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Tema 46. Microbiología Industrial



 1. Microbiología Industrial y Biotecnología
 2. Microorganismos utilizados en la Microbiología industrial: mejora
    de cepas
 3. Crecimiento de microorganismos en ambientes controlados:
    medios de cultivo. Fermentaciones industriales . Metabolitos
    primarios y secundarios
      i   i          d i
 4. Principales productos de la Microbiología Industrial: antibióticos,
    aminoácidos,
    aminoácidos ácidos orgánicos biopolímeros biosurfactantes
                        orgánicos, biopolímeros,
 5. Procesos de bioconversión
 6.
 6 Microbiología de los alimentos fermentados: Yogourt quesos
                                               Yogourt, quesos,
    bebidas alcoholicas
 7. Biodegradación y biorremediación
 8. Bioaumento
 9.
 9 Microorganismos como productos: nanobacterias biosensores
                                   nanobacterias, biosensores,
    biopepticida
Tema 46. Microbiología Industrial



  1. Microbiología Industrial. Biotecnología microbiana
               g                         g

             Disciplina que se ocupa de la utilización de microorganismos,
             generalmente en crecimiento a gran escala con el fin de obtener
                                                  escala,
                            productos de interés comercial.

  Componentes:
   Microorganismo                   Sustrato                  Producto           Residuo

  Biotecnología
             Uso de seres vivos o de componentes o sistemas biológicos para la
                               obtención de productos útiles.

         •     Integra bioquímica, biología molecular e i
               I t     bi   í i    bi l í     l   l     ingeniería
                                                             i í   ciencia multidisciplinar
                                                                    i   i    ltidi i li
         •     Se sirve habitualmente de organismos genéticamente modificados (GMOs)
Tema 46. Microbiología Industrial


  1. Microbiología Industrial. Biotecnología microbiana

    Aéreas de aplicación de la biotecnología
   INDUSTRIA ALIMENTARIA: bebidas alcoholicas, productos lácteos
                                  alcoholicas
   fermentados, pan, proteinas unicelulares…….


INDUSTRIA FARMACEÚTICA: antibióticos hormonas, vacunas,
                              antibióticos, hormonas vacunas
interferones, factores antihemofílicos…

   INDUSTRIA QUÍMICA: acetona, butanol, acético, aminoácidos, vitaminas,
   esteroides …….

   AGRICULTURA: Biofertilización, biocontrol …….

   MEDIO AMBIENTE: Biodegradación de productos tóxicos, tratamiento de
   aguas…..
Tema 46. Microbiología Industrial



            Tipos de productos obtenidos a partir
                    de microorganismos
                                                                     Bioconversión
                           Células                                      Sustrato




                                                                         Producto
                           Levadura
                                                                      (bioconversión
                                                                      de esteroides)


                                      Productos d las Células
                                      P d t de l Cél l
              Enzimas
              (Glucosa                                                          Productos
            Isomerasa)
            I          )                                                        Químicos
                                                                              (ácido cítrico)
                                                           Alcohol
                       Antibióticos
                       (Penicilina)           Aditivos
                                            Alimenticios
                                           (aminoácidos)
Tema 46. Microbiología Industrial



 2. Microorganismos de interés industrial: Mejora de cepas
           g                                 j         p
    Características
     1. Alta velocidad de metabolismo

     2. Gran variabilidad del metabolismo


    Propiedades deseables

    • De metabolismo conocido
    • De rápido crecimiento
    • C alto rendimiento
      Con lt    di i t
    • No patógeno
    • Capaz de crecer en sustratos sencillos en medio liquido
        p                                               q
    • De fácil separación del medio de cultivo y de sus productos
    •Estable genéticamente, susceptible de ser modificado ………..
Tema 46. Microbiología Industrial



 2. Microorganismos de interés industrial: Mejora de cepas
           g                                 j         p

    Manipulación genética de microorganismos


 Utilizada para producir microorganismos con nuevas y mejores
 características

        •Mutación
        •Fusión de protoplastos
        •Inserción de secuencias cortas de ADN: mutagénesis dirigida
        •Transferencia de información genética
        •Modificación de la expresión génica
Tema 46. Microbiología Industrial



 Expresión de genes de otros organismos para mejorar procesos y
 productos
Tema 46. Microbiología Industrial




       Producción de vacuna recombinante
Tema 46. Microbiología Industrial


   Modificación de la expresión de los genes
                        p              g

  • Estrategia que permite el aumento de la producción de un
    producto o la producción de mas de un producto por el
    mismo microorganismos, o la síntesis de productos
    modificados
  • Arquitectura de vías metabólicas
     – Análisis, diseño y modificación de las rutas bioquímicas
       para i
            incrementar l eficiencia d l proceso
                      t la fi i    i del
     – Ingeniería de rutas metabólicas (MPE)
        • Alteración intencional de la r ta por inactivación de
                                       ruta     inacti ación
          genes específicos
     – Ingeniería de control metabólico
        • Alteración de los mecanismos de control de genes
          específicos
Tema 46. Microbiología Industrial


        Ej. Ingeniería metabólica para la obtención de antibióticos modificados
Tema 46. Microbiología Industrial



          3. Las fermentaciones. Metabolitos primarios y secundarios.
                                             p
                                        Tanques de fermentación aeróbicos y anaeróbicos:
                                        birreactores, fermentadores

   Fermentación
             ó
   En microbiología industrial: se llama fermentación
   a cualquier proceso microbiano a gran escala, sea o
   no una fermentación en el sentido bioquímico de la
   palabra.
   palabra
    Medio de cultivo.
    • Económico
    • Con buenos niveles de minerales (hierro)
    • Preciso control de condiciones ambientales pH,
      temperatura, niveles d oxígeno..
      t       t     i l de í
Tema 46. Microbiología Industrial


   Fermentador industrial de agitación
Tema 46. Microbiología Industrial




                                    Alternativas a los
                                      fermetadores
                                      tradicionales
Tema 46. Microbiología Industrial



                  Tipos de productos microbianos
    • Metabolitos primarios
                  p
           – Producidos durante la fase de crecimiento o
             trofofase
           – Aminoácidos, nucleótidos, productos finales de
             fermentación y enzimas
    • Metabolitos secundarios
           – Acumulados tras el crecimiento activo Idiofase
                                            activo.
           – No relacionados directamente con la síntesis
             de material celular
           – Antibióticos y micotoxinas
Tema 46. Microbiología Industrial




      Características de los metabolitos secundarios
    • Tienden a p oduc se en la fase estac o a a de
        e de      producirse e a ase estacionaria
      crecimiento
    • Sintetizados a partir de intermediarios del metabolismo
                      p
      primario por enzimas específicos
    • No esenciales para el crecimiento o metabolismo.
    • Dependientes de las condiciones de crecimiento.
    Generalmente:
    • Sintetizados como productos muy relacionados
      estructuralmente.
       • Una cepa de Streptomyces produce 32 antibióticos
          distintos del tipo antraciclina
Tema 46. Microbiología Industrial


                         Crecimiento microbiano a nivel industrial: Metabolitos
                                        primarios y secundarios.


                                Trofofase                                     Trofofase             Idiofase
                                             Células




                                                                                          Células




                                                       Peso o nº de células
                élulas




                                            Etanol
  Peso o nº de cé




                                                                    c
                                                                                                Penicilina




              Tiempo                                     Tiempo

                         Metabolito primario: etanol            Metabolito secundario: penicilina
Tema 46. Microbiología Industrial




      Metabolitos Primarios y Secundarios


              Sustrato de                           Sustrato de                                 Sustrato de
              crecimiento                           crecimiento                                 crecimiento




                                                Células     Metabolito                     Células      Metabolito
         Células       Metabolito                            Primario                                    Primario
                        Primario


     Las células y el metabolito se                   Metabolito                         Metabolito
       producen más o menos                           Secundario                         Secundario
           simultáneamente
                                      Después de producidas las células y el    Después de producidas las células el
                                         metabolito primario, las células      sustrato se convierte en un metabolito
                                       convierten el metabolito primario en       secundario durante un posterior
                                                 uno secundario                             crecimiento
Tema 46. Microbiología Industrial


  4. Principales productos y procesos de interés en la microbiología industrial
Tema 46. Microbiología Industrial



   Antibioticos
Tema 46. Microbiología Industrial



                   Producción de estreptomicina
Tema 46. Microbiología Industrial



   Producción de antibióticos
         Metabolitos secundarios típicos


                          Antibiótico      Microorganismo productor
                          Bacitracina      Bacillus licheniformis
                          Cefalosporinas
                          C f l     i      Cephalosporium
                                           C h l      i
                          Cloranfenicol    Streptomyces venezuelae
                          Cicloserina      Streptomyces orchidaceus
                          Eritromicina     Streptomyces erythreus
                          Kanamicina       Streptomyces kanamycetus
                          Neomicina        Streptomyces fradiae
                          Penicilina       Penicillium chrysogenum
                          Polimixina       Bacillus polymyxa
                          Estreptomicina   Streptomices griseus
                          Tetraciclina     Streptomyces rimosus
Tema 46. Microbiología Industrial


                                    Amino Acidos
Tema 46. Microbiología Industrial




                            Acidos Orgánicos
                            A id O á i
Tema 46. Microbiología Industrial




           Biopolimeros
           Bi   li                        Biosurfactantes
                                          Bi    f t t
   •    Modifican las               •   Para emulsionar y aumentar
        características de los          la actividad detergente ,
        líquidos. Agentes               humedectación y dispersión
        gelificantes                    de fases y solubilación
          – D t
            Dextranos y otros
                          t         •   Son importantes en
                                        S i        t t
            polisacáridos               biorremediación dispersión
          – ciclodextrinas              de vertidos del petróleo y
                                        recuperación de petróleo
                                    •   Muchos tienen actividad
                                        antibacteriana y antifúngica
                                        algunas inactivan
                                        alg nas inacti an a virus
                                                              ir s
                                        envueltos
Tema 46. Microbiología Industrial



         5. Procesos de bioconversión

  • Transformación microbiana o biotransformaciones
         – Pequeños cambios en moléculas que lo realizan
           microorganismos no en crecimiento
         – Los microorganismos actúan directa o indirectamente
           como biocatalalizadores

  • Pueden realizarse por enzimas libres o células o
    por enzimas o células

  • V t j
    Ventajas
         – Producen el estereoisómero específico
Tema 46. Microbiología Industrial



            BIOCONVERSIÓN MICROBIANA

                       Producción de cortisona utilizando un microorganismo




                       Ej.: Hidroxilación estereoespecífica de progesterona
    Utilidad de cepas tolerantes a altas concentraciones de solventes orgánicos
                  p                                                     g

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Tema 46.1

  • 1. Tema 46. Microbiología Industrial 1. Microbiología Industrial y Biotecnología 2. Microorganismos utilizados en la Microbiología industrial: mejora de cepas 3. Crecimiento de microorganismos en ambientes controlados: medios de cultivo. Fermentaciones industriales . Metabolitos primarios y secundarios i i d i 4. Principales productos de la Microbiología Industrial: antibióticos, aminoácidos, aminoácidos ácidos orgánicos biopolímeros biosurfactantes orgánicos, biopolímeros, 5. Procesos de bioconversión 6. 6 Microbiología de los alimentos fermentados: Yogourt quesos Yogourt, quesos, bebidas alcoholicas 7. Biodegradación y biorremediación 8. Bioaumento 9. 9 Microorganismos como productos: nanobacterias biosensores nanobacterias, biosensores, biopepticida
  • 2. Tema 46. Microbiología Industrial 1. Microbiología Industrial. Biotecnología microbiana g g Disciplina que se ocupa de la utilización de microorganismos, generalmente en crecimiento a gran escala con el fin de obtener escala, productos de interés comercial. Componentes: Microorganismo Sustrato Producto Residuo Biotecnología Uso de seres vivos o de componentes o sistemas biológicos para la obtención de productos útiles. • Integra bioquímica, biología molecular e i I t bi í i bi l í l l ingeniería i í ciencia multidisciplinar i i ltidi i li • Se sirve habitualmente de organismos genéticamente modificados (GMOs)
  • 3. Tema 46. Microbiología Industrial 1. Microbiología Industrial. Biotecnología microbiana Aéreas de aplicación de la biotecnología INDUSTRIA ALIMENTARIA: bebidas alcoholicas, productos lácteos alcoholicas fermentados, pan, proteinas unicelulares……. INDUSTRIA FARMACEÚTICA: antibióticos hormonas, vacunas, antibióticos, hormonas vacunas interferones, factores antihemofílicos… INDUSTRIA QUÍMICA: acetona, butanol, acético, aminoácidos, vitaminas, esteroides ……. AGRICULTURA: Biofertilización, biocontrol ……. MEDIO AMBIENTE: Biodegradación de productos tóxicos, tratamiento de aguas…..
  • 4. Tema 46. Microbiología Industrial Tipos de productos obtenidos a partir de microorganismos Bioconversión Células Sustrato Producto Levadura (bioconversión de esteroides) Productos d las Células P d t de l Cél l Enzimas (Glucosa Productos Isomerasa) I ) Químicos (ácido cítrico) Alcohol Antibióticos (Penicilina) Aditivos Alimenticios (aminoácidos)
  • 5. Tema 46. Microbiología Industrial 2. Microorganismos de interés industrial: Mejora de cepas g j p Características 1. Alta velocidad de metabolismo 2. Gran variabilidad del metabolismo Propiedades deseables • De metabolismo conocido • De rápido crecimiento • C alto rendimiento Con lt di i t • No patógeno • Capaz de crecer en sustratos sencillos en medio liquido p q • De fácil separación del medio de cultivo y de sus productos •Estable genéticamente, susceptible de ser modificado ………..
  • 6. Tema 46. Microbiología Industrial 2. Microorganismos de interés industrial: Mejora de cepas g j p Manipulación genética de microorganismos Utilizada para producir microorganismos con nuevas y mejores características •Mutación •Fusión de protoplastos •Inserción de secuencias cortas de ADN: mutagénesis dirigida •Transferencia de información genética •Modificación de la expresión génica
  • 7. Tema 46. Microbiología Industrial Expresión de genes de otros organismos para mejorar procesos y productos
  • 8. Tema 46. Microbiología Industrial Producción de vacuna recombinante
  • 9. Tema 46. Microbiología Industrial Modificación de la expresión de los genes p g • Estrategia que permite el aumento de la producción de un producto o la producción de mas de un producto por el mismo microorganismos, o la síntesis de productos modificados • Arquitectura de vías metabólicas – Análisis, diseño y modificación de las rutas bioquímicas para i incrementar l eficiencia d l proceso t la fi i i del – Ingeniería de rutas metabólicas (MPE) • Alteración intencional de la r ta por inactivación de ruta inacti ación genes específicos – Ingeniería de control metabólico • Alteración de los mecanismos de control de genes específicos
  • 10. Tema 46. Microbiología Industrial Ej. Ingeniería metabólica para la obtención de antibióticos modificados
  • 11. Tema 46. Microbiología Industrial 3. Las fermentaciones. Metabolitos primarios y secundarios. p Tanques de fermentación aeróbicos y anaeróbicos: birreactores, fermentadores Fermentación ó En microbiología industrial: se llama fermentación a cualquier proceso microbiano a gran escala, sea o no una fermentación en el sentido bioquímico de la palabra. palabra Medio de cultivo. • Económico • Con buenos niveles de minerales (hierro) • Preciso control de condiciones ambientales pH, temperatura, niveles d oxígeno.. t t i l de í
  • 12. Tema 46. Microbiología Industrial Fermentador industrial de agitación
  • 13. Tema 46. Microbiología Industrial Alternativas a los fermetadores tradicionales
  • 14. Tema 46. Microbiología Industrial Tipos de productos microbianos • Metabolitos primarios p – Producidos durante la fase de crecimiento o trofofase – Aminoácidos, nucleótidos, productos finales de fermentación y enzimas • Metabolitos secundarios – Acumulados tras el crecimiento activo Idiofase activo. – No relacionados directamente con la síntesis de material celular – Antibióticos y micotoxinas
  • 15. Tema 46. Microbiología Industrial Características de los metabolitos secundarios • Tienden a p oduc se en la fase estac o a a de e de producirse e a ase estacionaria crecimiento • Sintetizados a partir de intermediarios del metabolismo p primario por enzimas específicos • No esenciales para el crecimiento o metabolismo. • Dependientes de las condiciones de crecimiento. Generalmente: • Sintetizados como productos muy relacionados estructuralmente. • Una cepa de Streptomyces produce 32 antibióticos distintos del tipo antraciclina
  • 16. Tema 46. Microbiología Industrial Crecimiento microbiano a nivel industrial: Metabolitos primarios y secundarios. Trofofase Trofofase Idiofase Células Células Peso o nº de células élulas Etanol Peso o nº de cé c Penicilina Tiempo Tiempo Metabolito primario: etanol Metabolito secundario: penicilina
  • 17. Tema 46. Microbiología Industrial Metabolitos Primarios y Secundarios Sustrato de Sustrato de Sustrato de crecimiento crecimiento crecimiento Células Metabolito Células Metabolito Células Metabolito Primario Primario Primario Las células y el metabolito se Metabolito Metabolito producen más o menos Secundario Secundario simultáneamente Después de producidas las células y el Después de producidas las células el metabolito primario, las células sustrato se convierte en un metabolito convierten el metabolito primario en secundario durante un posterior uno secundario crecimiento
  • 18. Tema 46. Microbiología Industrial 4. Principales productos y procesos de interés en la microbiología industrial
  • 19. Tema 46. Microbiología Industrial Antibioticos
  • 20. Tema 46. Microbiología Industrial Producción de estreptomicina
  • 21. Tema 46. Microbiología Industrial Producción de antibióticos Metabolitos secundarios típicos Antibiótico Microorganismo productor Bacitracina Bacillus licheniformis Cefalosporinas C f l i Cephalosporium C h l i Cloranfenicol Streptomyces venezuelae Cicloserina Streptomyces orchidaceus Eritromicina Streptomyces erythreus Kanamicina Streptomyces kanamycetus Neomicina Streptomyces fradiae Penicilina Penicillium chrysogenum Polimixina Bacillus polymyxa Estreptomicina Streptomices griseus Tetraciclina Streptomyces rimosus
  • 22. Tema 46. Microbiología Industrial Amino Acidos
  • 23. Tema 46. Microbiología Industrial Acidos Orgánicos A id O á i
  • 24. Tema 46. Microbiología Industrial Biopolimeros Bi li Biosurfactantes Bi f t t • Modifican las • Para emulsionar y aumentar características de los la actividad detergente , líquidos. Agentes humedectación y dispersión gelificantes de fases y solubilación – D t Dextranos y otros t • Son importantes en S i t t polisacáridos biorremediación dispersión – ciclodextrinas de vertidos del petróleo y recuperación de petróleo • Muchos tienen actividad antibacteriana y antifúngica algunas inactivan alg nas inacti an a virus ir s envueltos
  • 25. Tema 46. Microbiología Industrial 5. Procesos de bioconversión • Transformación microbiana o biotransformaciones – Pequeños cambios en moléculas que lo realizan microorganismos no en crecimiento – Los microorganismos actúan directa o indirectamente como biocatalalizadores • Pueden realizarse por enzimas libres o células o por enzimas o células • V t j Ventajas – Producen el estereoisómero específico
  • 26. Tema 46. Microbiología Industrial BIOCONVERSIÓN MICROBIANA Producción de cortisona utilizando un microorganismo Ej.: Hidroxilación estereoespecífica de progesterona Utilidad de cepas tolerantes a altas concentraciones de solventes orgánicos p g