1. CROMATOGRAFÍACROMATOGRAFÍA

2. •En 1850 el químico alemán
F.F.Runge, que trabajaba con
tintas, descubre que los
cationes orgánicos se podían
separar por migración
cuando se colocaba una
solución que los contenía
sobre un material poroso,
como papel .
•En 1906 el botánico ruso M.
Tsvet utilizó la cromatografía
de columna para separar
extractos vegetales
coloreados.

3. •A partir de 1940 los métodos
cromatográficos adquieren extensión
mundial.
•En 1940 Tiselius divide los métodos
cromatográficos en cromatografía por
análisis frontal, desarrollo por elusión y
desarrollo por desplazamiento, obtuvo
el premio Nóbel por sus trabajos en
1948.
•Para el mismo tiempo la
cromatografía comienza a aplicarse
en el campo de la bioquímica.

4. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención
selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una
mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de
dichos componentes.
Fase MóvilFase Móvil
Fase
Estacionaria
Fase
Estacionaria
Consiste en un liquido o gas que es
arrastrado a través de la fase
estacionaria
Consiste en un liquido o gas que es
arrastrado a través de la fase
estacionaria
Consiste en un solido o un liquido
anclado a un soporte solido por
donde el cual pasa la fase móvil
Consiste en un solido o un liquido
anclado a un soporte solido por
donde el cual pasa la fase móvil

6. En Papel:
•La fase estacionaria se
representa por un papel
filtro y la móvil por un
disolvente.
•Análisis cualitativos.
En Capa Fina:
•Una fase móvil (normalmente un
disolvente) y una fase estacionaria
(la llamada capa fina que puede
ser papel o gel de sílice).
•Separar componentes puros.
• Se analizan mezclas de
aminoacidos.

8. Intercambio Iónico:
•En este tipo de
cromatografía la fase
estacionaria tiene grupos
cargados que
interaccionan
electroestáticamente
con iones de signo
contrario de la fase móvil.
Intercambio Iónico:
•En este tipo de
cromatografía la fase
estacionaria tiene grupos
cargados que
interaccionan
electroestáticamente
con iones de signo
contrario de la fase móvil.

9. Por Exclusión Molecular:
•Es un método por el cual las
moléculas se separan en solución
según su peso molecular.
•Separa proteínas según su
tamaño
•La fase solida consiste en
pequeñas perlas que contienen
unos poros o cavidades de
tamaño calibrado.
•La proteínas de mayor tamaño
no pueden entrar en las
cavidades .
•Las proteínas mas pequeñas
penetran en las cavidades.
Por Exclusión Molecular:
•Es un método por el cual las
moléculas se separan en solución
según su peso molecular.
•Separa proteínas según su
tamaño
•La fase solida consiste en
pequeñas perlas que contienen
unos poros o cavidades de
tamaño calibrado.
•La proteínas de mayor tamaño
no pueden entrar en las
cavidades .
•Las proteínas mas pequeñas
penetran en las cavidades.

10. Por Afinidad:
Este método permite la
separación de las
mezclas proteicas por
su afinidad o
capacidad de unión a
un determinado
ligando
Por Afinidad:
Este método permite la
separación de las
mezclas proteicas por
su afinidad o
capacidad de unión a
un determinado
ligando

12. Cromatografía de Participación:
Es una de las técnicas que mas
se emplea en HPLC.
La fase estacionaria es un
segundo liquido inmiscible con
la fase móvil liquida. Este liquido
se une a la superficie de un
empaque solido finamente
dividido mediante adsorción o
enlaces químicos.
Cromatografía de Participación:
Es una de las técnicas que mas
se emplea en HPLC.
La fase estacionaria es un
segundo liquido inmiscible con
la fase móvil liquida. Este liquido
se une a la superficie de un
empaque solido finamente
dividido mediante adsorción o
enlaces químicos.

13. Se clasifica en dos tipos :Se clasifica en dos tipos :
1. Cromatografía de partición de
fase normal: se emplean fases
estacionarias muy polares
trietilenglicol o agua; la fase
móvil es un disolvente no polar
como el hexano o éter
ipropílico. En la fase normal
sale primero el componente
menos polar; en el incremento
en la polaridad de la fase móvil
disminuye, por tanto, el tiempo
de elución.
2. Cromatografía de partición de
fase reversible: utiliza una fase
estacionaria no polar que por
lo general es un hidrocarburo.
La fase móvil es un disolvente
polar como agua, metanol o
acetonitrilo. En la fase reversa
sale primero el componente
mas polar; el tiempo de elución
aumenta a medida que
aumenta la polaridad de la
fase móvil.

14. Gracias
por su
Atenció
n