบการสรางบลาสโตซิสตโดยการสืบพันธุตามธรรมชาติกบการยายฝากนิวเคลียส ั 28 11 ศักยภาพของเซลลตนตอในการบําบัดรักษาโรคตางๆ 31 12 กลไกการพัฒนาของเซลลตนตอเม็ดโลหิตไปเปนเซลลเม็ดเลือดตางๆ 34 13 เซลลตนตอในโครงสรางของรูขุมขน 35 14 โครงสรางของดวงตา 37 15 โครงสรางของหูชั้นใน 39 16 โครงสรางของปอด 40 17-22 รายละเอียดขอมูลการสืบคนสิทธิบัตรจากสํานักงานสิทธิบัตรและเครื่องหมายการคาแหง สหรัฐอเมริกา (USPTO) 120 23-26 รายละเอียดขอมูลการสืบคนสิทธิบัตรจากเว็บไซตสเต็มเซลลแพทเทนทดอทคอม (StemCellPatents.com) 130 27 การปลูกถายเซลลตนตอในมนุษย 135 28 อัตราการถือครองกรรมสิทธิ์ในสิทธิบัตรดานเซลลตนตอของหนวยงานตางๆและบริษัท ในสหรัฐอเมริกา 145 29 รายรับของธุรกิจที่เกี่ยวของกับเซลลตนตอในกลุมวิทยาศาสตรชีวภาพในสหรัฐอเมริกา 147 -7-
9.
บทสรุปผูบริหาร
สเต็มเซลล (Stem Cells) หรือเซลลตนตอมีคุณสมบัติสองประการสําคัญที่ไดสรางความหวังใหกับ ทั้งวงการวิทยาศาสตรและการแพทยซึ่งไดแกความสามารถในการสรางทดแทนตัวเองขึ้นมาใหมและการ เปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลชนิดอื่นๆไดมากมายหลายชนิด คุณสมบัติเหลานี้ไดจุดประกายใหมีการศึกษา คนควาตอเนื่องถึงความเปนไปไดและประสิทธิภาพในการนําเซลลตนตอมาใชเพื่อรักษาโรคตางๆ ปจจุบัน ในประเทศสหรัฐอเมริกางานวิจัยเซลลตนตอไดมีการพัฒนากาวหนาเพิ่มขึ้นอยางรวดเร็วกวาแตในอดีต เนื่องจากนโยบายของประธานาธิบดีโอบามาที่ใหการสนับสนุนรวมทั้งใหเงินทุนแกงานวิจัยเซลลตนตอ ปจจุบันเซลลตนตอไดมีการนํามาประยุกตใชทางการแพทยเพื่อรักษาโรคตางๆ โดยเฉพาะอยางยิ่ง โรคที่ในอดีตไมสามารถรักษาไดเปนตนวา โรคอัลไซเมอร โรคพารกินสัน และโรคเบาหวานในเด็ก โดยเซลล ตนตอของมนุษยที่มีการนํามาประยุกตใชไดแก เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลว เซลลตนตอจาก ตัวออนมนุษย และอินดิวสพลูริโพเทนทสเต็มเซลล ซึ่งเปนการนําเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลว มาเปลี่ยนคุณสมบัติใหเปนเหมือนเซลลตนตอจากตัวออน ตอไปในอนาคตการนําเซลลตนตอมาใชเพื่อการ รั ก ษาโรคจะมุ ง เน น ไปที่ ก ารผสมผสานวิ ธี ก ารรั ก ษาโดยใช เ ซลล ต น ตอหลายชนิ ด เข า ด ว ยกั น เพื่ อ เพิ่ ม ประสิทธิภาพของการรักษา รวมทั้งมีการนําเซลลตนตอมาใชในการทดสอบยาชนิดตางๆกอนนํามาใชรักษา โรคใหกับผูปวยจริงเพื่อศึกษาผลกระทบและลดความเสี่ยงของการเกิดผลขางเคียงจากการใชยา ในอนาคตงานวิจัยเซลลตนตอมีแนวโนมที่จะเกิดการพัฒนากาวหนายิ่งขึ้น และสงผลใหการนําเซลล ตนตอมาประยุกตใชทางการแพทยมีประสิทธิภาพที่ดียิ่งขึ้น นอกจากนี้ธุรกิจที่เกี่ยวของกับเซลลตนตอใน สหรัฐอเมริกาจะมีการเติบโตขึ้นโดยเฉพาะอยางยิ่งธุรกิจที่เกี่ยวของกับการนําเซลลมาใชรักษาโรคและการ จัดเก็บเซลลเพื่อการรักษา อยางไรก็ตามทิศทางและนโยบายที่เกี่ยวกับงานวิจัยเซลลตนตอยังคงมีการ เปลี่ยนแปลงอยูตลอดเวลา นอกจากนี้ยังมีปจจัยแวดลอมตางๆที่สงผลตองานวิจัยเซลลตนตอเปนตนวา กฎหมาย นโยบายในเรื่องของการใหเงินทุนสนับสนุนงานวิจัย นโยบายในเรื่องที่เกี่ยวกับสิทธิบัตร ทัศนคติ และการตอบสนองของประชาชน ซึ่งปจจัยตางๆเหลานี้เปนสิ่งที่ตองมีการติดตามตอไปเพื่อใหสามารถ วิเคราะหทิศทางในอนาคตของงานวิจัยเซลลตนตอทั้งในประเทศสหรัฐอเมริกาและในระดับโลกไดชัดเจน มากยิ่งขึ้น -8-
10.
ความรูเกี่ยวกับเซลลตนตอ 1. บทนํา
งานวิจัยดานสเต็มเซลล (Stem Cells) หรือเซลลตนตอเปนความรูในระดับสูงซึ่งเกี่ยวของกับ กระบวนการพัฒนาของสิ่งมีชีวิตที่เริ่มตนจากเซลลตนกําเนิดเซลลเดียว และกระบวนการแทนที่เซลลที่ เสื่อมสภาพไปโดยเซลลที่แข็งแรงในสิ่งมีชีวิตที่เจริญวัยเต็มที่แลว งานวิจัยเซลลตนตอนี้ยังชวยจุดประกาย ใหนักวิทยาศาสตรไดศึกษาคนควาตอเนื่องถึงความเปนไปไดในการใชเซลลมาชวยรักษาโรคตางๆ โดย เรียกวิทยาการในการนําเซลลมารักษาโรคนี้วา การแพทยทางเลือกใหม หรือการแพทยการสรางอวัยวะ ใหม (Regenerative or Reparative Medicine) ปจจุบันเซลลตนตอเปนสาขาของชีววิทยาที่ไดรับความ สนใจเปนอยางยิ่ง งานวิจัยเซลลตนตอไดชวยตอบคําถามที่เกี่ยวกับวิทยาศาสตรไดมากมาย และกอใหเกิด การคนพบใหมมากมายเชนเดียวกัน (NIH: Stem Cell Basics, 2008) 2. ประเภทของเซลลตนตอและความสําคัญ เซลลตนตอมีคุณลักษณะที่สําคัญอยูสองประการซึ่งทําใหเซลลตนตอแตกตางและสามารถจําแนก ออกไดจากเซลลทั่วไป ประการแรก เซลลตนตอนี้เปนเซลลที่ไมจําเพาะซึ่งสามารถสรางทดแทนตัวเองขึ้นมา ใหมไดในระยะเวลาอันยาวนานโดยกระบวนการแบงเซลลตัวเองขึ้นมาใหม ประการที่สองคือ เซลลตนตอ สามารถเปลี่ ย นแปลงไปเป น เซลล ช นิ ด จํ า เพาะที่ มี ห น า ที่ พิ เ ศษเฉพาะอย า งภายใต ส ภาวะที่ เ หมาะสม ตัวอยางเชนเซลลที่ทําหนาที่ควบคุมจังหวะการเตนของหัวใจ (Beating Cells) ซึ่งที่อยูที่กลามเนื้อหัวใจ หรือ เซลลที่ทําหนาที่ผลิตอินซูลิน (Insulin-Producing Cells) ซึ่งอยูที่ตับออน นักวิทยาศาสตร ได ให ความสนใจในเซลลตนตอจากสัต วและมนุ ษยอยูสองชนิดซึ่งไดแก เซลล ตนตอจากตัวออน (Embryonic Stem Cells) และเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลว (Adult Stem Cells) เซลลตนตอทั้งสองชนิดนี้มีหนาที่และคุณลักษณะที่แตกตางกัน เปนเวลามากกวา 20 ปแลวที่นักวิทยาศาสตรไดคนพบวิธีการในการสกัดแยกและเพาะเลี้ยงเซลล ตนตอจากตัวออนของหนู หลังจากนั้นเปนตนมานักวิทยาศาสตรไดมีการศึกษาคนควาเพิ่มเติมและไดมีการ คนพบใหมๆเกิดขึ้นมากมาย จนกระทั่งในป พ.ศ. 2541 (ค.ศ. 1998) นักวิทยาศาสตรไดประสบความสําเร็จ ในการสกัดแยกและเพาะเลี้ยงเซลลตนตอจากตัวออนมนุษยในหองทดลองเปนครั้งแรก และไดเรียกเซลลที่ สกัดแยกไดในครั้งนั้นวา เซลลตนตอจากตัวออนมนุษย (Human Embryonic Stem Cells) ตัวออน มนุษยที่นักวิทยาศาสตรไดนํามาใชในการทดลองครั้งนั้นเปนตัวออนที่เหลือหรือไมตองการจากตัวออนที่ถูก สรางขึ้นมาจากการปฏิสนธิเทียมในหลอดแกว (In Vitro Fertilization) เพื่อจุดประสงคในการแกปญหา ภาวะการมีบุตรยาก ตัวออนที่เหลือนี้เปนตัวออนที่ไดรับมาโดยการบริจาค และผูบริจาคไดแสดงความ ยินยอมในการใหตัวออนมาทําการทดลองดังกลาว เซลลตนตอมีความสําคัญกั บสิ่งมีชีวิ ตดว ยเหตุผลหลายประการ ในตั ว ออนที่มีอายุ 3-5 วัน ซึ่ง เรียกวาระยะบลาสโตซิสต (Blastocyst) นี้ เซลลตนตอในเนื้อเยื่อจะมีการเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลชนิด -9-
11.
จําเพาะหลายชนิดซึ่งจะพัฒนาตอไปเปนหัวใจ ปอด ผิวหนัง
และเนื้อเยื่อชนิดอื่นๆ ในเนื้อเยื่อที่ของสัตว เจริญเติบโตเต็มที่แลวบางชนิดเปนตนวา ไขกระดูก ผิวหนัง สมอง เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่ แลวจะสามารถสรางตัวเองขึ้นมาใหมเพื่อทดแทนเซลลท่ถูกทําลายไปจากภาวะการบาดเจ็บหรือเจ็บปวยจาก ี โรคตางๆได นักวิทยาศาสตรไดมีสมมุติฐานและมีความเห็นวาในอนาคตเซลลตนตอจะสามารถนํามาใชในการ รักษาโรคตางๆไดเชน โรคพารกินสัน (Parkinson’s Disease) โรคเบาหวาน และโรคหัวใจ ดังนั้นจึงมี งานวิจัยที่เกี่ยวของกับเซลลตนตอเกิดขึ้นมากมาย และนอกจากที่นักวิทยาศาสตรไดทําการทดลองศึกษาถึง ความเปนไปไดในการนําเซลลมารักษาโรคแลว นักวิทยาศาสตรยังไดทําการศึกษาวิจัยถึงความเปนไปไดใน การนําเซลลตนตอมาใชในการทดสอบและคัดเลือกยาชนิดใหม ซึ่งในการที่จะพัฒนาเซลลตนตอเพื่อการ รักษาโรคหรือการทดสอบยาชนิดใหมนั้น คุณลักษณะพื้นฐานสําคัญของเซลลตนตอที่นักวิทยาศาสตรตอง ทําความเขาใจและทําการศึกษาอยางละเอียดลึกซึ้งนั้นไดแก 1) กระบวนการที่เซลลตนตอสามารถคงสภาพเปนเซลลที่ไมจําเพาะและการสรางตัวเองทดแทน ขึ้นมาใหมไดในระยะเวลานาน 2) ปจจัยที่กระตุนและทําใหเซลลตนตอเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลจําเพาะชนิดตางๆ 3. คุณลักษณะพิเศษเฉพาะของเซลลตนตอ เซลลตนตอนั้นแตกตางจากเซลลชนิดอื่นๆในรางกาย โดยที่เซลลตนตอทุกชนิดมีความสามารถใน การแบงตัวและสรางทดแทนตัวเองขึ้นมาใหมในระยะเวลานาน นอกจากนี้เซลลตนตอยังมีคุณสมบัติเปน เซลลที่ไมจําเพาะซึ่งสามารถเปลี่ยนไปเปนเซลลจําเพาะชนิดอื่นๆในรางกายได คุณลักษณะพิเศษเฉพาะ ของเซลลตนตอสรุปไดดังนี้ 3.1 เซลลตนตอเปนเซลลที่ไมจําเพาะ คุ ณลั ก ษณะพื้ น ฐานที่สํ า คัญ ของเซลลตน ตอคื อ เซลลต น ตอไม ไดมี โ ครงสรางหรื อ ลั ก ษณะเป น เนื้อเยื่อจําเพาะที่จะเอื้ออํานวยใหเซลลตนตอทําหนาที่เฉพาะเจาะจง เซลลตนตอไมสามารถทํางานรวมกับ เซลลขางเคียงเพื่อสูบฉีดเลือดไปเลี้ยงรางกาย (เชน เซลลกลามเนื้อหัวใจ) เซลลตนตอไมสามารถลําเลียง ออกซิเจนไปเลี้ยงรางกายโดยผานกระแสโลหิตได (เชน เซลลเม็ดเลือดแดง) เซลลตนตอไมสามารถสง กระแสสัญญาณเคมีไฟฟาไปกระตุนเซลลอื่นใหควบคุมการเคลื่อนไหวของรางกาย (เชน เซลลประสาท) อยางไรก็ตามเซลลตนตอที่ไมจําเพาะนี้สามารถเปลี่ยนไปเปนเซลลจําเพาะเพื่อทําหนาที่เฉพาะได ดังเชน เซลลกลามเนื้อหัวใจ เซลลเม็ดเลือดแดง และเซลลประสาท 3.2 เซลลตนตอสามารถแบงตัวเพื่อสรางทดแทนตัวเองขึ้นมาใหมไดเปนระยะเวลานาน เซลลตนตอไมเหมือนเซลลจําเพาะตรงที่มีความสามารถในการแบงตัวเพื่อสรางตัวเองทดแทนขึ้นมา ใหมไดหลายครั้ง ซึ่งเรียกความสามารถในการสรางตัวเองขึ้นมาใหมของเซลลตนตอนี้วา การแพรขยาย - 10 -
12.
หรือการเพิ่มจํานวนเซลล (Proliferation) เซลลตนตอสามารถเพิ่มจํานวนจากเซลลเริ่มตนเพียงไมกี่เซลล ไปเปนหลายลานเซลลในระยะเวลาเพียงไมกี่เดือน
ถาเซลลที่ถูกสรางจากการเพิ่มจํานวนของเซลลตนตอนี้ ยังมีลักษณะเปนเซลลที่ไมจําเพาะ เซลลที่ถูกสรางขึ้นมาใหมนี้ก็สามารถสรางทดแทนตัวเองขึ้นมาใหมได เชนกัน 3.3 เซลลตนตอสามารถเปลี่ยนไปเปนเซลลจําเพาะชนิดอื่นได กระบวนการที่เซลลตนตอเปลี่ยนไปเปนเซลลชนิดจําเพาะนี้เรียกวา การเปลี่ยนแปลงและพัฒนา เซลลเพื่อไปทําหนาที่ตางๆ หรือ ดิฟเฟอเรนทิเอชัน (Differentiation) นักวิทยาศาสตรพยายามศึกษา ถึงปจจัยทั้งภายในและภายนอกในการทําใหเซลลมีการเปลี่ยนแปลง ปจจัยภายในที่ควบคุมใหเกิดการ เปลี่ยนแปลงของเซลลคือ ยีนที่กระจายอยูตามสายดีเอ็นเอ ยีนนี้มีรหัสพันธุกรรมที่เปนทําหนาที่เปนกลไก ควบคุมการเปลี่ยนแปลงโครงสรางและการทําหนาที่ของเซลล ปจจัยภายนอกไดแก สารเคมีที่หลั่งมาจาก เซลลอื่นๆ เซลลที่อยูขางเคียง รวมทั้งโมเลกุลของสารประกอบในของเหลวที่อยูรอบลอมเซลล (เชน โมเลกุล ของธาตุอาหารในสารละลายที่ใชเพาะเลี้ยงเซลล) เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวโดยสวนใหญจะเปลี่ยนไปเปนเซลลชนิดจําเพาะตามชนิด ของเนื้ อ เยื่ อ เดิ ม ที่ นํ า มาสกั ด แยกเซลล ต น ตอนั้ น เซลล ต น ตอที่ ส กั ด แยกมาจากไขกระดู ก จะสามารถ เปลี่ยนไปเปนเซลลเม็ดเลือดชนิดตางๆ เชน เซลลเม็ดเลือดแดง เซลลเม็ดเลือดขาว และเกล็ดเลือด อยางไร ก็ตามงานวิจัยในชวงระยะเวลาสองถึงสามปที่ผานมาไดทําใหเกิดการคนพบวา เซลลตนตอที่สกัดแยกมา จากเนื้อเยื่ อชนิ ดหนึ่ งนั้ นสามารถเปลี่ ย นไปเปน เซลลช นิดจําเพาะที่อยูใ นเนื้อเยื่ อชนิ ดอื่นได โดยเรี ยก ปรากฏการณนี้วา พลาสติซิตี้ (Plasticity) ตัวอยางเชน เซลลตนตอจากไขกระดูกเปลี่ยนไปเปนเซลล ประสาท หรือเซลลตับสามารถเปลี่ยนเปนเซลลที่ผลิตอินซูลินได 4. เซลลตนตอจากตัวออน (Embryonic Stem Cells) 4.1 อายุของตัวออนที่นํามาใชในการสกัดแยกเซลลตนตอ เซลลตนตอจากตัวออนไดรับมาจากตัวออนซึ่งมาจากไขที่ไดรับการปฏิสนธิเทียมในหลอดแกว (In Vitro Fertilization) และผูบริจาคไดใหความยินยอมในการนํามาใชทดลองเทานั้น เซลลตนตอจาก ตัวออนที่เกิดจากการปฏิสนธิโดยธรรมชาติในมดลูกจะไมถูกนํามาใช ตัวออนมนุษยที่จะนํามาใชเพื่อสกัด แยกเซลลตนตอนั้นจะมีอายุประมาณ 4-5 วัน และมีลักษณะเปนเซลลทรงกลมที่ภายในกลวง โดยเรียกตัว ออนที่อยูในระยะนี้วา บลาสโตซิสต (Blastocyst) บลาสโตซิสตจะประกอบดวยโครงสรางสามสวนไดแก โทรโฟบลาส (Trophoblast) เป น โครงสร า งชั้ น นอกสุ ด ที่ อ ยู ล อ มรอบบลาสโตซิ ส ต บลาสโตซี ล (Blastocoel) เปนโครงสร างชั้ นในของบลาสโตซิสต ซึ่งมีลักษณะเปนชองกลวง และ มวลเซลลชั้ นใน (Inner Cell Mass) เปนกลุมเซลลที่ประกอบดวยเซลลจํานวนประมาณ 30 เซลล ซึ่งจะอยูที่ปลายดานหนึ่ง ของ บลาสโตซีล (ดังแสดงในรูปที่ 1) - 11 -
13.
รูปที่ 1 โครงสรางของบลาสโตซิสต
(ที่มา: KU, 2009) 4.2 การเพาะเลี้ยงเซลลตนตอจากตัวออนในหองทดลอง การเพาะเลี้ยงเซลลในหองทดลอง (Cell Culture) ของเซลลตนตอจะเริ่มจากการสกัดแยกมวล เซลลชั้นในและนํามาใสในจานเพาะเลี้ยงเซลลที่ใสอาหารเลี้ยงเซลล (Culture Medium) ไวแลว (ดังแสดง ในรูปที่ 2) จากนั้นเซลลจะเริ่มแบงตัวและกระจายอยูที่ผิวหนาของจานเพาะเลี้ยงเซลล ดานในของจาน เพาะเลี้ยงเซลลนี้จะถูกเคลือบดวยเซลลตนตอจากผิวหนังของหนูซึ่งไดผานกระบวนการทําปฏิกิริยากับ สารเคมีเพื่อปองกันไมใหเซลลเกิดการแบงตัวอีก ชั้นของเซลลที่นํามาเคลือบไวดานในของจานเพาะเลี้ยง เซลลนี้เรียกวา ชั้นใหอาหาร (Feeder Layer) จุดประสงคของการเคลือบดานในของจานเพาะเลี้ยงเซลลคอ ื ตองการใหผิวดานในของจานเพาะเลี้ยงเซลลมีลักษณะที่เหนียว เพื่อใหมวลเซลลชั้นในสามารถมาเกาะติดที่ ผิวของจานเพาะเลี้ยงเซลลได นอกจากนี้ชั้นใหอาหารจะปลอยสารอาหารหรือแรธาตุที่จําเปนเขาสูอาหาร เลี้ยงเซลลเพื่อใหเซลลตนตอที่นํามาเพาะเลี้ยงเกิดการแบงตัวและเพิ่มจํานวนไดอยางสมบูรณ ปจจุบัน นักวิทยาศาสตรไดพยายามทดลองหาวิธีการเพาะเลี้ยงเซลลเซลลตนตอโดยไมตองมีชั้นใหอาหารที่มาจาก เซลลตนตอของหนู เนื่องจากมีความเสี่ยงที่ไวรัสหรือโมเลกุลบางชนิดในเซลลของหนูอาจแพรผานเขาไปใน เซลลของมนุษยได - 12 -
14.
รูปที่ 2 การสกัดแยกเซลลตนตอจากมวลเซลลชั้นในเพื่อนํามาเพาะเลี้ยงในหองทดลอง
(ที่มา: KU, 2009) หลังจากที่เพาะเลี้ยงมวลเซลลชั้นในไวหลายวัน เซลลของมวลเซลลชั้นในจะเพิ่มจํานวนจนกระทั่ง เต็มจานเพาะเลี้ยงเซลล นักวิทยาศาสตรจะแยกเซลลนี้ออกมาจากจานเพาะเลี้ยงเซลลเดิมเพื่อเปลี่ยนถายใส ลงในจานเพาะเลี้ยงเซลลใหม (Subculturing) และจะถูกทําอยางตอเนื่องเปนเวลาหลายเดือน กระบวนการ ยา ยเซลล จ ากจานเพาะเลี้ ย งเซลล เ ดิ ม เพื่ อ ไปใส ใ นจานเพาะเลี้ ย งเซลล ใ หม ใ นแต ล ะครั้ ง จะถู ก เรี ย กว า พาสเสจ (Passage) หลังจากผานไปประมาณ 6 เดือน เซลลตนตอจากมวลเซลลชั้นในที่เริ่มตนจาก 30 เซลล จะเพิ่มจํานวนเปนหลายลานเซลลโดยที่ยังไมเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลจําเพาะชนิดอื่นๆ กลุมเซลล ตนตอจากตัวออน (Embryonic Stem Cell Line) นี้จะถูกแยกออกเปนกลุมเล็กๆเพื่อนําไปแชแข็งเตรียม ไวสําหรับการทดลองตอไปหรือสงไปยังหองทดลองอื่นๆ 4.3 การตรวจสอบในหองทดลองเพื่อพิสูจนและจําแนกเซลลตนตอจากตัวออน ในชวงระหวางการเพาะเลี้ ยงเซลลต นตอจากตัว ออนในหองทดลอง นักวิท ยาศาสตรจะทําการ ตรวจสอบว า เซลล ที่ เ พาะเลี้ ย งได นั้ น มี คุ ณ สมบั ติ พื้ น ฐานที่ เ หมื อ นกั บ เซลล ต น ตอจากตั ว อ อ น ซึ่ ง เรี ย ก กระบวนการตรวจสอบนี้วาคาแรกเตอไรเซชั่น (Characterization) อยางไรก็ตามนักวิทยาศาสตรที่ศึกษาเกี่ยวกับเซลลตนตอจากตัวออนยังไมสามารถตกลงหาขอสรุป ถึงวิธีการที่เปนมาตรฐานในการตรวจสอบคุณสมบัติของเซลลตนตอได นักวิทยาศาสตรตางใหความเห็นวา วิธีการที่ใชตรวจสอบในปจจุบันยังไมไดเปนวิธีที่ดีที่สุดในการตรวจสอบคุณสมบัติทางชีววิทยาและหนาที่ - 13 -
15.
ของเซลล ต น
ตอจากตั ว อ อ น ดั ง นั้ น เพื่ อ ให ก ารตรวจสอบได ผ ลลั พ ธ ที่ มี ป ระสิ ท ธิ ภ าพมากที่ สุ ด นักวิทยาศาสตรจึงใชวิธีตรวจสอบหลายวิธีหลายอยางรวมกัน ซึ่งวิธีการตรวจสอบที่ถูกใชไดแก 1) เพาะเลี้ยงเซลลและแยกเซลลเพื่อเปลี่ยนถายใสลงในจานเพาะเลี้ยงเซลลใหมเปนระยะเวลาหลาย เดือน เพื่อตรวจสอบวาเซลลที่เพาะเลี้ยงไดนี้มีความสามารถในการสรางตัวเองขึ้นมาใหมไดใน ระยะเวลานาน และตรวจสอบวาเซลลนี้ยังมีลักษณะเปนเซลลที่ไมจําเพาะอยู 2) ใชเทคนิคพิเศษในการตรวจสอบการแสดงเครื่องหมายบนผิวเซลล (Surface Markers) ที่ สามารถพบไดบนเซลลที่ไมจําเพาะเทานั้น การตรวจสอบที่สําคัญอีกวิธีคือการตรวจสอบการมีอยู ของโปรตีนที่มีชื่อวา Octamer-4 (Oct-4) ซึ่งเปนโปรตีนที่ถูกสรางจากเซลลที่ไมจําเพาะและเปน ปจจัยที่ควบคุมการเพิ่มจํานวนและพัฒนาการของเซลล (Transcription Factor) 3) ตรวจสอบโครโมโซมผ า นกล อ งจุ ล ทรรศน เ พื่ อ ดู ว า โครโมโซมมี ก ารถู ก ทํ า ลายหรื อ จํ า นวน โครโมโซมมีการเปลี่ยนแปลง แตการตรวจสอบโดยวิธีนี้ไมสามารถบงชี้วาเซลลนั้นมีการกลายพันธุ (Genetic Mutations) หรือไม 4) ตรวจสอบวาเซลลสามารถนํามาถายใสลงในจานเพาะเลี้ยงเซลลใหมหลังจากที่ถูกแชแข็งและ ผานการทําการละลายแลว 5) ตรวจสอบวาเซลลตนตอจากตัวออนมนุษยมีคุณสมบัติในการเปลี่ยนไปเปนเซลลจําเพาะชนิด อื่นๆไดเกือบทุกชนิด ซึ่งเรียกคุณสมบัติเชนนี้วา พลูริโพเทนท (Pluripotent) การตรวจสอบเชนนี้ สามารถทําไดโดยวิธีตางๆดังนี้ 5.1) ปลอยใหเซลลมีการเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลชนิดอื่นตามธรรมชาติโดยไมตองควบคุม 5.2) ควบคุมเซลลใหเกิดการเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลจําเพาะชนิดที่ตองการ 5.3) ฉีดเซลลเขาไปในหนูทดลองที่ถูกยับยั้งภูมิคุมกันไวแลว เพื่อตรวจสอบการเกิดเนื้องอก ชนิดไมรายแรง (Benign Tumor) ที่เรียกวา เทอราโทมา (Teratoma) เทอราโทมานี้จะ ประกอบดวยกลุมเซลลชนิดจําเพาะทั้งหมดหรือบางสวน ซึ่งจะสามารถใชเปนเครื่องบงชี้วา เซลลตนตอนั้นสามารถเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลชนิดจําเพาะอื่นๆได 4.4 กระบวนการเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลจําเพาะชนิดอื่นๆของเซลลตนตอจากตัวออน เมื่อเพาะเลี้ยงเซลลตนตอจากตัวออนไวในจานเลี้ยงเซลลและควบคุมปจจัยตางๆไว เซลลตนตอจาก ตัวออนจะคงสภาพเปนเซลลที่ไมจําเพาะ แตเมื่อเซลลนั้นมาจับตัวรวมกันเปนกลุมที่เรียกวา เอ็มบริออย บอดีส (Embryoid Bodies) เซลลจะเริ่มเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลจําเพาะชนิดอื่นเชน เซลลกลามเนื้อ และ เซลลประสาท (ดังแสดงในรูปที่ 3) - 14 -
16.
รูปที่ 3 การเปลี่ยนแปลงของเซลลตนตอจากตัวออนไปเปนเซลลจาเพาะชนิดอื่นๆ
ํ (ที่มา: Kochar, 2004) นักวิทยาศาสตรไดพยายามควบคุมการเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลชนิดอื่นๆที่ตองการโดยวิธีตางๆ เช น การเปลี่ ย นองค ป ระกอบทางเคมี ใ นอาหารเลี้ ย งเซลล การเปลี่ย นชั้น ให อ าหารที่ เ คลื อ บไว ใ นจาน เพาะเลี้ยงเซลล การดัดแปลงเซลลโดยใสยีนพิเศษบางชนิด จากการวิจัยหลายปที่ผานมา นักวิทยาศาสตร ไดป ระสบความสําเร็ จในการคน พบวิ ธี ก ารเพื่อ ควบคุมการเปลี่ย นแปลงโดยตรงหรื อเรียกวา ไดเรคท ดิฟเฟอเรนทิเอชัน (Directed Differentiation) ของเซลลตนตอจากตัวออนไปเปนเซลลจําเพาะชนิดอื่น บางชนิด (ดังแสดงในรูปที่ 4) ซึ่งถานักวิทยาศาสตรสามารถควบคุมการเปลี่ยนแปลงของเซลลตนตอจากตัว - 15 -
17.
ออนไปเปนเซลลชนิดอื่นไดโดยสมบูรณแลว ในอนาคตโรคบางชนิดเชน โรคพารกินสัน
โรคเบาหวาน และ โรคหัวใจ ก็จะสามารถรักษาใหหายไดโดยการปลูกถายเซลลจําเพาะชนิดที่จําเปนในการรักษาใหกับผูปวย รูปที่ 4 ไดเรคท ดิฟเฟอเรนทิเอชัน (Directed Differentiation) (ที่มา: NIH: Stem Cell Basics, 2008) - 16 -
18.
5. เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลว (Adult
Stem Cells) เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวเปนเซลลที่ไมจําเพาะซึ่งพบไดทามกลางเซลลชนิดจําเพาะ ในเนื้อเยื่อหรืออวัยวะ เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่สามารถสรางทดแทนตัวเองขึ้นมาใหมไดและ สามารถเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลชนิดจําเพาะไดบางชนิด หนาที่หลักของเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัย เต็มที่แลวในสิ่งมีชีวิตคือรักษาและซอมแซมเนื้อเยื่อในสวนที่พบเซลลตนตอนั้น นักวิทยาศาสตรบางคนได เรียกเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลววาเซลลตนตอจากรางกาย (Somatic Stem Cell) และยัง ไมมีใครคนพบจุดกําเนิดของในเนื้อเยื่อของเซลลตนตอประเภทนี้ ปจจุบันนักวิทยาศาสตรคนพบเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวในเนื้อเยื่อประเภทตางๆ มากขึ้น การคนพบนี้ไดสรางความหวังใหกับนักวิทยาศาสตรถึงความเปนไปไดในการนําเซลลตนตอจาก เซลลที่เจริญวัยเต็มที่มาปลูกถายใหกับผูปวย ในความเปนจริงแลวเซลลตนตอที่ทําหนาที่สรางเลือดจากไข กระดู ก ได ถู ก ใช ป ลู ก ถ า ยมากกว า 30 ป แ ล ว เซลล ต น ตอจากเซลล ที่ เ จริ ญ วั ย เต็ ม ที่ แ ล ว บางชนิ ด มี ความสามารถในการเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลอื่นๆไดหลายชนิดภายใตสภาวะที่เหมาะสม เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวนั้นไดถูกคนพบเปนครั้งแรกเมื่อ 40 ปที่แลว ในป พ.ศ. 2503 (ค.ศ. 1960) นักวิจัยไดคนพบวาไขกระดูกประกอบดวยเซลลตนตอสองชนิด กลุมแรกเรียกวาเซลล ตนตอเม็ดโลหิต (Hematopoietic Stem Cells) ซึ่งทําหนาที่สรางเซลลเม็ดเลือดทุกชนิดในรางกาย กลุม ที่สองเรียกวาเซลลจากไขกระดูกในชั้นสตอรมาล (Bone Marrow Stromal Cells) ซึ่งถูกคนพบ หลังจากเซลลกลุมแรกประมาณ 2-3 ป และเซลลกลุมนี้จะทําหนาที่สรางกระดูก กระดูกออน ไขมัน และ เนื้อเยื่อเสนใย (Fibrous Connective Tissue) 5.1 แหลงที่มาและหนาที่ของเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลว เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวนี้สามารถพบไดในอวัยวะและเนื้อเยื่อหลายชนิด จุดสําคัญ ที่ควรทําความเขาใจเกี่ยวกับเซลลตนตอประเภทนี้คือ ในเนื้อเยื่อแตละชนิดจะมีเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญ วัยเต็มที่แลวจํ านวนนอยมาก เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวจะสามารถพบไดในบริเวณแค บางสวนของเนื้อเยื่อและจะคงสภาพเปนเซลลที่ยังไมมีการแบงตัวเปนระยะเวลาหลายปจนกระทั่งไดรับการ กระตุนโดยโรคหรือการบาดเจ็บที่สงผลตอเนื้อเยื่อสวนนั้น เนื้อเยื่อที่มีการรายงานการคนพบเซลลตนตอจาก เซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวไดแก สมอง ไขกระดูก กระแสเลือด (Peripheral Blood) หลอดเลือด กลามเนื้อ โครงราง (Skeletal Muscle) ผิวหนัง และตับ นักวิทยาศาสตรไดพยายามหาวิธีเพาะเลี้ยงและควบคุมการเปลี่ยนแปลงของเซลลตนตอจากเซลลที่ เจริญวัยเต็มที่แลวในหองทดลองไปเปนเซลลจําเพาะชนิดตางๆที่ตองการเพื่อใชในการรักษาโรคหรืออาการ บาดเจ็ บ ตั ว อย า งของการรั ก ษาโดยใช เ ซลล ต น ตอชนิ ด นี้ ไ ด แ ก การปลู ก ถ า ยเซลล ที่ ผ ลิ ต โดปามี น (Dopamine-Producing Cells) ลงในสมองของผูปวยที่เปนโรคพารกินสัน การปลูกถายเซลลที่ผลิตอินซูลิน (Insulin-Producing Cells) ใหกับผูปวยดวยโรคเบาหวานชนิดที่ 1 (Type I Diabetes) และการซอมแซม - 17 -
19.
กลามเนื้อหัวใจในผูปวยที่มีโอกาสเกิดอาการกลามเนื้อหัวใจวาย (Heart Attack)
ดวยเซลลกลามเนื้อหัวใจ (Cardiac Muscle Cells) 5.2 การตรวจสอบในหองทดลองเพื่อพิสูจนและจําแนกเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวั ย เต็มที่แลว นักวิทยาศาสตรยังไมสามารถตกลงหาขอสรุปถึงเกณฑมาตรฐานในการพิสูจนและจําแนกเซลล ต น ตอจากเซลล ที่ เ จริ ญ วั ย เต็ ม ที่ แ ล ว อย า งไรก็ ต ามนั ก วิ ท ยาศาสตร ส ว นใหญ จ ะเลื อ กแนวทางในการ ตรวจสอบตามวิธีหนึ่งหรือมากกวาจากสามวิธีดังตอไปนี้ 1) ทําเครื่องหมายกับเซลลตนตอที่อยูที่เนื้อเยื่อโดยใชเครื่องหมายโมเลกุล (Molecular Marker) แลวติดตามการเปลี่ยนแปลงที่เกิดขึ้นวาเซลลตนตอเปลี่ยนไปเปนเซลลจําเพาะชนิดใด 2) สกัดแยกเซลลตนตอจากสิ่งมีชีวิตเพื่อนํามาเพาะเลี้ยงในหองทดลอง จากนั้นปลูกถายกลุมเซลล นั้นใหกับสิ่งมีชีวิตตัวใหม เพื่อตรวจสอบวากลุมเซลลนั้นสามารถกลับมารวมตัวกันที่เนื้อเยื่อตน กําเนิดชนิดเดิม 3) สกัดแยกเซลลตนตอจากสิ่งมีชีวิตแลวนํามาเพาะเลี้ยงในหองทดลอง ใสปจจัยที่ควบคุมการ เจริญเติบโตตาง ๆ (Growth Factors) หรือใสยีนชนิดใหมเพื่อควบคุมการเปลี่ยนแปลงของเซลล เพื่อตรวจสอบดูชนิดของเซลลที่เปลี่ยนแปลงไป เซลล ตน ตอจากเซลลที่เจริญวั ย เต็มที่ แลว หนึ่งเซลล จะสามารถสรางกลุ มเซลลที่มีลัก ษณะทาง พันธุกรรมเหมือนกับเซลลตนกําเนิดได และเรียกกลุมเซลลนี้วา โคลน (Clone) กลุมเซลลนี้จะสามารถ เปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลชนิดจําเพาะที่เหมาะสมของเนื้อเยื่อได โดยเมื่อเร็วๆนี้นักวิทยาศาสตรไดประสบ ความสําเร็จในการใสไวรัสบางชนิดเขาไปในโคลนจากเซลลตนตอเพื่อควบคุมใหเซลลสรางตัวเองขึ้นมาใหม และไปซอมแซมเนื้อเยื่อที่บาดเจ็บ 5.3 การเปลี่ยนแปลงและการพัฒนาเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวเพื่อไปทํา หนาที่ตางๆ เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวจากเนื้อเยื่อหลายๆชนิดสามารถพัฒนาไปสูกระบวนการ การเปลี่ยนแปลงและการพัฒนาไปเปนเซลลชนิดที่จําเพาะสําหรับเนื้อเยื่อชนิดนั้นๆเพื่อทําหนาที่โดยวิธีปกติ ได (Normal Differentiation) อยางไรก็ตามเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวจากเนื้อเยื่อชนิดหนึ่งก็ สามารถเปลี่ยนไปเปนเซลลชนิดจําเพาะของเนื้อเยื่อชนิดอื่นได ซึ่งเรียกความสามารถนี้วา ทรานสดิฟเฟอ- เรนทิเอชัน (Transdifferentiation) หรือ พลาสติซิตี้ (Plasticity) 1) การเปลี่ยนแปลงเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวไปเปนเซลลจําเพาะโดยกระบวนการ ปกติ (Normal Differentiation) เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวในสิ่งมีชีวิตสามารถแบงตัว - 18 -
20.
ไดเปนระยะเวลานานและเปลี่ยนไปเปนเซลลที่มีโครงสราง รูปราง คุณลักษณะ
และหนาที่จําเพาะ ตามชนิดของเนื้อเยื่อที่เปนตนกําเนิดของเซลลตนตอนั้น (ดังแสดงในรูปที่ 5) ตัวอยางเชน รูปที่ 5 การเปลี่ยนแปลงเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวไปเปนเซลลจําเพาะ โดยกระบวนการปกติ (Normal Differentiation) (ที่มา: NIH: Stem Cell Basics, 2008) 1.1) เซลลตนตอเม็ดโลหิต (Hematopoietic Stem Cells) เปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลเม็ด เลือดไดทุกชนิดซึ่งไดแก • เซลลเม็ดเลือดแดง บีลิมโฟไซต (B Lymphocytes) • ทีลิมโฟไซต (T Lymphocytes) • เซลลเพชฌฆาต (Natural Killer Cells) • นิวโทรฟล (Neutrophils) • บาโซฟล (Basophils) • อีโอสิโนฟล (Eosinophils) • โมโนไซต (Monocytes) • มาโครฟาจ (Macrophages) • เกล็ดเลือด (Platelets) - 19 -
21.
1.2) เซลลจากไขกระดูกในชั้นสตอรมาล (Bone
Marrow Stromal Cells) หรือเซลลตนตอ ชนิดมีเซ็นไคมอล (Mesenchymal Stem Cells) สามารถเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลชนิด ตางๆไดแก • เซลลกระดูกหรือออสติโอไซต (Osteocytes) • เซลลกระดูกออนหรือคอนโดรไซต (Chondrocytes) • เซลลไขมันหรือเซลลอะดิโปไซต (Adipocytes) • เซลลเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (Connective Tissue Cells) ชนิดตางๆ เชน เซลลที่อยู ที่เสนเอ็น (Tendons) 1.3) เซลลตนตอประสาท (Neural Stem Cells) ในสมองสามารถเปลี่ยนไปเปนเซลลชนิด จําเพาะไดสามชนิดไดแก • เซลลประสาทหรือนิวรอน (Neurons) • เซลลชนิด Non-Neuronal อีกสองชนิด ซึ่งไดแก แอสโทรไซต (Astrocytes) และโอลิโกเดนโดรไซต (Oligodendrocytes) 1.4) เซลลตนตอชั้นอีพิทีเลียล (Epithelial Stem Cells) ซึ่งอยูในโครงสรางเยื้อบุชั้นในของ ระบบทางเดินอาหาร สามารถเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลชนิดจําเพาะไดหลายชนิดเชน • เซลลดูดซึม (Absorptive Cells) • เซลลกอบเลท (Goblet Cells) • พาเนทเซลล (Paneth Cells) • เซลลชนิดเอ็นเตอโรเอ็นโดครีน (Enteroendocrine Cells) 1.5) เซลลตนตอจากผิวหนังในชั้นอีพิเดอมิส (Epidermis) และที่ชั้นลางสุดของรูขุมขน (Hair Follicles) เซลลตนตอจากผิวหนังในชั้นอีพิเดอมิสสามารถเปลี่ยนแปลงไปเปนเคราติ- โนไซต (Keratinocytes) ซึ่งจะยายไปอยูที่ผิวชั้นบนสุดของผิวหนังเพื่อทําหนาที่เปนชั้น ปกปอง สวนเซลลตนตอจากรูขุมขนจะสามารถเปลี่ยนแปลงไปเปนรูขุมขนและอีพิเดอมิส 2) การเปลี่ยนแปลงของเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มที่แลวจากเนื้อเยื่อชนิดหนึ่งไปเปนเซลล ชนิดจําเพาะของเนื้อเยื่อชนิดอื่น (Plasticity and Transdifferentiation) เซลลตนตอจากเซลลที่เจริญ วัยเต็มที่แลวบางชนิดเปนพลูริโพเทนท (Pluripotent) นั่นคือมีคุณสมบัติในการเปลี่ยนไปเปนเซลล จํ า เพาะชนิ ด อื่ น ๆได ห ลายชนิ ด ซึ่ ง เรี ย กคุ ณ สมบั ติ เ ช น นี้ ว า พลาสติ ซิ ตี้ (Plasticity) หรื อ ทรานสดิฟเฟอเรนทิเอชัน (Transdifferentiation) (ดังแสดงในรูปที่ 6) - 20 -
22.
รูปที่ 6 การเปลี่ยนแปลงของเซลลตนตอจากเซลลที่เจริญวัยเต็มทีแลวจากเนื้อเยื่อชนิดหนึ่งไปเปนเซลล
่ ชนิดจําเพาะของเนื้อเยื่อชนิดอื่น (Plasticity and Transdifferentiation) (ที่มา: NIH: Stem Cell Basics, 2008) ตัวอยางจากงานวิจัยที่ผานมาเชน 2.1) เซลลตนตอเม็ดโลหิต (Hematopoietic Stem Cells) เปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลประสาท ไดทั้งสามชนิด (นิวรอน แอสโทรไซต และโอลิโกเดนโดรไซต) หรือเปลี่ยนแปลงไปเปน เซลลกลามเนื้อโครงราง เซลลกลามเนื้อหัวใจ หรือเซลลตับ 2.2) เซลลจากไขกระดูกในชั้นสตอรมาล (Bone Marrow Stromal Cells) สามารถเปลี่ยน แปลงไปเปนเซลลกลามเนื้อหัวใจ หรือเซลลกลามเนื้อโครงราง 2.3) เซลลตนตอจากสมองสามารถเปลี่ยนแปลงไปเปนเซลลเม็ดเลือด หรือเซลลกลามเนื้อ โครงราง - 21 -
Jetzt herunterladen