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CONTROLE DE POPULAÇÕES
MICROBIANAS
Dessecação e Salga
Egípcios: Embalsamento
Persas: Recipientes de prata e cobre
para água
Ignaz Phillip Semmelweis (1818-1865)
Joseph Lister: Técnicas anti-séptica em
operações cirúrgicas (uso de fenol para reduzir
incidência de infecção)
Controle de Populações Microbianas: ????
Alguns princípios importantes
O agente deve afetar diretamente o microrganismo;

O efeito normalmente não é instantâneo (tempo de
exposição);
Levar em conta o número e natureza dos
microrganismos presentes no material.
Controle da
população
microbiana
Destruir, inibir ou
remover
microrganismos

Agentes físicos

Agentes químicos

Microrganismos em números aceitáveis ou
ausência
dos mesmos
Escolha de um método ??
Material
Objetivos
Algumas Definições
Esterilização: Destruição de toda e qualquer
forma de vida (formas vegetativas, esporos,
fungos, vírus, etc) de um material
Desinfecção: Destruição de microrganismos
patogênicos presentes num material inanimado
(Desinfetantes)
Anti-sepsia: Destruição de microrganismos
patogênicos num tecido vivo (Antissépticos)
(Caracteristicas ??)
Assepsia: Conjunto de medidas para prevenir a
entrada de microrganismos num material (vivo
ou não) ou reduzir o número dos já presentes
(Profilaxia)
AGENTES FÍSICOS
Calor (Seco e Úmido)
-Ponto de Morte Térmica (PMT): Menor temperatura em
que todos os microrganismos em uma suspensão líquida
serão mortos por calor em 10 minutos

-Tempo de Morte Térmica (TMT): Período mínimo de
tempo em que todos os microrganismos serão mortos
-Tempo de Redução Decimal (TRD ou D): Tempo
(minutos) em que 90 % de uma população microbiana
em uma determinada temperatura será morta
103
102

D = 5 min

101

D é o tempo, em minutos, em uma determinada temperatura, capaz de
causar uma redução em 90% no número de células ou esporos
presentes numa suspensão, ou, número de minutos necessários para a
curva de sobreviventes atravessar 1 ciclo log.
Calor Seco: Oxidação do Protoplasma
Flambagem (Bico de Bunsen)
Fornos (Forno Pasteur)

Incineração
Bico de Bunsen
Forno Pasteur
Incineração
Calor Úmido Desnaturação de Proteínas
Dissolve lipídeos

Maior poder de penetração  Mais eficiente
Fervura: (100C/15 min.)
(Não destroe Esporos e alguns Vírus
(Hepatite A).
Autoclavação: Vapor
d’água sob pressão
(121C/15’)
(Autoclave) Uso
para esterilização de
materiais
(Meios de cultura,
instrumento
cirúrgicos, vidrarias,
etc).
Pasteurização:
Eliminar microrganismos patogênicos de
substâncias que não suportam temperaturas
elevadas.

Tipos  Lenta (62,8C/30 min) 5C.
Rápida (71,7C/15 seg.)  5C
(Reduz contagem entre 97 e 99%)
UHT – Ultra High Temperature
ESQUEMA DE PASTEURIZAÇÃO DO LEITE
(1)-Leite Crú; (2)-Bomba; (3)-Água Fria; (4)-Água Quente; (5)-Homogeneizador; (6)Serpentina de Controle; (7)-Água Superaquecida; (8)-Vapor de Aquecimento; (9)-Leite

Pasteurizado
Pasteurização: O leite é aquecido a 65ºC e depois
resfriado a 0ºC em banho-maria, para eliminar os
microorganismos
Tindalização (= Esterilização fracionada)
(Uso para meios nutritivos)
70 a 100C/30 min.  Incubação
100oC/30 min – 1º dia
Incubar 37oC/24 h

100oC/30 min – 2º dia
Incubar 37oC/24 h

100oC/30 min – 3º dia
Baixas Temperaturas (-70 a –196oC) ????
Nitrogênio líquido
-196o C

Preserva

Freezer
-70o C
Filtração: Separa microrganismos de materiais
fluídos (Remoção mecânica).
Eficiência - Depende da malha do filtro
( 1 m)

Ex. : Tampão de algodão até tipos especiais
(Berkefeld , Seitz , Ésteres de celulose, etc.)
Câmara de Fluxo Laminar (Filtração e Ultra Violeta)
Radiações Não Ionizantes (Ultra-Violeta)
Ionizantes (Beta, Gama, Raio X)
UV   = 210 a 328 nm (240 a 280 nm)
(Absorvida pelo DNA e proteínas)
Efeitos Diretos  Mutação,
Formação de Dímeros de
Timina e Inibição de Enzimas;
Efeitos Indiretos  Formação de O3 no ar e
H2O2 na água.
Baixo Poder de Penetração  Usos ???
Radiações Ionizantes (X,  e Gama)
(Elevado poder de penetração Alimentos
embalados)
Ioniza macromoléculas  Altera composição
química da célula
Aparelhagem dispendiosa
(Uso para substâncias e materiais sensíveis
ao calor)
Na fonte de cobalto tipo panorâmica, os materiais, já em
sua embalagem final, são submetidos à radiação gama
Vibrações Sônicas:  200.000 Hz
Mecanismo: Gases em solução na célula 
Microbolhas  Choques com a parede 
Lise da célula bacteriana (Cavitação)
Microondas
Pressão Osmótica

Dessecação
AGENTES QUÍMICOS
Antissépticos, Desinfetantes e Detergentes
Agem sobre estruturas da célula. Dificilmente
as bactérias tornam-se resistentes.

Drogas Antimicrobianas
Agem sobre rotas metabólicas e estruturas da
célula bacteriana. São os antibióticos e
quimioterápicos.
Mecanismos de Ação

Azitromicina
Claritromicina
Estreptograminas
(Quinopristina/
Dalfopristina)

Tigeciclina

Síntese de
lipídeos
Platensimicina

Streptomyces platensis
DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS
Álcoois: Etanol (Desinfetante e/ou Antisséptico),
Isopropílico (+ eficiente)

Soluções aquosas (50 a 70%) são mais eficientes.
Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR (Fungos,
Vírus) (Pouco ativo contra esporos)
Tempo de exposição: 10 a 15 min.
Fenóis e Derivados

Desinfetante: (5%) (Duplofen)

Antisséptico : Uso limitado (Hexaclorofeno)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR.
Tempo de exposição: Efeito é imediato.
Coeficiente fenólico
ALTERAÇÃO NA PERMEABILIDADE
DA MEMBRANA CELULAR
Detergentes (Surfactantes)
Não iônicos: Sem cargas (Só capacidade limpadora)
Aniônicos: Carga negativa ( Elevadas concentrações)
Catiônicos: Carga positiva (Quaternários de Amônio)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - )
Tempo de exposição: 10 a 30 min.
Produto com atividade
antimicrobiana e de
detergência. É formulado a
partir do princípio ativo

Cloreto de Alquil
Dimetil Benzil Amônio,
que lhe confere a ação
antimicrobiana e o Nonil
Fenol Etoxilado (Tensoativo
não iônico), que lhe confere
a ação de detergência.
INATIVAÇÃO DE ENZIMAS
Agem sobre grupamentos sulfidrilas livres (R-SH)
Oxidam Grupamentos Sulfidrilas:
R-SH

-2H
R-S-S-R

R-SH
H2O2 (Ação Antisséptica), Iodo (Antisséptico (PVPI),
Iodoforos, Cloro (Antisséptico - Clorohexidina),
Sanitizador (Hipoclorito), KMnO4 (Antisséptico (1:1000)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR
(Pouco ativos sobre esporos)
Tempo de exposição: Efeito imediato
O princípio ativo do PVPI
(polivinilpirrolidona-iodo) é o iodo
que com suas propriedades
germicidas amplamente
conhecidas, reduz a flora
bacteriana em curto espaço de
tempo
Substituem Grupamentos Sulfidrilas:
Cl

R-SH

R-S
+

Hg

R-SH

Hg + 2 HCl
R-S

Cl
Metais Pesados: Mertiolate, Mercúrio Cromo, Prata Prata coloidal, Nitrato de prata (AgNO3) (oftalmia
gonocócica) (1%), Argirol (Proteinato de prata)
Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - )
Tempo de exposição: Só agem enquanto em contato
AGENTES ALQUILANTES
Substituem átomos de hidrogênio em radicais

(R-NH2, OH, R-SH, R-COOH)

Formaldeído  Usado na forma gasosa (Fumegação)
Glutaraldeído  Solução Aquosa (Glutarex)
Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR e esporos.
Tempo de exposição: Curto sobre formas vegetativas
Prolongado sobre esporos

Óxido de Etileno  Gás Tóxico e Explosivo.
UM BOM DESINFETANTE.
Espectro de ação amplo,
Ação rápida e irreversível
Perda mínima de potência por ação do ambiente,

Estabilidade em sua composição química,
Não provocar danos ao homem e animais
durante aplicação,
Tolerado por materiais,
Fácil aplicação,
Econômico.
Lavar as mãos
ainda continua
sendo uma das
soluções para
os problemas
enfrentados
pela
Microbiologia
Clínica
MUITO OBRIGADO

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Aula controle de_populacoes_microbianas

  • 4. Persas: Recipientes de prata e cobre para água
  • 6. Joseph Lister: Técnicas anti-séptica em operações cirúrgicas (uso de fenol para reduzir incidência de infecção)
  • 7. Controle de Populações Microbianas: ???? Alguns princípios importantes O agente deve afetar diretamente o microrganismo; O efeito normalmente não é instantâneo (tempo de exposição); Levar em conta o número e natureza dos microrganismos presentes no material.
  • 8. Controle da população microbiana Destruir, inibir ou remover microrganismos Agentes físicos Agentes químicos Microrganismos em números aceitáveis ou ausência dos mesmos
  • 9. Escolha de um método ?? Material Objetivos
  • 10. Algumas Definições Esterilização: Destruição de toda e qualquer forma de vida (formas vegetativas, esporos, fungos, vírus, etc) de um material Desinfecção: Destruição de microrganismos patogênicos presentes num material inanimado (Desinfetantes)
  • 11. Anti-sepsia: Destruição de microrganismos patogênicos num tecido vivo (Antissépticos) (Caracteristicas ??) Assepsia: Conjunto de medidas para prevenir a entrada de microrganismos num material (vivo ou não) ou reduzir o número dos já presentes (Profilaxia)
  • 12. AGENTES FÍSICOS Calor (Seco e Úmido) -Ponto de Morte Térmica (PMT): Menor temperatura em que todos os microrganismos em uma suspensão líquida serão mortos por calor em 10 minutos -Tempo de Morte Térmica (TMT): Período mínimo de tempo em que todos os microrganismos serão mortos -Tempo de Redução Decimal (TRD ou D): Tempo (minutos) em que 90 % de uma população microbiana em uma determinada temperatura será morta
  • 13. 103 102 D = 5 min 101 D é o tempo, em minutos, em uma determinada temperatura, capaz de causar uma redução em 90% no número de células ou esporos presentes numa suspensão, ou, número de minutos necessários para a curva de sobreviventes atravessar 1 ciclo log.
  • 14. Calor Seco: Oxidação do Protoplasma Flambagem (Bico de Bunsen) Fornos (Forno Pasteur) Incineração
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  • 22. Calor Úmido Desnaturação de Proteínas Dissolve lipídeos Maior poder de penetração  Mais eficiente
  • 23. Fervura: (100C/15 min.) (Não destroe Esporos e alguns Vírus (Hepatite A).
  • 24. Autoclavação: Vapor d’água sob pressão (121C/15’) (Autoclave) Uso para esterilização de materiais (Meios de cultura, instrumento cirúrgicos, vidrarias, etc).
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  • 27. Pasteurização: Eliminar microrganismos patogênicos de substâncias que não suportam temperaturas elevadas. Tipos  Lenta (62,8C/30 min) 5C. Rápida (71,7C/15 seg.)  5C (Reduz contagem entre 97 e 99%) UHT – Ultra High Temperature
  • 28. ESQUEMA DE PASTEURIZAÇÃO DO LEITE (1)-Leite Crú; (2)-Bomba; (3)-Água Fria; (4)-Água Quente; (5)-Homogeneizador; (6)Serpentina de Controle; (7)-Água Superaquecida; (8)-Vapor de Aquecimento; (9)-Leite Pasteurizado
  • 29. Pasteurização: O leite é aquecido a 65ºC e depois resfriado a 0ºC em banho-maria, para eliminar os microorganismos
  • 30. Tindalização (= Esterilização fracionada) (Uso para meios nutritivos) 70 a 100C/30 min.  Incubação 100oC/30 min – 1º dia Incubar 37oC/24 h 100oC/30 min – 2º dia Incubar 37oC/24 h 100oC/30 min – 3º dia
  • 31. Baixas Temperaturas (-70 a –196oC) ???? Nitrogênio líquido -196o C Preserva Freezer -70o C
  • 32. Filtração: Separa microrganismos de materiais fluídos (Remoção mecânica). Eficiência - Depende da malha do filtro ( 1 m) Ex. : Tampão de algodão até tipos especiais (Berkefeld , Seitz , Ésteres de celulose, etc.)
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  • 35. Câmara de Fluxo Laminar (Filtração e Ultra Violeta)
  • 36. Radiações Não Ionizantes (Ultra-Violeta) Ionizantes (Beta, Gama, Raio X)
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  • 39. UV   = 210 a 328 nm (240 a 280 nm) (Absorvida pelo DNA e proteínas) Efeitos Diretos  Mutação, Formação de Dímeros de Timina e Inibição de Enzimas; Efeitos Indiretos  Formação de O3 no ar e H2O2 na água. Baixo Poder de Penetração  Usos ???
  • 40. Radiações Ionizantes (X,  e Gama) (Elevado poder de penetração Alimentos embalados) Ioniza macromoléculas  Altera composição química da célula Aparelhagem dispendiosa (Uso para substâncias e materiais sensíveis ao calor)
  • 41. Na fonte de cobalto tipo panorâmica, os materiais, já em sua embalagem final, são submetidos à radiação gama
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  • 46. Vibrações Sônicas:  200.000 Hz Mecanismo: Gases em solução na célula  Microbolhas  Choques com a parede  Lise da célula bacteriana (Cavitação)
  • 48. AGENTES QUÍMICOS Antissépticos, Desinfetantes e Detergentes Agem sobre estruturas da célula. Dificilmente as bactérias tornam-se resistentes. Drogas Antimicrobianas Agem sobre rotas metabólicas e estruturas da célula bacteriana. São os antibióticos e quimioterápicos.
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  • 52. DESNATURAÇÃO DE PROTEÍNAS Álcoois: Etanol (Desinfetante e/ou Antisséptico), Isopropílico (+ eficiente) Soluções aquosas (50 a 70%) são mais eficientes. Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR (Fungos, Vírus) (Pouco ativo contra esporos) Tempo de exposição: 10 a 15 min.
  • 53. Fenóis e Derivados Desinfetante: (5%) (Duplofen) Antisséptico : Uso limitado (Hexaclorofeno) Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR. Tempo de exposição: Efeito é imediato.
  • 55. ALTERAÇÃO NA PERMEABILIDADE DA MEMBRANA CELULAR Detergentes (Surfactantes) Não iônicos: Sem cargas (Só capacidade limpadora) Aniônicos: Carga negativa ( Elevadas concentrações) Catiônicos: Carga positiva (Quaternários de Amônio) Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ) Tempo de exposição: 10 a 30 min.
  • 56. Produto com atividade antimicrobiana e de detergência. É formulado a partir do princípio ativo Cloreto de Alquil Dimetil Benzil Amônio, que lhe confere a ação antimicrobiana e o Nonil Fenol Etoxilado (Tensoativo não iônico), que lhe confere a ação de detergência.
  • 57. INATIVAÇÃO DE ENZIMAS Agem sobre grupamentos sulfidrilas livres (R-SH) Oxidam Grupamentos Sulfidrilas: R-SH -2H R-S-S-R R-SH H2O2 (Ação Antisséptica), Iodo (Antisséptico (PVPI), Iodoforos, Cloro (Antisséptico - Clorohexidina), Sanitizador (Hipoclorito), KMnO4 (Antisséptico (1:1000) Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ), BAAR (Pouco ativos sobre esporos) Tempo de exposição: Efeito imediato
  • 58. O princípio ativo do PVPI (polivinilpirrolidona-iodo) é o iodo que com suas propriedades germicidas amplamente conhecidas, reduz a flora bacteriana em curto espaço de tempo
  • 59. Substituem Grupamentos Sulfidrilas: Cl R-SH R-S + Hg R-SH Hg + 2 HCl R-S Cl Metais Pesados: Mertiolate, Mercúrio Cromo, Prata Prata coloidal, Nitrato de prata (AgNO3) (oftalmia gonocócica) (1%), Argirol (Proteinato de prata) Espectro de Ação: Gram ( + ) e ( - ) Tempo de exposição: Só agem enquanto em contato
  • 60. AGENTES ALQUILANTES Substituem átomos de hidrogênio em radicais (R-NH2, OH, R-SH, R-COOH) Formaldeído  Usado na forma gasosa (Fumegação) Glutaraldeído  Solução Aquosa (Glutarex) Espectro de Ação: Gram (+) e (-), BAAR e esporos. Tempo de exposição: Curto sobre formas vegetativas Prolongado sobre esporos Óxido de Etileno  Gás Tóxico e Explosivo.
  • 61. UM BOM DESINFETANTE. Espectro de ação amplo, Ação rápida e irreversível Perda mínima de potência por ação do ambiente, Estabilidade em sua composição química, Não provocar danos ao homem e animais durante aplicação, Tolerado por materiais, Fácil aplicação, Econômico.
  • 62. Lavar as mãos ainda continua sendo uma das soluções para os problemas enfrentados pela Microbiologia Clínica