1. Les moyens d’étude de la
croissance microbienne
2011/2012

2. PLANT DE TRAVAIL
INTRODUCTION
I-LA CROISSANCE MICROBIENNE
II- LES MOYENS D’ETUDE DE LA CROISSANCE
II-1 LES METHODES DIRECTES
II-1 MESURE DE NOMBRE DE CELLULES
1-Comptage total
2-Comptage des cellules viables cultivables
II-2/LES METHODES INDIRECTS
a-Mesure de la biomasse
1/ mesure de poids sec
2/ mesure de trouble
b-Mesure de l’activité cellulaire
III/ LA CINITIQUE DE LA CROISSANCE MICROBIENNE
1/Expression graphique
2/Expression mathématique
3/Rendement

3. INTRODUCTION
La croissance est un phénomène de grande intérêt
biologique , dont l’importance écologique et pratique
est considérable .
C'est Jacques MONOD, lauréat en 1965 du Prix
Nobel de médecine (avec André LWOFF et François
JACOB) qui le premier a étudié la croissance .
Dont notre exposé, on propose un problématique ;
est ce que les techniques d’étude de la croissance
sont nombreuses et montre qu'aucune n'est
parfaite ?

4. I- LA CROISSANCE MICROBIENNE
DEFINITION :
Accroissement ordonné de tous les
composants d’un organisme
Au niveau cellulaire, la conséquence est la
division de la cellule
On observe donc chez les organismes
Pluricellulaires : une augmentation de la
taille de l’individu
Unicellulaire : une augmentation de la
population
Chez les micro-organismes, croissance est
synonyme de multiplication

5. FACTEURS ESSENTIELS À LA CROISSANCE
Se divisent en deux catégories:
Physiques
- eau
- température
- pH
- pression osmotique
-lumière
Chimiques:
-
carbone, azote, soufre et
phosphore
- oligo-éléments
- oxygène

6. FACTEURS ORGANIQUES DE CROISSANCE
Composés organiques dont un
microorganisme a besoin mais qu’il
ne peut synthétiser lui-même.
Ex :
vitamines (coenzymes)
 acides aminés
Les purines et les pyrimidines à
cèle des acides nucléique

7. II- LES MOYENS D’ETUDE DE LA CROISSANCE
MICROBIENNE
II-1 Les méthodes directes
II-1-1Mesure de nombre des cellules
1-Comptage total
A- Lecture au microscope
Cellule de numération hématimétrie
(Cellule de Thoma, Cellule de Malassez
Cellule de Pétroff- Hauser)

8. B-Compteur de particules
*Fluidique
- Cellules en suspension
-Flux sur une file à travers
*Optique
- Un volume illuminé où elles
- Diffusent la lumière et fluorescent
*Electronique
-Signaux collectés, filtrés et Convertis
en valeurs numériques
-Stockées dans un ordinateur

9. COULTER

10. C- EPIFLUORESSENCE
Les cellules microbiennes sont colorées
par un fluorochrome de type Acridine
orangé.
-Cellules vivantes qui sont fluorescentes
dans le vert(ADN double brin).
-Cellules mortes dont la fluorescence
rouge résulte de la combinaison du
fluorochrome avec l'ADN dénaturé.

11. 2-COMPTAGE DES CELLULES VIABLES CULTIVABLES
Dénombrement après culture

12. II-2/LES METHODES INDIRECTS
A-MESURE DE LA BIOMASSE
1/ MESURE DE POIDS SEC
Microorganisme récolté par centrifugation ou par filtration
sur membrane
Lavage soigneux à l’aide d’un tampon approprié
Culot desséché à 10°C-110°C
Poids sec (gr de matière sèche par litre )

13. 2/ MESURE DE TROUBLE
l’absorption de la lumière traversant une
suspension microbienne obéit à la loi de
Beer Lambert :
A= log (I°)
I

14. B-MESURE DE L’ACTIVITÉ CELLULAIRE
On peut mesure soit :
1- La consommation de substrat
2- Mesure des produits d’excrétion
3-Mesure des variations physico-chimiques
du milieu

15. III/ LA CINITIQUE DE LA CROISSANCE
MICROBIENNE
III-1 Expression mathématique
peut être définie par deux constantes :
Temps de génération :
C’est l’intervalle de temps entre deux divisions
successives ou celui nécessaire au et doublement de la
population.: 1---2 ---- 4----8, etc
G = t/n
Taux de croissance :
le nombre de divisions par unité de temps :
µ = 1/G = n/t.

16. Une population avec la formule suivante :
N = N0 x 2 t /G
N nombre de bactéries
N0 nombre de bactéries au départ
t temps de culture
G temps de génération

17. 2/Expression graphique :
Courbe de croissance
Différentes phases
1-Latence µ = 0
2-Accélération µ augmente, N augmente, et G diminue
3-Phase exponentielle µ = µmax = cste ,G constant et
minimal, N augmente
4-Ralentissement µ diminue ,N augmente, et G
augmente.
5-Stationnement µ = 0, N est constante et maximale
6-Déclin mortalité μ est négatif , N diminue,.

18. Figure : Courbe de croissance .

19. 3/RENDEMENT
R= la masse cellulaire formée
la masse d’aliments consommés

20. CONCLUSION
On fin de notre petite recherche , on concluent qu’il existe
différentes méthodes de mesure de la croissance microbienne.
On utilise des méthodes directes et indirectes de quantification
des bactéries ou des levures : en fonction du temps, on suit
l’évolution du nombre de micro-organisme par unité de volume du
milieu.
Les conditions expérimentales de mesure de la croissance
nécessitent:
 Une population homogène.
 Des paramètres physico-chimiques optimum..
 Une certaines quantité de nutriments.