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AUTODUPLICACION DEL
         ADN (1)


http://www.johnkyrk.com/index.esp.html
http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Replicacion/Replicacion.htm#Okazaki
La herencia. Genética molecular


• La replicación del ADN.
Observaciones


• Comentar que de todos los modelos propuestos para explicar la
  replicación   del     ADN     (dispersivo,   conservativo    y
  semiconservativo), el experimento de Meselson y Stahl demostró
  que el ADN se replica según el modelo semiconservativo.


•    Explicar de forma muy simplificada el mecanismo general de la
    replicación. Mencionar brevemente las encimas implicadas: ADN
    polimerasas (no es necesario que se aprendan los distintos tipos
    de ADN polimerasas), helicasas, topoisomerasas, ligasas.
    Referirse brevemente a los fragmentos de Okazaki.
Semiconservativo   Conservativo   Dispersivo
Modelo Conservativo

• Proponía que el ADN de doble hélice, servía de
  molde para una nueva y completa molécula de
  DNA.
Modelo Dispersivo
• Los segmentos de cada una de las hebras se
  conservan produciendo moléculas de doble
  hebra con fragmentos viejos (del molde) y
  fragmentos nuevos.
Modelo Semiconservativo
• Cada una de las hebras sirve de molde para la
  nueva molécula, resultando dos moléculas
  idénticas entre sí mismas e idénticas a la
  molécula parental.
Teoría semiconservativa




http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_meselson_stahl.swf
Muchos orígenes de replicación en Drosophylla melanogaster
Esquema con múltiples orígenes de replicación
Hebra                                       Hebra
 hija                                        molde




                Extremo 3’



pirofosfato


Enlace de un nuevo desoxiribonucleósido
trifosfato




                                          Extremo 5’
DNA Replication
EL ADN es la molécula que permite perpetuar la vida:
               EL ADN es la molécula que permite perpetuar la vida:
                            REPLICACIÓN DEL ADN
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          Hebra molde
           Hebra molde




Hebra líder
 Hebra líder




Hebra retardada
 Hebra retardada
Proteínas principales en la replicación
               del ADN
•   Topoisomerasas
•   Helicasas
•   Girasas
•   SSB (single strand DNA-binding protein)
•   Primasas
•   ADN polimerasas
•   Ligasas
Desenrollamiento y apertura de la doble hélice de ADN


                 Ori C                                  Evitan las tensiones debidas a un superenrrollamiento
                                                                              Girasa
                                                            Topoisomerasa
                         Proteínas
                         específicas




                                                                                     Proteínas SSB

                                                                                          Impiden que el ADN
                                                                                           se vuelva a enrollar



                                              Helicasa
Las proteínas
específicas se
unen al punto                           La helicasa rompe los
 de iniciación                                                                               Burbuja
                                        enlaces de hidrógeno
                                                                                                de
                                       entre las bases y abre la
                                                                                           replicación
                                              doble hélice
Topoisomerasas




           Superenrrolamiento en ADN doble hélice circular
http://www2.uah.es/biomolq/BM/Esquemas/Animaciones/supernrollamto%20y%20topoisomerasas%20lhngr.mov
http://www2.uah.es/biomolq/BM/Esquemas/Tema2.htm
La ADN polimerasa sintetiza una cadena en el sentido 5’→ 3’
     uniendo cada nuevo nucleótido en el extremo 3’.




                                                                     3’

                                                                     5’
               5’                                               Una de las hebras se
                                                                sintetiza de modo contínuo.
                                  3’                            Es la conductora o lider.
                                  5’
               3’                      3’
                                                        3’
                                            5’                        3’
La ADN polimerasa necesita un
fragmento de ARN (cebador o
primer) con el extremo 3’ libre                                      5’
para iniciar la síntesis.

                                                 La otra hebra se sintetiza de modo
                                                 discontinuo formándose fragmentos que
                                                 se unirán más tarde. Es la retardada.
Reiji Okazaki / Tsuneko Okazaki(1968)

• Descubrieron unos polinucleótidos de entre
  1000 y 2000 nucleótidos en células procariotas y
  en eucariotas son entre 100 y 200 nucleótidos.
Replicación de DNA
Reiji Okazaki (1968)




              Figura: representación de la duplicación



http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/duplicacion%20dna3.html
Horquilla de replicación ADN

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http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_dna_replication_fork.swf




http://biomodel.uah.es/biomodel-misc/anim/replic/replic7.html
Replicación
• Las ADN polimerasas requieren como sustrato
  el extremo 3’ hidroxilo libre de una base
  apareada para catalizar la unión de otro
  nucleótido.

• Se requiere de primers o iniciadores que en la
  mayoría de los casos son de ARN, y son
  sintetizados por primasas.
Esquema Círculo rodante
Esquema Método Theta




http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_bidirectionl_replicatn.swf
Autorradiografía de la 2ª generación de Replicación.
Replicación       círculo rodante
                (plásmidos en Gram +,
                algunos virus y conjugación)

orígen de replicación bidireccional
(cromosoma y plásmidos en Gram -)




  Figure 6.16
ADN reparadora
•   En procariotas la enzima ADN polimerasa incorpora 1000 bases/minuto
    (se autoduplica entre 20 y 40 minutos).

•   La enzima ADN polimerasa, en eucariotas, incorpora 50 bases/minuto, por
    eso necesita muchos puntos de iniciación.

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Autoduplicación del adn 2012

  • 1. AUTODUPLICACION DEL ADN (1) http://www.johnkyrk.com/index.esp.html http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Replicacion/Replicacion.htm#Okazaki
  • 2. La herencia. Genética molecular • La replicación del ADN.
  • 3. Observaciones • Comentar que de todos los modelos propuestos para explicar la replicación del ADN (dispersivo, conservativo y semiconservativo), el experimento de Meselson y Stahl demostró que el ADN se replica según el modelo semiconservativo. • Explicar de forma muy simplificada el mecanismo general de la replicación. Mencionar brevemente las encimas implicadas: ADN polimerasas (no es necesario que se aprendan los distintos tipos de ADN polimerasas), helicasas, topoisomerasas, ligasas. Referirse brevemente a los fragmentos de Okazaki.
  • 4. Semiconservativo Conservativo Dispersivo
  • 5. Modelo Conservativo • Proponía que el ADN de doble hélice, servía de molde para una nueva y completa molécula de DNA.
  • 6. Modelo Dispersivo • Los segmentos de cada una de las hebras se conservan produciendo moléculas de doble hebra con fragmentos viejos (del molde) y fragmentos nuevos.
  • 7. Modelo Semiconservativo • Cada una de las hebras sirve de molde para la nueva molécula, resultando dos moléculas idénticas entre sí mismas e idénticas a la molécula parental.
  • 8.
  • 9.
  • 11. Muchos orígenes de replicación en Drosophylla melanogaster
  • 12. Esquema con múltiples orígenes de replicación
  • 13. Hebra Hebra hija molde Extremo 3’ pirofosfato Enlace de un nuevo desoxiribonucleósido trifosfato Extremo 5’
  • 15. EL ADN es la molécula que permite perpetuar la vida: EL ADN es la molécula que permite perpetuar la vida: REPLICACIÓN DEL ADN REPLICACIÓN DEL ADN Hebra molde Hebra molde Hebra líder Hebra líder Hebra retardada Hebra retardada
  • 16. Proteínas principales en la replicación del ADN • Topoisomerasas • Helicasas • Girasas • SSB (single strand DNA-binding protein) • Primasas • ADN polimerasas • Ligasas
  • 17. Desenrollamiento y apertura de la doble hélice de ADN Ori C Evitan las tensiones debidas a un superenrrollamiento Girasa Topoisomerasa Proteínas específicas Proteínas SSB Impiden que el ADN se vuelva a enrollar Helicasa Las proteínas específicas se unen al punto La helicasa rompe los de iniciación Burbuja enlaces de hidrógeno de entre las bases y abre la replicación doble hélice
  • 18. Topoisomerasas Superenrrolamiento en ADN doble hélice circular
  • 20. La ADN polimerasa sintetiza una cadena en el sentido 5’→ 3’ uniendo cada nuevo nucleótido en el extremo 3’. 3’ 5’ 5’ Una de las hebras se sintetiza de modo contínuo. 3’ Es la conductora o lider. 5’ 3’ 3’ 3’ 5’ 3’ La ADN polimerasa necesita un fragmento de ARN (cebador o primer) con el extremo 3’ libre 5’ para iniciar la síntesis. La otra hebra se sintetiza de modo discontinuo formándose fragmentos que se unirán más tarde. Es la retardada.
  • 21. Reiji Okazaki / Tsuneko Okazaki(1968) • Descubrieron unos polinucleótidos de entre 1000 y 2000 nucleótidos en células procariotas y en eucariotas son entre 100 y 200 nucleótidos.
  • 23.
  • 24.
  • 25. Reiji Okazaki (1968) Figura: representación de la duplicación http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/duplicacion%20dna3.html
  • 26. Horquilla de replicación ADN http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_dna_replication.swf http://www.mhhe.com/sem/Spanish_Animations/sp_dna_replication_fork.swf http://biomodel.uah.es/biomodel-misc/anim/replic/replic7.html
  • 27. Replicación • Las ADN polimerasas requieren como sustrato el extremo 3’ hidroxilo libre de una base apareada para catalizar la unión de otro nucleótido. • Se requiere de primers o iniciadores que en la mayoría de los casos son de ARN, y son sintetizados por primasas.
  • 28.
  • 31. Autorradiografía de la 2ª generación de Replicación.
  • 32. Replicación círculo rodante (plásmidos en Gram +, algunos virus y conjugación) orígen de replicación bidireccional (cromosoma y plásmidos en Gram -) Figure 6.16
  • 34. En procariotas la enzima ADN polimerasa incorpora 1000 bases/minuto (se autoduplica entre 20 y 40 minutos). • La enzima ADN polimerasa, en eucariotas, incorpora 50 bases/minuto, por eso necesita muchos puntos de iniciación.