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Espectroscopía
UV -VISIBLE
Antecedentes
Los Métodos y/o Técnicas que emplean
instrumentos , analizan las muestras con el
proposito de conocer alguna característica
física o química del analito y esto permite
caracterizarlo, identificarlo o cuantificarlo.
A)Señal o Respuesta
B)Tiempo de respuesta
C)Resolución
(purificación)
El equipo genera :
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A)
Luz (Muestra) Fototubo (CORRIENTE)B)
Cuando el Analito es sometido a un estudio bajo un
instrumento, existen dos formas de generar una señal.
Estas son : A)
midiendo directamente la actividad del analito B)
con un estimulo y midendo su respuesta
Componentes básicos de un instrumento analítico
Generador
de señal
Generador
de señal
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De entrada
Transductor
De entrada
Transformador
de señales
Transformador
de señales
Transductor
De salida
Transductor
De salida
Señal
De Salida
Señal
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12.301 Unidad
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Fuente Mta
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ElectricidadLuz
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Componentes básicos de un instrumento analítico
Generador
de señal
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de señal
Transductor
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De entrada
Transformador
de señales
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Transductor
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1. Fuente luminosa
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1. Electrodo
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1. Amplificador
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4. Osciloscopio
5. Registrador
Ejemplos de Instrumentos Analíticos
Balanza pHmetro Microondas Refractómetro
Espectrofotómetro GC HPLC AA
IR HRMN Turbidimetro Fluorómetro
ESPECTROFOTOMETRO
Radiación electromagnética
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C= λ ν
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Frecuencia
Radiación electromagnética
C= λ ν E = h ν
λ = 450
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REFRACCIÓN
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monocromática
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Radiación
monocromática
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560 – 590
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Espectro visible
λ (nm)Color
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Rayos γ Rayos X Ultravioleta Visible Infrarojo Microondas
Longitud de onda (λ)
Fracción VIS del Espectro EM
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Celda
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Payala@campus.cob.itesm.mx
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Transmitancia A
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%TRANSMITANCIA
0 100
2 050
0.3
1
Absorbancia
Lámpara Celdademuestra
Selector
Io I
A= - log T
A= εcl
Ley de Beer
1)
2)
Absorbancia
A= Absorbancia
ε =coeficiente de extinción
C= concentración molar
l= longitud de celda (cm)
En función de la naturaleza y de
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A= εcl
Ley de Lambert- Beer
POR EJEMPLO.
¿Cuál es la A de una substancia al 2.5 X 10-5
M ,
con un ε = 7,500 M-1
cm-1
?. A= 0.18
Curva de calibración
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
a
Concentración
A
¿ABSORBANCIA?
Muestra Problema
Conc. Prob = (A Prob/A Patrón)(Conc. Patrón)
Problema Patrón
A Problema = 0.458 A
Patrón = 0.765 Conc.
Patrón= 145mg% Conc.
Problema= ?
Conc. Problema = (0.458/0.765)(145mg%)
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Espectro de Absorción
A
b
s
o
r
b
a
n
c
i
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Longitud de onda (nm)
λ
A
25 mM
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λ Max
Azul de metileno
A
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Longitud de onda (nm)λ
A
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En general un compuesto puede absorber en la región VIS si contiene al menos 5
grupos cromoforos conjugados y grupos auxocrómicos.
CONFIABILIDAD
Debe existir:
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