Ensayo metalosate cobre hongos de madera vid - invernadero

Ensayo Metalosate cobre – hongos de madera - vid
1
Evaluación de la eficacia de Metalosate Cobre sobre infecciones por Lasiodiplodia
theobromae, agente causal del brazo muerto de la vid bajo condiciones controladas
1. METODOLOGÍA
El experimento se realizó en una casa malla de las instalaciones del Departamento de
Sanidad Vegetal de la Universidad Nacional San Luis Gonzaga. Las condiciones de temperatura
estuvieron entre 20 - 24 ºC y de 65 - 75% de humedad relativa.
Se utilizaron plantas de vid en bolsa de polietileno de cinco meses de edad del cultivar Red
Globe injertadas sobre patrón MGT-101-14. En los ensayos se utilizaron los productos listados en la
Tabla 1.
Como inóculo, se utilizó el aislado Las 1 de L. theobromae procedente de vid, contenido en
placas de Petri.
Tabla 1. Tratamientos empleados para el control de L. theobromae en inoculaciones artificiales en
vid.
Tratamientos Tipo de aplicación
T0: Testigo (sin aplicación)
T1: Metalosate cobre: 0,3 L/200 L Foliar
T4: Metalosate cobre: 0,5 L/200 L + Metalosate boro: 0,2 L/200 L Foliar
T5: Prochloraz (Bucaner 450 EC): 0,3 L/200 L Drench
T6: Thiabendazol (Mertect 500 SC): 0,4 L/200 L Drench
Los productos se aplicaron siguiendo dos modos diferentes de aplicación: mediante
pulverización foliar y vía drench (Tabla 1). Previamente se realizaron los cálculos de los gastos de
agua para cada tipo de aplicación por planta.
a. Mediante pulverización foliar se aplicó un volumen promedio de 60 ml de caldo fungicida por
planta, utilizando una mochila pulverizadora hidráulica de presión previa.
b. La aplicación vía drench se hizo directamente al sustrato de cada maceta. Previamente se
calculó el volumen de retención de agua del sustrato en la maceta, y el gasto utilizado fue de
150 ml de caldo fungicida por planta.

2
Estrategias de evaluación de la eficacia de los productos
A. Aplicaciones de índole preventiva:
Se realizaron dos aplicaciones consecutivas de Metalosate cobre en intervalos de 7 días a
plantas de los diferentes tratamientos conformados. El grupo de plantas testigo se aplicó en los
mismos intervalos con agua sola.
Cinco días después de la última aplicación se inocularon las plantas de cada tratamiento con el
aislado de L. thebromae. Las plantas se inocularon al centro del tallo en la zona del patrón, y en la
parte leñosa del brote en la zona de la variedad. Grupos de diez plantas por cada tratamiento y dosis
de producto a evaluarse se aplicaron solamente en la parte foliar, y grupos similares de plantas vía
drench. El objetivo de este tipo de aplicaciones fue evaluar el efecto de los productos evaluados en
aplicaciones previo a la infección, y asimismo como afectaban las aplicaciones foliares o vía drench
en el área de lesión por el patógeno.
B. Aplicaciones de índole curativa:
Grupos de plantas de cada tratamiento (dosis de productos fungicidas) se inocularon
previamente con el aislado de L. thebromae. Cinco días después de la inoculación se realizaron dos
aplicaciones consecutivas en intervalos de 7 días entre aplicaciones de los diferentes tratamientos a
cada grupo de plantas. El objetivo de este tipo de aplicaciones fue evaluar la eficacia de los
productos y dosis utilizados en detener las infecciones por el patógeno. Similar a lo descrito
anteriormente, las plantas se inocularon en la zona del patrón y de la variedad, y se realizaron
aplicaciones independientes de plantas vía foliar o drench.
Proceso de inoculación de plantas
La corteza del tallo en la zona del patrón y la parte leñosa de la zona de la variedad, se
desinfectaron superficialmente con alcohol etílico al 96º. De esta zona se extrajo un disco de corteza
mediante un sacabocados estéril de 5 mm de diámetro. En la herida se colocó, en contacto directo
con el cambium expuesto, un disco de PDA de similar diámetro colonizado con el micelio del
aislado de L. thebromae, y la herida se tapó con el disco de corteza extraído. La zona de inoculación
se humedeció con unas gotas de agua estéril, se envolvió con una cinta de parafilm para proteger la
zona inoculada de la desecación (Figura 1).

3
Figura 1. Proceso de inoculación de plantas de vid en invernadero con L. theobromae

4
Evaluación de resultados
Cuatro semanas después de la inoculación se eliminó cuidadosamente la corteza de cada
planta inoculada alrededor de la zona de la herida. El área de la lesión resultante se delineó sobre
una lámina de plástico transparente, se transfirió a una hoja de papel en blanco, y se digitalizó
(Figura 2). Mediante el programa Assess (American Phytopathological Society, St. Paul MN), se
cuantificó el área de la lesión de cada tratamiento mediante el análisis de imagen. El tamaño del
área de la herida de inoculación se sustrajo del área total obtenida para calcular el tamaño real de la
lesión. Para confirmar que las lesiones eran causadas por L. theobromae, se hicieron siembras de los
tejidos afectados en medio PDA de al menos dos plantas de cada tratamiento.
Figura 2. Evaluación del área de la lesión a. Área de la lesión en plantas de vid. b. Área de las
lesiones sobre papel, c. Programa de procesamiento de imágenes digitales
Análisis estadístico
Los resultados se expresaron como área de lesión en cm2
por tratamiento; se puso especial
énfasis en las áreas de lesión tanto de la zona de la variedad así como del patrón en ambas
estrategias de evaluación desarrolladas. Las áreas de lesión de los factores en estudio se sometieron
a un análisis de la varianza (ANOVA), fijando el nivel de significación en P<0,05. Con los factores
que resultaron significativos en el análisis ANOVA se realizó un test de separación de medias
utilizando el análisis de Fisher de la mínima diferencia significativa (LSD). El programa estadístico
utilizado para los análisis fue SAS 9.1.
Adicionalmente, se incluyo los valores promedios del porcentaje de control de cada
tratamiento. Este dato se calculó mediante la siguiente fórmula:
% Control = 100 – [(Área de lesión x 100) / Área de lesión del testigo].

5
2. RESULTADOS
Figura 3a y 3b. Área de lesión registrada en inoculaciones en la zona de la variedad (en flechas)
en el tratamiento Testigo. Note el avance de la lesión a partir del punto de inoculación.
Figura 3c y 3d. Área de lesión registrada en inoculaciones en la zona del patrón (3d) en
Tratamientos con Metalosate cobre.
A B
D
F
C

6
Tabla 2: Efecto Metalosate Cobre sobre la eficacia de estrategias de control de infecciones
por Lasiodiplodia theobromae en inoculaciones artificiales de plantas jóvenes de vid. Ica,
abril - junio de 2015.
Aplicaciones de índole preventiva Aplicaciones de índole curativa
Tratamientos
Área lesión cm2
Tratamientos
Área lesión cm2
Variedad Patrón Variedad Patrón
T 0 8.9 5.8 T 0 5.2 4.7
T 0 6.4 4.7 T 0 6.3 4.3
T 0 7.6 3.4 T 0 6.5 5.5
T 0 5.1 5.6 T 0 7.1 3.8
T 0 7.8 6.1 T 0 7.4 4.4
T 0 5.7 5.7 T 0 8.2 4.4
T 0 8.5 3.4 T 0 4.9 5.1
T 0 4.9 4.1 T 0 6.1 3.2
T 0 7.3 5.2 T 0 4.6 4.6
T 0 8.1 4.9 T 0 7.3 3.1
Promedio 7.0 4.9 Promedio 6.4 4.3
T1 3.6 3.1 T1 4.9 4.1
T1 6.2 4.3 T1 5.6 4.7
T1 4.1 2.1 T1 6.7 5.6
T1 5.7 3.6 T1 5.1 4.6
T1 3.4 3.7 T1 7.4 5.7
T1 4.9 2.3 T1 5.5 3.8
T1 5.3 3.9 T1 7.0 5.1
T1 3.4 2.6 T1 4.9 4.1
T1 4.2 3.6 T1 6.3 3.9
T1 5.4 4.1 T1 6.6 5.3
T2 2.8 2.8 T2 5.2 5.0
T2 3.1 1.4 T2 4.2 3.2
T2 2.4 1.8 T2 6.1 4.7
T2 1.8 1.3 T2 4.2 5.2
T2 3.5 2.4 T2 5.5 4.0
T2 4.4 1.8 T2 4.9 3.3
T2 2.2 1.9 T2 4.3 3.9
T2 2.8 2.5 T2 5.9 4.4
T2 1.6 1.6 T2 4.1 4.3
T2 3.7 2.2 T2 4.7 4.5
T3 3.2 1.6 T3 3.6 3.9
T3 1.9 1.7 T3 4.4 3.1
T3 2.6 2.2 T3 5.9 4.7

7
T3 1.8 1.2 T3 4.3 3.8
T3 2.6 2.5 T3 5.9 4.2
T3 2.1 2.4 T3 5.1 4.9
T3 2.7 1.2 T3 5.2 3.8
T3 3.2 1.7 T3 4.2 3.2
T3 1.9 1.4 T3 3.4 3.1
T3 3.5 2.2 T3 5.1 4.7
T4 1.7 1.1 T4 4.1 3.8
T4 0.5 1.5 T4 5.1 3.7
T4 2.2 0.4 T4 4.2 4.4
T4 1.5 1.3 T4 3.9 3.7
T4 0.7 0.8 T4 4.1 4.2
T4 1.8 1.1 T4 5.1 3.5
T4 1.3 0.8 T4 4.7 4.2
T4 0.7 1.4 T4 4.3 4.5
T4 2.1 1.3 T4 4.1 3.9
T4 0.8 0.9 T4 5.1 3.9
T5 7.1 2.9 T5 4.5 2.2
T5 3.9 4.6 T5 4.8 1.4
T5 5.5 3.8 T5 3.6 3.2
T5 3.3 2.3 T5 3.0 1.4
T5 6.4 3.9 T5 5.8 2.8
T5 4.7 4.7 T5 4.3 3.6
T5 5.8 2.4 T5 5.3 1.5
T5 6.1 3.1 T5 3.5 2.0
T5 5.3 2.4 T5 3.9 3.5
T5 6.2 4.3 T5 4.6 2.8
T6 1.1 0.8 T6 1.8 2.0
T6 0 0.5 T6 2.7 1.5
T6 1.5 0.3 T6 2.2 1.7
T6 0.3 0.2 T6 1.4 1.9
T6 0.4 0.8 T6 1.5 2.2
T6 1.7 0.7 T6 2.7 1.7
T6 0.8 0.5 T6 1.8 1.6
T6 0.5 0.9 T6 2.4 1.9
T6 0.3 0.2 T6 1.6 1.6
T6 1.2 0.3 T6 2.5 1.4

8
A. Estrategias preventivas
Tabla 3. Eficacia de metalosate cobre y otros productos sobre el área de lesión por L. theobromae
en vid en la zona de la variedad. Evaluación de las estrategias de aplicación preventivas.
Valor de P x
Factor Área de lesión en cm2
Efectos Principales
Tratamiento <0,0001 (**)
Tratamientos
Método de
aplicación
Lugar de
inoculación
Área
lesión Tukey
T0: Testigo Variedad 7,0y
az
T1: Metalosate cobre: 0,3 L/200 L Foliar Variedad 4,6 b
T2: Metalosate cobre: 0,5 L/200 L Foliar Variedad 2,8 c
T3: Metalosate cobre: 0,7 L/200 L Foliar Variedad 2,6 cd
T4: Met. cobre: 0,5 L/200 L + Met. Boro: 0,2 L/200 L Foliar Variedad 1,3 de
T5: Prochloraz: 0,3 L/200 L Drench Variedad 5,4 b
T6: Thiabendazol: 0,4 L/200 L Drench Variedad 0,8 e
Promedio 3,5
Coeficiente de variabilidad 26,9 %
xValores de P>0,05 no son significativamente diferentes de acuerdo a la prueba de Tukey. (**) Alta significación, (NS) No
existe significación. y Cada dato es media de 10 valores (plantas), y hace referencia al área de lesión en cm2 desarrolladas
a partir de la zona de inoculación en infecciones por Lasiodiplodia theobromae; z Números en columnas seguidos por la
misma letra no son significativamente diferentes de acuerdo a la prueba de Tukey.
Figura 4. Influencia de metalosate cobre sobre la severidad de las lesiones (área de lesión en cm2
)
ocasionadas por Lasiodiplodia en vid en la zona de la variedad en aplicaciones preventivas.
0,0
2,0
4,0
6,0
8,0
10,0
Areadelesiónencm2
Tratamientos
T0: Testigo T1: Metalosate cobre: 0,3 L/200 L
T2: Metalosate cobre: 0,5 L/200 L T3: Metalosate cobre: 0,7 L/200 L
T4: Met. cobre: 0,5 L/200 L + Met. Boro: 0,2 L/200 L T5: Prochloraz: 0,3 L/200 L

9
en vid en la zona del patrón. Evaluación de las estrategias de aplicación preventivas.
Valor de P x
Efectos Principales
Tratamientos
Método de
aplicación
Lugar de
inoculación
Área
lesión Tukey
T0: Testigo Patrón 4,9y
az
T1: Metalosate cobre: 0,3 L/200 L Foliar Patrón 3,3 b
T2: Metalosate cobre: 0,5 L/200 L Foliar Patrón 2,0 c
T3: Metalosate cobre: 0,7 L/200 L Foliar Patrón 1,8 cd
T4: Met. cobre: 0,5 L/200 L + Met. Boro: 0,2 L/200 L Foliar Patrón 1,1 de
T5: Prochloraz: 0,3 L/200 L Drench Patrón 3,5 b
T6: Thiabendazol: 0,4 L/200 L Drench Patrón 0,5 e
Promedio 2,4
)
ocasionadas por Lasiodiplodia en vid en la zona del patrón en aplicaciones preventivas.
0,0
2,0
4,0
6,0
8,0
10,0
Areadedlesiónencm2
Tratamientos

10
Estrategias curativas
en vid en la zona de la variedad. Evaluación de las estrategias de aplicación curativas.
Valor de P x
Efectos Principales
Tratamientos
Método de
aplicación
Lugar de
inoculación
Área
lesión Tukey
T0: Testigo Variedad 6,4y
az
T1: Metalosate cobre: 0,3 L/200 L Foliar Variedad 6,0 ab
T2: Metalosate cobre: 0,5 L/200 L Foliar Variedad 4,9 bc
T3: Metalosate cobre: 0,7 L/200 L Foliar Variedad 4,7 c
T4: Met. cobre: 0,5 L/200 L + Met. Boro: 0,2 L/200 L Foliar Variedad 4,5 c
T5: Prochloraz: 0,3 L/200 L Drench Variedad 4,3 c
T6: Thiabendazol: 0,4 L/200 L Drench Variedad 2,1 d
Promedio 4,7
)
ocasionadas por Lasiodiplodia en vid en la zona de la variedad en aplicaciones curativas.
0,0
2,0
4,0
6,0
8,0
10,0
Areadedlesiónencm2
Tratamientos

11
en vid en la zona del patrón. Evaluación de las estrategias de aplicación curativas.
Factor
Valor de P x
Área de lesión en cm2
Efectos Principales
Tratamientos
Método de
aplicación
Lugar de
inoculación
Área
lesión Tukey
T0: Testigo Patrón 4.3y
az
T1: Metalosate cobre: 0,3 L/200 L Foliar Patrón 4.7 a
T4: Met. cobre: 0,5 L/200 L + Met. Boro: 0,2 L/200 L Foliar Patrón 4.0 a
T5: Prochloraz: 0,3 L/200 L Drench Patrón 2.4 b
T6: Thiabendazol: 0,4 L/200 L Drench Patrón 1.7 b
Promedio 3,6
)
ocasionadas por Lasiodiplodia en vid en la zona del patrón en aplicaciones curativas.
0,0
2,0
4,0
6,0
8,0
10,0
Areadedlesiónencm2
Tratamientos

12
Tabla 7. Cálculo del porcentaje de control de cada tratamiento del ensayo de la eficacia de
metalosate cobre y otros productos sobre Lasiodiplodia theobromae en vid.
Aplicaciones de índole
preventiva
Aplicaciones de índole
curativa
Tratamientos Variedad Patrón Variedad Patrón
T1: Metalosate cobre: 0,3 L/200 L 34,3z
31,9 5,7 0,0
T2: Metalosate cobre: 0,5 L/200 L 59,7 59,8 22,8 1,6
T3: Metalosate cobre: 0,7 L/200 L 63,7 62,9 26,2 8,5
T4: Met. cobre: 0,5 L/200 L + Met. Boro: 0,2 L/200 L 63,1 65,2 8,4 3,6
T5: Prochloraz: 0,3 L/200 L 22,8 29,1 32,0 43,2
T6: Thiabendazol: 0,4 L/200 L 88,9 89,5 67,8 59,6
z Valores calculados mediante la siguiente fórmula: % control = 100-(área de lesión en el tratamiento tratado x
100/área de lesión en el tratamiento Testigo)

13
3. CONCLUSIONES
1. Se evaluaron dos estrategias de aplicación de productos, aplicaciones preventivas y
curativas. Los resultados obtenidos indican que mejores resultados se obtuvieron mediante
las aplicaciones preventivas, pues los promedios de área de lesión generada por L.
theobromae, en general, fueron menores comparadas con las áreas de lesión registradas
para las aplicaciones curativas (Tabla 2).
2. Todas las dosis evaluadas de Metalosate cobre disminuyeron las áreas de lesión por L.
thebromae, particularmente cuando los productos se aplicaron de forma preventiva (Tablas
3 y 4).
3. Cuando las aplicaciones se realizaron de forma preventiva, para las áreas de lesión
registradas en la zona de la variedad, los mejores tratamientos fueron T6 (Thiabendazol: 0,4
L/200 L) y T4 (Metalosate cobre: 0,5 L/200 L + Metalosate Boro: 0,2 L/200 L), sin
diferencias estadísticas significativas entre tratamientos. Seguidamente se ubicó el
tratamiento T3 (Metalosate cobre: 0,7 L/200 L); el tratamiento T2 (Metalosate cobre: 0,5
L/200 L) no difirió significativamente del tratamiento T3 (Tabla 3). La misma tendencia de
eficacia de tratamientos se registró cuando se evaluaron las áreas de lesión en la zona del
patrón (Tabla 4).
4. Cuando las aplicaciones se realizaron de forma curativa, para las áreas de lesión registradas
en la zona de la variedad, el mejor tratamiento fue T6 (Thiabendazol: 0,4 L/200 L).
Seguidamente se ubicaron los tratamientos T3, T4 y T5, sin diferencias estadísticas
significativas entre tratamientos (Tabla 5). Para las áreas de lesión registradas en la zona del
patrón, los mejores tratamientos fueron T6 y T5, sin diferencias estadísticas significativas
entre tratamientos. Seguidamente se ubicaron el resto de tratamientos sin diferencias
significativas entre ellos (Tabla 6).
5. Los porcentajes de control obtenidos (Tabla 7) son consistentes con los resultados de la
separación de medias, y muestra que los tratamientos T4, T3 y T2 obtuvieron los mayores
porcentajes de control.
6. Entre los productos químicos evaluados se registraron diferencias estadísticas significativas
entre los tratamientos prochloraz y thiabendazol. La menor eficacia se obtuvo con el
producto prochloraz, quien obtuvo las mayores áreas de lesión en patrón y variedad. Estos
resultados pueden deberse a las diferencias de movilidad de estos productos en suelo y al
interior de la planta.

14
7. Los resultados obtenidos indican que las aplicaciones preventivas de Metalosate Cobre
tienen un efecto directo sobre Lasiodiplodia theobromae, patógeno asociado al “brazo
muerto” de la vid, una de las enfermedades más relevantes del complejo de “hongos de
madera” de vid. Lasiodiplodia afecta los tejidos internos de los órganos que afecta, e
interfieren directamente con el libre paso de agua y nutrientes en la planta.
4. RECOMENDACIONES
Utilizar metalosate cobre en dosis superiores a 0,5 L/200 L. Un efecto de sinergia se
observó cuando este producto se utilizó conjuntamente con metalosate boro.

15
Evaluación de la eficacia de Metalosate cobre sobre infecciones por Lasiodiplodia
theobromae bajo condiciones controladas. Ica, abril – junio de 2015.
Aplicaciones preventivas (Evaluación de la zona de la variedad)
Procedimiento ANOVA
Variable dependiente: Y
Suma de Cuadrado de
Fuente DF cuadrados la media F-Valor Pr > F
Modelo 6 308.9820000 51.4970000 57.36 <.0001
Error 63 56.5610000 0.8977937
Total corregido 69 365.5430000
R-cuadrado Coef Var Raíz MSE Y Media
0.845269 26.99486 0.947520 3.510000
Cuadrado de
Fuente DF Anova SS la media F-Valor Pr > F
TRAT 6 308.9820000 51.4970000 57.36 <.0001
Tukey Agrupamiento Media N TRAT
A 7.0300 10 0
B 5.4300 10 5
B 4.6200 10 1
C 2.8300 10 2
D C 2.5500 10 3
D E 1.3300 10 4
E 0.7800 10 6
Aplicaciones preventivas (Evaluación de la zona del patrón)
Procedimiento ANOVA
Suma de Cuadrado de
Modelo 6 140.0268571 23.3378095 52.92 <.0001
Error 63 27.7840000 0.4410159
0.834433 27.31276 0.664090 2.431429
Cuadrado de
TRAT 6 140.0268571 23.3378095 52.92 <.0001
A 4.8900 10 0
B 3.4400 10 5
B 3.3300 10 1
C 1.9700 10 2
D C 1.8100 10 3
D E 1.0600 10 4
E 0.5200 10 6

16
Aplicaciones Curativas (Evaluación de la zona de la variedad)
Procedimiento ANOVA
Suma de Cuadrado de
Modelo 6 116.4868571 19.4144762 28.59 <.0001
Error 63 42.7880000 0.6791746
0.731357 17.56651 0.824121 4.691429
Cuadrado de
TRAT 6 116.4868571 19.4144762 28.59 <.0001
A 6.3600 10 0
B A 6.0000 10 1
B C 4.9100 10 2
C 4.7100 10 3
C 4.4700 10 4
C 4.3300 10 5
D 2.0600 10 6
Aplicaciones Curativas (Evaluación de la zona del patrón)
Procedimiento ANOVA
Suma de Cuadrado de
Modelo 6 71.39142857 11.89857143 28.86 <.0001
Error 63 25.97200000 0.41225397
0.733247 17.72275 0.642070 3.622857
Cuadrado de
TRAT 6 71.39142857 11.89857143 28.86 <.0001
A 4.6900 10 1
A 4.3100 10 0
A 4.2500 10 2

17
A 3.9800 10 4
A 3.9400 10 3
B 2.4400 10 5
B 1.7500 10 6

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