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转基因的蓝色
水母基因荧光小猪   普通小猪
第三节
基因工程与转基因生物
一 基因工程
1 )基因工程的概念

2 )基因操作的工具

3) 基因工程的基本过程
• 什么叫基因工程?
       基因工程是指依据先设计的蓝图,
      用人工方法将某种生物的基因,接
     合到另一种生物的基因组 DNA 中并
      使其表达,使后者获得新的遗传性
      状,产生出人类所需要的产物,或
      创造出新的生物类型的现代生物技
 。
术。
基因操作的工具
• 化学剪刀 — — 限制性内切酶(简称限制酶
  )  限制酶是在生物体 ( 主要是 微生
 物 ) 内的一种酶,能将外来的 DNA 切断
 ,由于这种切割作用是在 DNA 分子内部
 进行的,故名限制性内切酶。
     特点:专一性。
      即 一种 限制酶 只能识别一种 特定
 的 核苷酸序列 ,并且能在 特定的切点 上
 切割 DNA 分子。
基因操作的工具
• 化学剪刀 — — 限制性内切酶(简称限制酶
  )  大肠杆菌 (E.coR I) 的一种限制酶
能识别 GAATTC 序列 ,并在 G 和 A 之间
切开。 限制
     酶
基因操作的工具
• 化学剪刀 — — 限制性内切酶(简称限制酶
  )   限制
      酶
基因操作的工具
• 什么叫黏性末端?
     被限制酶切开的 DNA 两条单链
的切口,带有几个 伸出的核苷酸 ,他们
之间正好 互补配对 ,这样的切口叫 黏性
末端 。
基因操作的工具
• 化学浆糊 — — DNA 连接酶




     DNA 连接酶 可把黏性末端 之间的
  缝隙 “ 缝合 ” 起来,即把梯子两边扶手
  的断口连接起来,这样一个重组的
  DNA 分子就形成了。
基因操作的工具

• 分子运输车 — — 运载体:

  常用的运载体主要有两类:
   1 )细菌细胞质的 质粒
   2 ) 噬菌体 或某些 动植物病毒
基因操作的工具
• 质粒:
     质粒是除染色体外能够进行 自
 主复制 的遗传单位,包括真核生物的
 细胞器和细菌细胞中核区外的 DNA 分
 子。现在习惯上用来专指细菌、酵母
 菌和放线菌等生物中 核以外的 DNA 分
 子。
        质粒 是基因工程 最常用 的 运载
 体。
     绝大多数细菌质粒都是 闭合环
 状双链 DNA 分子 。有的一个细菌中有
基因操作的工具
• 大肠杆菌的质粒:

                  最常用的质
             粒 是 大肠杆菌的质
             粒 ,其中常含有 抗
             药基因 ,如四环素
             的标记基因。质粒
             的 存在与否对宿主
             细胞生存没有决定
             性作用 ,但 复制只
             能在宿主细胞内完
             成。
二 . 基因工程的基本
 1. 基本步骤 过程

   切    接     转




                  增


              检
基因工程的基本过程
• 步骤一 : 获取目的基因


   目的基因就是人们为了得到其表达
产物而把它转入到新的生物体中去的基因
。
     例如:人的生长激素基因。
基因工程的基本过程

• 目的基因的提取方法
 直接分离基
 因


 人工合成基
 因
基因工程的基本过程
• 步骤二:目的基因与运载体重组
基因工程的基本过程
• 步骤二:目的基因与运载体重
  组 1 )用一定的 限制酶切割质粒 ,使其
  出现 一个切口 ,露出 黏性末端 。
    2 )用 同一种 限制酶 切断目的基因 ,
  使其产生 相同 的 黏性末端 。
    3 )将切下的目的基因片段 插入质粒
  的切口处,再加入适量 DNA 连接酶 ,
  形成了一个 重组 DNA 分子 (重组质粒
  )
        目的基因与运载体的结合过程
  ,实际上是不同来源的 基因重组的过
基因工程的基本过程
• 步骤三:重组 DNA 分子导入受体细胞

• 常用的受体细胞
  :
     有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农
  杆菌、酵母菌和动植物细胞等。

• 将目的基因导入受体细胞的原理

   借鉴 细菌或病毒侵染细胞 的途
   径。
基因工程的基本过程
• 步骤四:筛选含目的基因的受体细胞


 氨苄青霉            四环素
素抗性基因           抗性基因
基因工程的基本过程
• 受体细胞摄入 DNA 分子后就说明目的基
  因完成了表达吗?


   不能,受体细胞必须表现出特定
的性状,才能说明目的基因完成了 表达
。
二 . 基因工程的基本
 1. 基本步骤 过程

   切    接     转




                  增


              检
练习
1 )以下说法正确的是       C
(    )
 A 、所有的限制酶只能识别一种特定的
核苷酸序列
B 、质粒是基因工程中唯一的运载体
 C 、运载体必须具备的条件之一是:具
有多个限制酶切点,以便与外源基因连接
    D 、基因控制的性状都能在后代表现出
来
练习
2 )不属于质粒被选为基因运载体的理由
是
                D
A 、能复制
   (   )
B 、有多个限制酶切点
C 、具有标记基因
D 、它是环状 DNA
练习
3 )有关基因工程的叙述中,错误的是(
                  A
  )
 A 、 DNA 连接酶将黏性末端的碱基对连
接起来
B 、 限制性内切酶用于目的基因的获得
C 、目的基因须由运载体导入受体细胞
  D 、 人工合成目的基因不用限制性内切
酶
练习
4 )有关基因工程的叙述正确的是 D(
   )
A 、限制酶只在获得目的基因时才用


B 、重组质粒的形成在细胞内完成
C 、质粒都可作为运载体
  D 、蛋白质的结构可为合成目的基因
提供资料
练习
5 )基因工程是在 DNA 分子水平上进行
设计施工的。在基因操作的基本步骤中
,不进行碱基互补配对的步骤是      C
      (   )
A 、人工合成目的基因
B 、目的基因与运载体结合
C 、将目的基因导入受体细胞


D 、目的基因的检测和表达

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