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Scientia Et Technica
Universidad Tecnológica de Pereira
scientia@utp.edu.co
ISSN (Versión impresa): 0122-1701
COLOMBIA




                                                           2007
                        Jaime Niño O. / Johana Ospina T. / Yaned M. Correa N. / Oscar M. Mosquera
                          DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DE EXTRACTOS
                       VEGETALES SOBRE EL HONGO MYCOSPHAERELLA FIJIENSIS MORELET
                                   Scientia Et Technica, abril, año/vol. XIII, número 033
                                            Universidad Tecnológica de Pereira
                                                     Pereira, Colombia
                                                       pp. 425-426




            Red de Revistas Científicas de América Latina y el Caribe, España y Portugal

                           Universidad Autónoma del Estado de México

                                      http://redalyc.uaemex.mx
Scientia et Technica Año XIII, No 33, Mayo de 2007. UTP. ISSN 0122-1701                                                         425

 DETERMINACION DE LA ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DE EXTRACTOS VEGETALES
              SOBRE EL HONGO Mycosphaerella fijiensis Morelet

 RESUMEN                                                                                       JAIME NIÑO O.
 Los cultivos de plátano, banano y heliconias (Musaceae) son afectados por el                  Lic Bgía-Qca, Ph.D.
 hongo ascomiceto Mycosphaerella fijiensis Morelet agente causante de la                       Profesor Titular
 enfermedad más destructiva de estos cultivos conocida como Sigatoka negra,                    Universidad      Tecnológica     de
 generando perdidas económicas considerables tanto para los grandes como los                   Pereira
 pequeños cultivadores. En el control de esta enfermedad, se emplean diversos                  janino@utp.edu.co
 tipos de fungicidas de origen sintético que aumentan los costos de producción,
 además de causar deterioro significativo al medio ambiente.                                   JOHANA OSPINA T.
                                                                                               Estudiante Escuela de Tecnología
 En este trabajo se evaluaron 20 extractos metanólicos y 21 extractos de                       Química
 diclorometano de plantas pertenecientes a las familias Asclepiedaceae,                        johao_02@utp.edu.co
 Asteraceae, Euphorbiaceae, Rubiaceae y Solanaceae, recolectadas en la zona de
 reserva Bremen-La Popa (Quindío, Colombia) a través del método de                             YANED M. CORREA N.
 elongación del tubo germinativo de las ascoporas.                                             Química
                                                                                               Profesora Catedrática
 Se encontró que cinco extractos metanólicos (25%) y seis de diclorometano                     Universidad    Tecnológica       de
 (28.6%) presentaron actividad in vitro contra Mycosphaerella fijiensis. De                    Pereira
 acuerdo al tamizaje fitoquímico los componentes responsables de esta actividad                yamico@utp.edu.co
 pueden ser: alcaloides, esteroides, fenoles, flavonoides, saponinas, taninos y
 triterpenos, entre otros.                                                                     OSCAR M. MOSQUERA M.
                                                                                               Químico, M.Sc.
 PALABRAS CLAVES: Asclepiedaceae, Asteraceae, Bioplaguicida,                                   Profesor Titular
 Euphorbiaceae, Plátano, Rubiaceae, Sigatoka negra, Solanaceae                                 Universidad      Tecnológica de
                                                                                               Pereira
 ABSTRACT                                                                                      omosquer@utp.edu.co
 The plantain, banana and heliconias crops (Musaceae) are affected by the
 ascomicete fungus Mycosphaerella fijiensis Morelet the agent that cause one of                GRUPO                           DE
 the most destructive disease for these cultivations known like black Sigatoka,                BIOTECNOLOGÍA-
 generating considerable economic lost for great and small farmers. In the                     PRODUCTOS           NATURALES
 control of this disease diverse types of synthetic fungicides are used, but this              (GBPN). Escuela de Tecnología
 increases the production costs, besides to cause significant deterioration to the             Química, Universidad Tecnológica
 environment.                                                                                  de Pereira, Centro de Investigación
                                                                                               y Estudios en Biodiversidad y
 In this work 20 methanolics and 21 dichloromethane extracts from plants                       Recursos Genéticos (CIEBREG).
 belonging to the Asclepiedaceae, Asteraceae, Euphorbiaceae, Rubiaceae and                     La Julita, Pereira.
 Solanaceae families collected in the Natural Reserve Bremen-La Popa
 (Quindío, Colombia) were evaluated, through ascospore germinative tube
 growth tests.

 It was found that five methanolics (25%) and six of dichloromethane extracts
 (28,6%) displayed in-vitro activity against Mycosphaerella fijiensis. The
 phytocompounds responsible for this activity can be: alkaloids, steroids,
 phenols, flavonoids, saponins, tannins and triterpenoids.

 KEY WORDS: Asclepiedaceae, Asteraceae, Bioplaguicide, Euphorbiaceae,
 Plantain, Rubiaceae, Black Sigatoka, Solanaceae

El cultivo de plátano en Colombia, ha sido un sector                      cultivados extensivamente y con fines comerciales son
tradicional de la economía campesina y constituye una                     susceptibles a esta enfermedad que causa necrosis en las
fuente valiosa de ingresos tanto en el comercio local                     hojas y perdidas entre el 33 y el 50% en las cosechas.
como internacional. La Sigatoka negra (Mycospaerella
fijiensis Morelet), es la enfermedad más difundida y                      El desarrollo de estrategias innovadoras dirigidas a
destructiva para los cultivos de banano y otros cultivares                disminuir el uso de fungicidas sintéticos convencionales,
de musaceae. La mayoría de los plátanos y bananos                         es un desafió permanente, por lo cual se estudió el efecto
Fecha de Recepción: 15 Febrero de 2007
Fecha de Aceptación: 12 Marzo de 2007
426                                                                     Scientia et Technica Año XIII, No 33, Mayo de 2007. UTP


inhibidor de 20 extractos metanólicos crudos y 21 de          Los extractos metanólicos y de diclorometano de las
diclorometano de plantas pertenecientes a las familias        especies de las familias Solanaceae y Asteraceae fueron
Solanaceae, Asteraceae, Rubiaceae y Euphorbiaceae,            los que presentaron el mayor porcentaje (60-90%) de
recolectadas en la zona de Reserva Natural Bremen-La          ascosporas con germinación deforme.
Popa (Filandia-Circasia, Quindío, Colombia) durante el
mes de agosto del 2005. De cada planta se tomaron 300 g       Las plantas superiores, ante el estrés externo inducen la
del material seco y molido, se sometieron a extracción        síntesis y acumulación de metabolitos secundarios, los
por maceración sucesivamente con n-hexano,                    cuales les confieren resistencia para el control de
diclorometano y metanol, cada uno tres veces. Los             hongos, bacterias y virus.
extractos, fueron concentrados a presión reducida y una
vez obtenidos se almacenaron a -10 °C.                        Estudios empleando extractos vegetales de 20 plantas
                                                              seleccionadas mostraron que un porcentaje superior al
Para la evaluación de la actividad antifúngica se utilizó     30% de actividad inhibitoria contra M. fijiensis, entre las
tejido foliar de plátano infectado en los estadios 5 ó 6 de   cuales sobresalieron Syzigium aromaticum con mayor
la enfermedad. El tejido se incubó por 48 horas a             poder antifúngico, seguido por Commelina difusa,
temperatura ambiente en bolsas plásticas con sello            Momordica charantia, Pavonia sp., Plenax sp., Piper
hermético, pegado a discos de papel kraf con grapas           hispidum, Piper peltatum y Sida rhombifolia and
metálicas y envuelto en papel humedecido con agua             Syzygium aromaticum. Estos estudios han mostrado que
destilada (cámara húmeda).                                    algunos agentes protectores o inductores de resistencia
                                                              por su actividad como antifúngicos, son: cumarinas,
Después del período de incubación, las muestras se            compuestos fenólicos, flavonoides, saponinas y quinonas.
sacaron de la bolsa plástica y el material se sumergió        También, se ha determinado que algunos de estos
durante cinco minutos en agua destilada. Pasado este          metabolitos secundarios hacen parte del repertorio de las
tiempo se procedió a la descarga de ascosporas en las         sustancias que sirven de defensa en las plantas, entre
cajas de Petri que contenían agar al 2 % suplementado         estos se encuentran los alcaloides, terpenoides, y
(envenenado) con muestras del extracto a 1000 mg/L            fenilpropanoides. Igualmente, se conoce que algunas
durante una hora.                                             fitoalexinas     tipo    flavonoides,    terpénicas       y
                                                              sesquiterpénicas intervienen en la protección de las
Como control negativo se utilizó etanol absoluto al 1 % y     plantas contra los microorganismos.
como control positivo se empleó el fungicida Benlate a 1
mg/L. Las cajas Petri con las ascosporas se incubaron a       Con lo anterior y de acuerdo al tamizaje fitoquímico, los
27 ºC por 24 horas para los extractos de metanol y por 48     extractos de las familias Solanaceae y Asteraceae
horas para los de diclorometano. Luego, se realizó la         mostraron como constituyentes principales, alcaloides,
lectura de 150 ascosporas en tres campos de 50                esteroides, fenoles, flavonoides, saponinas, taninos y
ascosporas cada uno, a través de un microscopio de luz        triterpenos, entre otros (datos no mostrados).
bajo un aumento de 10X.                                       Posiblemente, estos compuestos pueden ser la causa de la
                                                              deformación observada en las ascosporas de M. fijiensis.
Se determinó la actividad antifúngica in vitro de los         Por lo tanto, de las 11 especies que tuvieron actividad
extractos mediante la medición del tubo germinativo,          antifúngica, las que pertenecen a estas familias, son
determinando el porcentaje de ascosporas con                  promisorias para el posible control de la enfermedad y se
germinación normal (CN), corta (GC), deforme (GD) y           debe aislar y caracterizar el o los compuestos bioactivos
no geminadas, (NG). En general, un alto porcentaje de         en dichos extractos y someterlos a ensayos in vitro e in
las ascosporas con GC, GD o NG, implica que el extracto       vivo, para valorar su efectividad.
tiene    actividad   antifúngica   sobre    el    hongo
Mycosphaerella fijiensis (Mf).                                AGRADECIMIENTOS
De los extractos evaluados cinco de metanol y seis de de
diclorometano tuvieron actividad sobre el hongo Mf,           Al Centro de Investigación y Estudios en Biodiversidad y
siendo la deformación (GD) del tubo germinativo el            Recursos Genéticos (CIEBREG) y a la Universidad
mayor efecto evaluado causado por estos extractos sobre       Tecnológica de Pereira (UTP) por la financiación del
las ascosporas.                                               proyecto.

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84933120

  • 1. Scientia Et Technica Universidad Tecnológica de Pereira scientia@utp.edu.co ISSN (Versión impresa): 0122-1701 COLOMBIA 2007 Jaime Niño O. / Johana Ospina T. / Yaned M. Correa N. / Oscar M. Mosquera DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DE EXTRACTOS VEGETALES SOBRE EL HONGO MYCOSPHAERELLA FIJIENSIS MORELET Scientia Et Technica, abril, año/vol. XIII, número 033 Universidad Tecnológica de Pereira Pereira, Colombia pp. 425-426 Red de Revistas Científicas de América Latina y el Caribe, España y Portugal Universidad Autónoma del Estado de México http://redalyc.uaemex.mx
  • 2. Scientia et Technica Año XIII, No 33, Mayo de 2007. UTP. ISSN 0122-1701 425 DETERMINACION DE LA ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA DE EXTRACTOS VEGETALES SOBRE EL HONGO Mycosphaerella fijiensis Morelet RESUMEN JAIME NIÑO O. Los cultivos de plátano, banano y heliconias (Musaceae) son afectados por el Lic Bgía-Qca, Ph.D. hongo ascomiceto Mycosphaerella fijiensis Morelet agente causante de la Profesor Titular enfermedad más destructiva de estos cultivos conocida como Sigatoka negra, Universidad Tecnológica de generando perdidas económicas considerables tanto para los grandes como los Pereira pequeños cultivadores. En el control de esta enfermedad, se emplean diversos janino@utp.edu.co tipos de fungicidas de origen sintético que aumentan los costos de producción, además de causar deterioro significativo al medio ambiente. JOHANA OSPINA T. Estudiante Escuela de Tecnología En este trabajo se evaluaron 20 extractos metanólicos y 21 extractos de Química diclorometano de plantas pertenecientes a las familias Asclepiedaceae, johao_02@utp.edu.co Asteraceae, Euphorbiaceae, Rubiaceae y Solanaceae, recolectadas en la zona de reserva Bremen-La Popa (Quindío, Colombia) a través del método de YANED M. CORREA N. elongación del tubo germinativo de las ascoporas. Química Profesora Catedrática Se encontró que cinco extractos metanólicos (25%) y seis de diclorometano Universidad Tecnológica de (28.6%) presentaron actividad in vitro contra Mycosphaerella fijiensis. De Pereira acuerdo al tamizaje fitoquímico los componentes responsables de esta actividad yamico@utp.edu.co pueden ser: alcaloides, esteroides, fenoles, flavonoides, saponinas, taninos y triterpenos, entre otros. OSCAR M. MOSQUERA M. Químico, M.Sc. PALABRAS CLAVES: Asclepiedaceae, Asteraceae, Bioplaguicida, Profesor Titular Euphorbiaceae, Plátano, Rubiaceae, Sigatoka negra, Solanaceae Universidad Tecnológica de Pereira ABSTRACT omosquer@utp.edu.co The plantain, banana and heliconias crops (Musaceae) are affected by the ascomicete fungus Mycosphaerella fijiensis Morelet the agent that cause one of GRUPO DE the most destructive disease for these cultivations known like black Sigatoka, BIOTECNOLOGÍA- generating considerable economic lost for great and small farmers. In the PRODUCTOS NATURALES control of this disease diverse types of synthetic fungicides are used, but this (GBPN). Escuela de Tecnología increases the production costs, besides to cause significant deterioration to the Química, Universidad Tecnológica environment. de Pereira, Centro de Investigación y Estudios en Biodiversidad y In this work 20 methanolics and 21 dichloromethane extracts from plants Recursos Genéticos (CIEBREG). belonging to the Asclepiedaceae, Asteraceae, Euphorbiaceae, Rubiaceae and La Julita, Pereira. Solanaceae families collected in the Natural Reserve Bremen-La Popa (Quindío, Colombia) were evaluated, through ascospore germinative tube growth tests. It was found that five methanolics (25%) and six of dichloromethane extracts (28,6%) displayed in-vitro activity against Mycosphaerella fijiensis. The phytocompounds responsible for this activity can be: alkaloids, steroids, phenols, flavonoids, saponins, tannins and triterpenoids. KEY WORDS: Asclepiedaceae, Asteraceae, Bioplaguicide, Euphorbiaceae, Plantain, Rubiaceae, Black Sigatoka, Solanaceae El cultivo de plátano en Colombia, ha sido un sector cultivados extensivamente y con fines comerciales son tradicional de la economía campesina y constituye una susceptibles a esta enfermedad que causa necrosis en las fuente valiosa de ingresos tanto en el comercio local hojas y perdidas entre el 33 y el 50% en las cosechas. como internacional. La Sigatoka negra (Mycospaerella fijiensis Morelet), es la enfermedad más difundida y El desarrollo de estrategias innovadoras dirigidas a destructiva para los cultivos de banano y otros cultivares disminuir el uso de fungicidas sintéticos convencionales, de musaceae. La mayoría de los plátanos y bananos es un desafió permanente, por lo cual se estudió el efecto Fecha de Recepción: 15 Febrero de 2007 Fecha de Aceptación: 12 Marzo de 2007
  • 3. 426 Scientia et Technica Año XIII, No 33, Mayo de 2007. UTP inhibidor de 20 extractos metanólicos crudos y 21 de Los extractos metanólicos y de diclorometano de las diclorometano de plantas pertenecientes a las familias especies de las familias Solanaceae y Asteraceae fueron Solanaceae, Asteraceae, Rubiaceae y Euphorbiaceae, los que presentaron el mayor porcentaje (60-90%) de recolectadas en la zona de Reserva Natural Bremen-La ascosporas con germinación deforme. Popa (Filandia-Circasia, Quindío, Colombia) durante el mes de agosto del 2005. De cada planta se tomaron 300 g Las plantas superiores, ante el estrés externo inducen la del material seco y molido, se sometieron a extracción síntesis y acumulación de metabolitos secundarios, los por maceración sucesivamente con n-hexano, cuales les confieren resistencia para el control de diclorometano y metanol, cada uno tres veces. Los hongos, bacterias y virus. extractos, fueron concentrados a presión reducida y una vez obtenidos se almacenaron a -10 °C. Estudios empleando extractos vegetales de 20 plantas seleccionadas mostraron que un porcentaje superior al Para la evaluación de la actividad antifúngica se utilizó 30% de actividad inhibitoria contra M. fijiensis, entre las tejido foliar de plátano infectado en los estadios 5 ó 6 de cuales sobresalieron Syzigium aromaticum con mayor la enfermedad. El tejido se incubó por 48 horas a poder antifúngico, seguido por Commelina difusa, temperatura ambiente en bolsas plásticas con sello Momordica charantia, Pavonia sp., Plenax sp., Piper hermético, pegado a discos de papel kraf con grapas hispidum, Piper peltatum y Sida rhombifolia and metálicas y envuelto en papel humedecido con agua Syzygium aromaticum. Estos estudios han mostrado que destilada (cámara húmeda). algunos agentes protectores o inductores de resistencia por su actividad como antifúngicos, son: cumarinas, Después del período de incubación, las muestras se compuestos fenólicos, flavonoides, saponinas y quinonas. sacaron de la bolsa plástica y el material se sumergió También, se ha determinado que algunos de estos durante cinco minutos en agua destilada. Pasado este metabolitos secundarios hacen parte del repertorio de las tiempo se procedió a la descarga de ascosporas en las sustancias que sirven de defensa en las plantas, entre cajas de Petri que contenían agar al 2 % suplementado estos se encuentran los alcaloides, terpenoides, y (envenenado) con muestras del extracto a 1000 mg/L fenilpropanoides. Igualmente, se conoce que algunas durante una hora. fitoalexinas tipo flavonoides, terpénicas y sesquiterpénicas intervienen en la protección de las Como control negativo se utilizó etanol absoluto al 1 % y plantas contra los microorganismos. como control positivo se empleó el fungicida Benlate a 1 mg/L. Las cajas Petri con las ascosporas se incubaron a Con lo anterior y de acuerdo al tamizaje fitoquímico, los 27 ºC por 24 horas para los extractos de metanol y por 48 extractos de las familias Solanaceae y Asteraceae horas para los de diclorometano. Luego, se realizó la mostraron como constituyentes principales, alcaloides, lectura de 150 ascosporas en tres campos de 50 esteroides, fenoles, flavonoides, saponinas, taninos y ascosporas cada uno, a través de un microscopio de luz triterpenos, entre otros (datos no mostrados). bajo un aumento de 10X. Posiblemente, estos compuestos pueden ser la causa de la deformación observada en las ascosporas de M. fijiensis. Se determinó la actividad antifúngica in vitro de los Por lo tanto, de las 11 especies que tuvieron actividad extractos mediante la medición del tubo germinativo, antifúngica, las que pertenecen a estas familias, son determinando el porcentaje de ascosporas con promisorias para el posible control de la enfermedad y se germinación normal (CN), corta (GC), deforme (GD) y debe aislar y caracterizar el o los compuestos bioactivos no geminadas, (NG). En general, un alto porcentaje de en dichos extractos y someterlos a ensayos in vitro e in las ascosporas con GC, GD o NG, implica que el extracto vivo, para valorar su efectividad. tiene actividad antifúngica sobre el hongo Mycosphaerella fijiensis (Mf). AGRADECIMIENTOS De los extractos evaluados cinco de metanol y seis de de diclorometano tuvieron actividad sobre el hongo Mf, Al Centro de Investigación y Estudios en Biodiversidad y siendo la deformación (GD) del tubo germinativo el Recursos Genéticos (CIEBREG) y a la Universidad mayor efecto evaluado causado por estos extractos sobre Tecnológica de Pereira (UTP) por la financiación del las ascosporas. proyecto.