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EDINSON MORALES CHAVEZ
 Facultad de Medicina Humana
METABOLISMO BACTERIANO
 NECESIDADES METABOLICAS
Carbohidratos, proteínas, lípidos para formar “bloques”
  y luego células.
Necesidades mínimas: C, N, Energía, H2O y iones.
Elementos esenciales: C,O,N,H,S,P
Iones : Na,K,Ca,Mg,Cl
Compuestos de las enzimas: Fe, Zn,Mo,Se,Co,Cu,Ni
HIERRO
 Nuestro cuerpo secuestra hierro (esconde) para
  disminuir su disponibilidad como método de
  protección.
 Las bacterias concentran el hierro a partir de la
  secreción de proteínas llamadas SIDEROFOROS.
OXIGENO
 Es esencial para el humano pero tóxico para algunas
  bacterias ej. Cl. Perfringens que causa la Gangrena
  gaseosa el cual es un anaerobio estricto.
 M. tuberculosis utiliza el O2 para su crecimiento el
  cual es un aerobio estricto.
 Otras que pueden crecer en presencia o ausencia de O2
  llamadas anaerobias facultativas.
 Las bacterias aerobias producen : Dismutasa y
 Catalasa las cuales actúan inhibiendo la acción de los
 productos tóxicos del metabolismo aerobio.
NUTRIENTES Y BACTERIAS
 De acuerdo a sus necesidades nutricionales las
  bacterias pueden ser:
 AUTOTROFAS: Litotrofas, dependen de sustancias
  químicas inorgánicas y de una fuente de C (CO2) para
  producir E .
 HETEROTROFOS: Organotrofas, depende de
  sustancias orgánicas, es decir necesitan de C orgánico.
GRUPOS NUTRICIONALES
      Grupo         Fuente de   Fuente de
    nutricional      carbono     energía
  Fotoautótrofos      CO2         Luz
                    Compuesto
 Fotoheterótrofos                 Luz
                     orgánico
                                Sales
 Quimioautótrofos     CO2
                             inorgánicas
                   Compuesto Compuesto
Quimioheterótrofos
                    orgánico   orgánico
 De lo anterior se puede concluir que hay bacterias
  altamente selectivas y otras no.
 Poco selectivas: E. coli
 Muy selectivas : T. pallidum
METABOLISMO Y CONVERSION DE
LA E
 Para poder sobrevivir las células tienen que gastar E.
  La E se obtiene del ATP a partir de la degradación de
  sustancias orgánicas (Carbohidratos, lípidos y
  proteínas).
 A este proceso de degradación de sustratos y su
  conversión en E utilizable se denomina
  CATABOLISMO.
 La E obtenida servirá para luego emplearse en la
  síntesis de los compuestos celulares (pared celular,
  proteínas, ácidos grasos, ácidos nucleicos), a esto se
  denomina ANABOLISMO.
 La interrelación de estos 2 procesos se denomina
  METABOLISMO INTERMEDIO.
NUTRICIÓN BACTERIANA


       METABOLISMO



               BIOSÍNTESIS
NUTRIENTES      ENERGÍA
PROCESO METABOLICO
 Se inicia con la HIDRÓLISIS de :
 MACROMOLECULAS: proteínas, carbohidratos y
  lípidos.
 MICROMOLECULAS: péptidos, monosacáridos y
  ácidos grasos, estos son transportados a través de la
  membrana celular al interior del citoplasma a través de
  Mecanismos activos y pasivos.
TRANSPORTE
 Pueden utilizar Carrier o MPT .
 De la degradación de estos metabolitos se forma
  finalmente ACIDO PIRUVICO (a través de 1 o más
  rutas).
 A partir del Ac. Pirúvico se pueden formar :
1.Producción nueva de E
2.Síntesis de nuevos carbohidratos, lípidos, proteínas y
  ácidos nucleicos.
TIPOS DE REACCIONES METABÓLICAS

     Reacciones energéticas

     Reacciones de biosíntesis

     Reacciones de polimerización

     Reacciones de ensamblaje
REACCIONES ENERGÉTICAS:
FASES
  Digestión extracelular

  Paso a través de la envuelta:
      Difusión simple
      Difusión facilitada
      Transporte activo

  Degradación y obtención de energía
Difusión      Difusión
 simple       facilitada



  Transporte pasivo        Transporte activo
METABOLISMO DE LA GLUCOSA
 Es el carbohidrato por excelencia, aquí se trata de
  explicar cómo las bacterias utilizan o metabolizan la
  glucosa para la obtención de E u otros sustratos.
 Lo hacen por varios procesos: fermentación,
  respiración anaerobia o aerobia .
REACCIONES ENERGÉTICAS:

  Vía glucolítica de Embder
   Meyerhof
  Vía pentosa fosfato
  Ciclo de Krebs


    Vía de Entner Doudoroff
REACCIONES ENERGÉTICAS

  Fermentación:
    Aceptor final de e- compuesto orgánico
    1 glucosa/2 ATP

  Respiración:
    Aceptor final de e- compuesto inorgánico
    1 glucosa/38 ATP
RUTA DE EMBDEN-MEYERHOF-
PARNAS
 Aquí el catabolismo de la glucosa utiliza 3 rutas para
  convertir la glucosa en PIRUVATO .
1.Ruta glucolítica(EMP), es la más frecuente y se
  consigue piruvato.
2.Ruta del NADH
3.Ruta de la fermentación del piruvato.
 Ocurre en aerobiosis y anaerobiosis.
 La reacción inicia con la formación de Glucosa 6
 fosfato y se genera ATP a partir de ADP con la
 participación de NADH hasta su conversión final en
 Piruvato .
CICLO DEL ACIDO TRICARBOXILICO
 Permite generar una cantidad mucho mayor de E
 Se forma también un GPT (TRIFOSFATO DE
  GUANOSINA).
 Es el principal mecanismo de generación de ATP.
 No sólo permite obtener E a partir de glucosa, sino
  también de los a.a y los ácidos grasos.
 El ciclo del ATC constituye un medio por el cual los
  carbonos procedentes de los lípidos (Acetil CoA)
  pueden desviarse hacia la producción de E o la
  generación de nuevos productos orgánicos.
Ciclo de Krebs

o

Ciclo del ácido
tricarboxílico
(ATC)
 El ATC es un ciclo ANFIBOLICO, es decir que puede
 actuar en situaciones anabólicas y/o catabólicas de la
 célula.
RUTA DE LAS PENTOSAS FOSFATO
 Llamado también Ruta de las Hexosas Monofosfatos.
 Utiliza 2 enzimas: Transcetolasas y Transaldolasas,
  las cuales generan diferentes tipos de azúcares.
 Se da en aerobiosis.
 También interviene el NADH.
 Ribulosa 5 fosfato y luego en Ribosa 5 fosfato .
REACCIONES DE BIOSÍNTESIS
 Formación de elementos estructurales:
     Ácidos grasos
     Azúcares
     Aminoácidos
     Nucleótidos
REACCIONES DE POLIMERIZACIÓN Y
ENSAMBLAJE

     Formación de macromoléculas:
          ADN, ARN, proteínas,
          peptidoglicano, fosfolípidos,
          LPS...

     Formación de las distintas
      estructuras celulares
REGULACIÓN DEL METABOLISMO

   Regulación de la actividad enzimática

   Regulación de la síntesis
    enzimática:
         Represión
         Inducción
CRECIMIENTO BACTERIANO
 La replicación bacteriana es un proceso coordinado
  durante el cual se producen 2 células hijas idénticas.
 Para el crecimiento bacteriano debe existir los
  suficientes metabolitos para permitir la síntesis de los
  componentes bacterianos.
REPLICACION CROMOSOMICA
 Se inicia en la membrana y cada cromosoma hijo se
 ancla a una porción diferente de la misma. Los
 procesos de formación de la membrana bacteriana,
 síntesis de peptidoglucanos y división celular se llevan
 a cabo en forma coordinada y secuencial, a medida que
 crece la membrana bacteriana los cromosomas hijos se
 separan.
 El comienzo de la replicación cromosómica también
 inicia el proceso de división celular, la cual se puede
 visualizar por el comienzo de la formación del tabique
 que separará a las 2 células hijas, incluso pueden darse
 otras replicaciones antes de que haya terminado la
 replicación inicial .
División celular: fisión binaria
REPRODUCCIÓN BACTERIANA:
     FISIÓN BINARIA
                          Cromosoma

                           Membrana
                           Pared

                División nuclear




                       Septación




          Separación
REPRODUCCIÓN BACTERIANA:
     FISIÓN BINARIA
AGOTAMIENTO DE LOS
METABOLITOS
 La inanición o la aparición de productos metabólicos
 tóxicos (alcohol) desencadena la producción de
 ALARMONAS, que son sustancias químicas las cuales
 provocan la interrupción de la síntesis de DNA y de los
 procesos de degradación.
 Los ribosomas se desintegran para formar precursores
 de desoxirribonucleótidos; el peptidoglucano y las
 proteínas se degradan y la célula se contrae .
 Puede empezar la formación del tabique aunque es
 posible que la célula no se divida por lo que morirá un
 gran número de células, esto en algunas especies da
 inicio a un proceso de ESPORULACION.
DINAMICA POBLACIONAL
 Cuando se añaden bacterias a un medio de cultivo,
 antes de empezar a dividirse ha de transcurrir un cierto
 tiempo de adaptación al nuevo ambiente, éste
 intervalo se conoce como Fase de Latencia del
 Crecimiento.
 En cambio durante la llamada Fase Logarítmica o
 Exponencial, las bacterias se dividen y duplican su
 población a intervalos regulares hasta alcanzar el
 máximo nivel posible según el tipo de medio y las
 condiciones imperantes.
Nt = No x 2 t/d
 Nt= N° de bacterias que han crecido después de un
  cierto tiempo (t)
 t/d = cociente del tiempo transcurrido por el tiempo
  de duplicación
 No = N° inicial de bacterias
 Finalmente cuando los metabolitos del cultivo se
 agotan o bien aparece en su seno alguna sustancia
 tóxica, en ese momento las bacterias interrumpen su
 crecimiento y pasan a la llamada Fase Estacionaria ,
 la cual da inicio a la Fase de Declive y muerte
 bacteriana.
Crecimiento de un microorganismo en
      medio de cultivo líquido




         1- Fase de latencia
         2- Fase exponencial
         3- Fase estacionaria
         4- Fase de muerte
MEDIOS DE CULTIVO
CRECIMIENTO BACTERIANO:
TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO

  Según su estado físico:
        - Líquidos o caldos

        - Sólidos (Agar al 1.5-2%)

        - Semisólidos

  Según crecimiento que permitan:
        - Enriquecidos

        - De enriquecimiento

        - Selectivos

        - Diferenciales
CRECIMIENTO BACTERIANO:
FACTORES


   1.   Temperatura
   2.    pH
   3.    Medio de cultivo
   4.    Inóculo
TEMPERATURA
pH

     A.   Acidófilos
     B.   Neutrófilos
     C.   Alcalófilos
ESTUDIO CUALITATIVO DEL
CRECIMIENTO BACTERIANO
 Medios líquidos:
 Turbidez



 Medios sólidos:
 Colonias
COLONIAS BACTERIANAS. TIPOS



    Forma         CIRCULAR     IRREGULAR     FILAMENTOSA          RIZOIDE


  Superficie         CONVEXA         PLANA UMBILICADA CRATERIFORME




   Bordes      REDONDEADO ONDULADO     FILAMENTOSO   ESPICULADO   LOBULADO
1: alfa-hemólisis

    Colonias aisladas




      alfa-hemólisis



        Cultivo cofluente



2: beta-hemólisis

        Colonias aisladas


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Metabolismo bacteriano: procesos metabólicos y factores que afectan el crecimiento

  • 1. EDINSON MORALES CHAVEZ Facultad de Medicina Humana
  • 2. METABOLISMO BACTERIANO  NECESIDADES METABOLICAS Carbohidratos, proteínas, lípidos para formar “bloques” y luego células. Necesidades mínimas: C, N, Energía, H2O y iones. Elementos esenciales: C,O,N,H,S,P Iones : Na,K,Ca,Mg,Cl Compuestos de las enzimas: Fe, Zn,Mo,Se,Co,Cu,Ni
  • 3. HIERRO  Nuestro cuerpo secuestra hierro (esconde) para disminuir su disponibilidad como método de protección.  Las bacterias concentran el hierro a partir de la secreción de proteínas llamadas SIDEROFOROS.
  • 4. OXIGENO  Es esencial para el humano pero tóxico para algunas bacterias ej. Cl. Perfringens que causa la Gangrena gaseosa el cual es un anaerobio estricto.  M. tuberculosis utiliza el O2 para su crecimiento el cual es un aerobio estricto.  Otras que pueden crecer en presencia o ausencia de O2 llamadas anaerobias facultativas.
  • 5.  Las bacterias aerobias producen : Dismutasa y Catalasa las cuales actúan inhibiendo la acción de los productos tóxicos del metabolismo aerobio.
  • 6. NUTRIENTES Y BACTERIAS  De acuerdo a sus necesidades nutricionales las bacterias pueden ser:  AUTOTROFAS: Litotrofas, dependen de sustancias químicas inorgánicas y de una fuente de C (CO2) para producir E .  HETEROTROFOS: Organotrofas, depende de sustancias orgánicas, es decir necesitan de C orgánico.
  • 7. GRUPOS NUTRICIONALES Grupo Fuente de Fuente de nutricional carbono energía Fotoautótrofos CO2 Luz Compuesto Fotoheterótrofos Luz orgánico Sales Quimioautótrofos CO2 inorgánicas Compuesto Compuesto Quimioheterótrofos orgánico orgánico
  • 8.  De lo anterior se puede concluir que hay bacterias altamente selectivas y otras no.  Poco selectivas: E. coli  Muy selectivas : T. pallidum
  • 9. METABOLISMO Y CONVERSION DE LA E  Para poder sobrevivir las células tienen que gastar E. La E se obtiene del ATP a partir de la degradación de sustancias orgánicas (Carbohidratos, lípidos y proteínas).  A este proceso de degradación de sustratos y su conversión en E utilizable se denomina CATABOLISMO.
  • 10.  La E obtenida servirá para luego emplearse en la síntesis de los compuestos celulares (pared celular, proteínas, ácidos grasos, ácidos nucleicos), a esto se denomina ANABOLISMO.  La interrelación de estos 2 procesos se denomina METABOLISMO INTERMEDIO.
  • 11. NUTRICIÓN BACTERIANA METABOLISMO BIOSÍNTESIS NUTRIENTES ENERGÍA
  • 12. PROCESO METABOLICO  Se inicia con la HIDRÓLISIS de :  MACROMOLECULAS: proteínas, carbohidratos y lípidos.  MICROMOLECULAS: péptidos, monosacáridos y ácidos grasos, estos son transportados a través de la membrana celular al interior del citoplasma a través de Mecanismos activos y pasivos.
  • 13. TRANSPORTE  Pueden utilizar Carrier o MPT .  De la degradación de estos metabolitos se forma finalmente ACIDO PIRUVICO (a través de 1 o más rutas).  A partir del Ac. Pirúvico se pueden formar : 1.Producción nueva de E 2.Síntesis de nuevos carbohidratos, lípidos, proteínas y ácidos nucleicos.
  • 14. TIPOS DE REACCIONES METABÓLICAS Reacciones energéticas Reacciones de biosíntesis Reacciones de polimerización Reacciones de ensamblaje
  • 15. REACCIONES ENERGÉTICAS: FASES  Digestión extracelular  Paso a través de la envuelta:  Difusión simple  Difusión facilitada  Transporte activo  Degradación y obtención de energía
  • 16. Difusión Difusión simple facilitada Transporte pasivo Transporte activo
  • 17. METABOLISMO DE LA GLUCOSA  Es el carbohidrato por excelencia, aquí se trata de explicar cómo las bacterias utilizan o metabolizan la glucosa para la obtención de E u otros sustratos.  Lo hacen por varios procesos: fermentación, respiración anaerobia o aerobia .
  • 18. REACCIONES ENERGÉTICAS:  Vía glucolítica de Embder Meyerhof  Vía pentosa fosfato  Ciclo de Krebs  Vía de Entner Doudoroff
  • 19. REACCIONES ENERGÉTICAS  Fermentación:  Aceptor final de e- compuesto orgánico  1 glucosa/2 ATP  Respiración:  Aceptor final de e- compuesto inorgánico  1 glucosa/38 ATP
  • 20. RUTA DE EMBDEN-MEYERHOF- PARNAS  Aquí el catabolismo de la glucosa utiliza 3 rutas para convertir la glucosa en PIRUVATO . 1.Ruta glucolítica(EMP), es la más frecuente y se consigue piruvato. 2.Ruta del NADH 3.Ruta de la fermentación del piruvato.
  • 21.  Ocurre en aerobiosis y anaerobiosis.  La reacción inicia con la formación de Glucosa 6 fosfato y se genera ATP a partir de ADP con la participación de NADH hasta su conversión final en Piruvato .
  • 22.
  • 23. CICLO DEL ACIDO TRICARBOXILICO  Permite generar una cantidad mucho mayor de E  Se forma también un GPT (TRIFOSFATO DE GUANOSINA).  Es el principal mecanismo de generación de ATP.  No sólo permite obtener E a partir de glucosa, sino también de los a.a y los ácidos grasos.  El ciclo del ATC constituye un medio por el cual los carbonos procedentes de los lípidos (Acetil CoA) pueden desviarse hacia la producción de E o la generación de nuevos productos orgánicos.
  • 24. Ciclo de Krebs o Ciclo del ácido tricarboxílico (ATC)
  • 25.
  • 26.  El ATC es un ciclo ANFIBOLICO, es decir que puede actuar en situaciones anabólicas y/o catabólicas de la célula.
  • 27. RUTA DE LAS PENTOSAS FOSFATO  Llamado también Ruta de las Hexosas Monofosfatos.  Utiliza 2 enzimas: Transcetolasas y Transaldolasas, las cuales generan diferentes tipos de azúcares.  Se da en aerobiosis.  También interviene el NADH.  Ribulosa 5 fosfato y luego en Ribosa 5 fosfato .
  • 28. REACCIONES DE BIOSÍNTESIS  Formación de elementos estructurales:  Ácidos grasos  Azúcares  Aminoácidos  Nucleótidos
  • 29. REACCIONES DE POLIMERIZACIÓN Y ENSAMBLAJE  Formación de macromoléculas: ADN, ARN, proteínas, peptidoglicano, fosfolípidos, LPS...  Formación de las distintas estructuras celulares
  • 30. REGULACIÓN DEL METABOLISMO  Regulación de la actividad enzimática  Regulación de la síntesis enzimática:  Represión  Inducción
  • 31. CRECIMIENTO BACTERIANO  La replicación bacteriana es un proceso coordinado durante el cual se producen 2 células hijas idénticas.  Para el crecimiento bacteriano debe existir los suficientes metabolitos para permitir la síntesis de los componentes bacterianos.
  • 32. REPLICACION CROMOSOMICA  Se inicia en la membrana y cada cromosoma hijo se ancla a una porción diferente de la misma. Los procesos de formación de la membrana bacteriana, síntesis de peptidoglucanos y división celular se llevan a cabo en forma coordinada y secuencial, a medida que crece la membrana bacteriana los cromosomas hijos se separan.
  • 33.  El comienzo de la replicación cromosómica también inicia el proceso de división celular, la cual se puede visualizar por el comienzo de la formación del tabique que separará a las 2 células hijas, incluso pueden darse otras replicaciones antes de que haya terminado la replicación inicial .
  • 35. REPRODUCCIÓN BACTERIANA: FISIÓN BINARIA Cromosoma Membrana Pared División nuclear Septación Separación
  • 36. REPRODUCCIÓN BACTERIANA: FISIÓN BINARIA
  • 37. AGOTAMIENTO DE LOS METABOLITOS  La inanición o la aparición de productos metabólicos tóxicos (alcohol) desencadena la producción de ALARMONAS, que son sustancias químicas las cuales provocan la interrupción de la síntesis de DNA y de los procesos de degradación.
  • 38.  Los ribosomas se desintegran para formar precursores de desoxirribonucleótidos; el peptidoglucano y las proteínas se degradan y la célula se contrae .
  • 39.  Puede empezar la formación del tabique aunque es posible que la célula no se divida por lo que morirá un gran número de células, esto en algunas especies da inicio a un proceso de ESPORULACION.
  • 40. DINAMICA POBLACIONAL  Cuando se añaden bacterias a un medio de cultivo, antes de empezar a dividirse ha de transcurrir un cierto tiempo de adaptación al nuevo ambiente, éste intervalo se conoce como Fase de Latencia del Crecimiento.
  • 41.  En cambio durante la llamada Fase Logarítmica o Exponencial, las bacterias se dividen y duplican su población a intervalos regulares hasta alcanzar el máximo nivel posible según el tipo de medio y las condiciones imperantes.
  • 42. Nt = No x 2 t/d  Nt= N° de bacterias que han crecido después de un cierto tiempo (t)  t/d = cociente del tiempo transcurrido por el tiempo de duplicación  No = N° inicial de bacterias
  • 43.  Finalmente cuando los metabolitos del cultivo se agotan o bien aparece en su seno alguna sustancia tóxica, en ese momento las bacterias interrumpen su crecimiento y pasan a la llamada Fase Estacionaria , la cual da inicio a la Fase de Declive y muerte bacteriana.
  • 44. Crecimiento de un microorganismo en medio de cultivo líquido 1- Fase de latencia 2- Fase exponencial 3- Fase estacionaria 4- Fase de muerte
  • 46. CRECIMIENTO BACTERIANO: TIPOS DE MEDIOS DE CULTIVO  Según su estado físico: - Líquidos o caldos - Sólidos (Agar al 1.5-2%) - Semisólidos  Según crecimiento que permitan: - Enriquecidos - De enriquecimiento - Selectivos - Diferenciales
  • 47. CRECIMIENTO BACTERIANO: FACTORES 1. Temperatura 2. pH 3. Medio de cultivo 4. Inóculo
  • 49. pH A. Acidófilos B. Neutrófilos C. Alcalófilos
  • 50. ESTUDIO CUALITATIVO DEL CRECIMIENTO BACTERIANO  Medios líquidos: Turbidez  Medios sólidos: Colonias
  • 51. COLONIAS BACTERIANAS. TIPOS Forma CIRCULAR IRREGULAR FILAMENTOSA RIZOIDE Superficie CONVEXA PLANA UMBILICADA CRATERIFORME Bordes REDONDEADO ONDULADO FILAMENTOSO ESPICULADO LOBULADO
  • 52.
  • 53.
  • 54. 1: alfa-hemólisis Colonias aisladas alfa-hemólisis Cultivo cofluente 2: beta-hemólisis Colonias aisladas beta-hemólisis