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Aspectos Epidemiológicos e Sanitários 
relacionados a Micobactérias 
Micobactérias Atípicas e 
Saúde Pública 
Alessandra Marques Cardoso 
Mestre e Doutoranda em Medicina Tropical - Microbiologia 
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Universidade Federal de Goiás 
Goiânia, 03.10.2008
Espécies de Mycobacterium: patogenia ao homem 
Patogênicas Patogênicas em 
potencial 
Saprófitas 
M. tuberculosis M. kansasii M. gordonae 
M. bovis M. marinum M. flavenscens 
M. africanum M. avium M. gastri 
M. caprae 
M. paratuberculosis 
M. microti 
M. ammoense 
M. nonchromogenicum 
M. thermoresistible 
M. pinnipeddi M. simiae M. triviale 
M. scrofulaceum M. phlei 
M. azulgai M. smegmatis 
M. leprae M. chelonae M. vaccae 
M. abscessus 
M. massiliense 
Complexo M. tuberculosis
PAREDE CELULAR DAS MICOBACTÉRIAS 
Cápsula 
glicolipídios 
Ácidos micólicos ou 
Mycomembrana 
peptideoglicana 
arabinogalactana 
membrana 
citoplasmática
PROPRIEDADES FÍSICAS DAS MICOBACTÉRIAS 
• Grande resistência ao ambiente seco. 
• Baixa resistência aos agentes físicos (calor, luz). 
• Resistência variável aos agentes químicos: 
- fenóis, iodo, álcool e gluteraldeído são relativamente ativos. 
- mercúrio, bisfenol, amônia quaternária não tem atividade. 
- clorohexidina e cloro baixa atividade. 
• MNT são naturalmente resistentes à: RIF, PZA, INH, 
sulfonamidas, tetraciclinas e fluoroquinolonas.
Árvore filogenética baseada nas sequências 
do gene hsp65 de MNT 
M. senegalense M. mucogenicum 
M. abscessus 
M. fortuitum 
M. peregrunum 
M. smegmatis 
M. chelonae 
A barra indica 1% de divergência estimada
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
• O complexo M. tuberculosis e o M. leprae são 
patógenos humanos conhecidos. 
• Outras espécies de micobactérias são usualmente 
saprófitas, enquanto algumas podem ser 
oportunistas e até letais. 
• Existem mais de 50 espécies de micobactérias 
associadas a doenças em humanos. 
Jordan et. al., 2007
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium leprae
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
• Anteriormente as espécies de micobactérias que 
não causavam tuberculose eram descritas como: 
micobactérias atípicas ou “mycobacteria other than 
tubercle bacilli” (MOTT). 
• A nomenclatura corrente, adotada pela American 
Thoracic Society, descreve esses microrganismos 
como micobactérias não-tuberculosas (MNT). 
Jordan et. al., 2007
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
• MNT estão associadas a determinados ambientes (água, 
solo) e têm emergido como uma das principais causas de 
infecções respiratórias oportunistas. 
• Entre as diferentes MNT, o complexo M. chelonae-abscessus 
destaca-se como importante grupo que consiste 
em três membros proximamente relacionados: 
M. chelonae 
M. abscessus 
M. immunogenum 
Wilson et. al., 2001
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Mycobacterium abscessus 
• Causa infecções cutâneas localizadas e∕ou generalizadas. 
• MNT mais freqüente nas infecções de tecidos moles e nas 
infecções em pacientes respiratórios crônicos (FC). 
• Infecções associadas a trauma com materiais 
contaminados, injeções, procedimentos cirúrgicos não 
estéreis e implantação de corpos estranhos.
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Mycobacterium massiliense 
• Descrito como uma nova espécie por Adékambi et al., 2004 
(Marseille → Massilia → massiliense). 
• Patógeno oportunista, envolvido em infecção de ferida, 
formação de abscesso e pneumonia.
Árvore filogenética da combinação da seqüência dos genes rpoB e recA de 
M. massiliense e outras espécies. Barra indica 2% de divergência na seqüência 
de nucleotídeos. Adékambi et al., 2004.
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Mycobacterium bolletii 
• Recentemente caracterizado e reconhecido como espécie 
distinta por Adékambi et al., 2006.
Árvore filogenética do gene rpoB de M. bolletii e outras espécies. Barra indica 
2% de divergência na seqüência de nucleotídeos. Adékambi et al., 2006.
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
• Surtos de infecção hospitalar por M. abscessus e M. 
chelonae têm sido descritos desde 1970. 
• Por que as MNT podem causar infecções hospitalares? 
1. Presença destes microrganismos na água do hospital; 
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Existem vários relatos de infecção por MNT após... 
• Traumas 
• Cirurgias diversas 
• Cirurgia cardíaca 
• Cirurgia plástica facial 
• Cirurgia dermatológica 
• Mamoplastia 
• Acupuntura 
• Lipoaspiração 
• Injeção de silicone 
• Implante de mama 
• Pedicure 
• Injeção subcutânea 
• Injeção de antibióticos 
• Injeção de corticóides 
• Injeção de medicamentos 
alternativos 
• Implantação de próteses 
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Brown-Elliott et al., 2002; Uslan et al., 2006
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Têm sido reportados surtos e pseudo-surtos relacionados a: 
• Úlceras de pele e tecido subcutâneo; 
• Infecções pulmonares; 
• Bacteremia relacionada a diálise e cateteres; 
• Procedimentos de broncoscopia, laparoscopia e artroscopia; 
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Freitas et al., 2003
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
• Relatos de surtos de infecções causadas por MNT 
estão aumentando em todo o mundo. 
• Informações sobre a relação genética dos isolados 
obtidos durante o surto podem prover oportunidades 
para rápida intervenção.
Emergence of nosocomial Mycobacterium massiliense infection in Goiás, Brazil. 
Cardoso et al., 2008, Microbes and Infection.
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Diagnóstico Laboratorial 
• Coleta: biópsia ou amostra de tecido, secreção de 
abscessos (tubo estéril sem conservante ou fixador). 
• Amostras não aceitáveis: em swab; em formol. 
• Coloração de Ziehl-Neelsen: sensibilidade - 104 céls./mL. 
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Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Diagnóstico Laboratorial – identificação por testes fenotípicos: 
tempo e temperatura de crescimento, produção de pigmento 
MCR < 7 dias 
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Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Jordan et al., 2007 (The society for Applied Microbiology, Letters in Applied Microbiology)
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Diagnóstico Laboratorial 
Testes fenotípicos - Identificação bioquímica 
• Acúmulo de niacina: M. tuberculosis (+). 
• Redução do nitrato: M. tuberculosis (+). 
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das espécies do complexo M. tuberculosis. 
• TCH (hidrazina do ácido tiofeno): distingue M. tuberculosis 
(resistente) das outras espécies do complexo M. tuberculosis 
(sensíveis).
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Diagnóstico Laboratorial 
Identificação molecular por PRA-hsp65 
Produto da PCR hsp65 submetido à digestão enzimática 
Telenti et. al. 1993 J. Clin. Microbiol.
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Devallois et. al, 1997 
210 e 60 
160 e 60 
M. massiliense 
ou 
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M. abscessus
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Tratamento 
• Sensíveis à amicacina e claritromicina. 
• Teste de suscetibilidade in vitro pelo método de microdiluição em caldo. 
• NCCLS, 2003 (M24-A) – Antimycobacterial Susceptibility Testing for 
Rapidly Growing Mycobacteria: amicacina, cefoxitina, ciprofloxacina, 
claritromicina, doxiciclina, sulfametoxazol, tobramicina, linezolida. 
*ANVISA/OPAS/OMS, Edital n°13 - Monitoramento e Prevenção da Resistência Bacteriana em Serviços de Saúde.
Micobactérias Atípicas e Saúde Pública 
Genotipagem por PFGE 
Emergence of nosocomial Mycobacterium massiliense infection in Goiás, Brazil. 
Cardoso et al., 2008, Microbes and Infection.
Agradecimentos 
• Laboratório de Bacteriologia molecular - IPTSP – UFG 
Dr. André Kipnis 
• Laboratório de Imunopatologia – IPTSP - UFG 
Dra. Ana Paula Junqueira-Kipnis 
Eduardo Martins 
• Laboratório de Micobactérias – EPM - UNIFESP 
Dra. Sylvia Cardoso Leão 
Dra. Cristina Viana-Niero 
• LACEN - GO 
Sueli Lemes Alves 
• COMCIES – SMS – Goiânia - GO 
Zilah Cândida Pereira das Neves 
• Apoio financeiro: CNPq, OPAS-ANVISA
Obrigada! 
alemarques5@yahoo.com.br 
“O mais importante da vida não é a situação 
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Oliver W. Holmes, 1809 -1894

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  • 1. Aspectos Epidemiológicos e Sanitários relacionados a Micobactérias Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Alessandra Marques Cardoso Mestre e Doutoranda em Medicina Tropical - Microbiologia Laboratório de Bacteriologia Molecular Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública Universidade Federal de Goiás Goiânia, 03.10.2008
  • 2. Espécies de Mycobacterium: patogenia ao homem Patogênicas Patogênicas em potencial Saprófitas M. tuberculosis M. kansasii M. gordonae M. bovis M. marinum M. flavenscens M. africanum M. avium M. gastri M. caprae M. paratuberculosis M. microti M. ammoense M. nonchromogenicum M. thermoresistible M. pinnipeddi M. simiae M. triviale M. scrofulaceum M. phlei M. azulgai M. smegmatis M. leprae M. chelonae M. vaccae M. abscessus M. massiliense Complexo M. tuberculosis
  • 3. PAREDE CELULAR DAS MICOBACTÉRIAS Cápsula glicolipídios Ácidos micólicos ou Mycomembrana peptideoglicana arabinogalactana membrana citoplasmática
  • 4. PROPRIEDADES FÍSICAS DAS MICOBACTÉRIAS • Grande resistência ao ambiente seco. • Baixa resistência aos agentes físicos (calor, luz). • Resistência variável aos agentes químicos: - fenóis, iodo, álcool e gluteraldeído são relativamente ativos. - mercúrio, bisfenol, amônia quaternária não tem atividade. - clorohexidina e cloro baixa atividade. • MNT são naturalmente resistentes à: RIF, PZA, INH, sulfonamidas, tetraciclinas e fluoroquinolonas.
  • 5. Árvore filogenética baseada nas sequências do gene hsp65 de MNT M. senegalense M. mucogenicum M. abscessus M. fortuitum M. peregrunum M. smegmatis M. chelonae A barra indica 1% de divergência estimada
  • 6. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública • O complexo M. tuberculosis e o M. leprae são patógenos humanos conhecidos. • Outras espécies de micobactérias são usualmente saprófitas, enquanto algumas podem ser oportunistas e até letais. • Existem mais de 50 espécies de micobactérias associadas a doenças em humanos. Jordan et. al., 2007
  • 9. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública • Anteriormente as espécies de micobactérias que não causavam tuberculose eram descritas como: micobactérias atípicas ou “mycobacteria other than tubercle bacilli” (MOTT). • A nomenclatura corrente, adotada pela American Thoracic Society, descreve esses microrganismos como micobactérias não-tuberculosas (MNT). Jordan et. al., 2007
  • 10. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública • MNT estão associadas a determinados ambientes (água, solo) e têm emergido como uma das principais causas de infecções respiratórias oportunistas. • Entre as diferentes MNT, o complexo M. chelonae-abscessus destaca-se como importante grupo que consiste em três membros proximamente relacionados: M. chelonae M. abscessus M. immunogenum Wilson et. al., 2001
  • 11. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública
  • 12. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Mycobacterium abscessus • Causa infecções cutâneas localizadas e∕ou generalizadas. • MNT mais freqüente nas infecções de tecidos moles e nas infecções em pacientes respiratórios crônicos (FC). • Infecções associadas a trauma com materiais contaminados, injeções, procedimentos cirúrgicos não estéreis e implantação de corpos estranhos.
  • 13. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Mycobacterium massiliense • Descrito como uma nova espécie por Adékambi et al., 2004 (Marseille → Massilia → massiliense). • Patógeno oportunista, envolvido em infecção de ferida, formação de abscesso e pneumonia.
  • 14. Árvore filogenética da combinação da seqüência dos genes rpoB e recA de M. massiliense e outras espécies. Barra indica 2% de divergência na seqüência de nucleotídeos. Adékambi et al., 2004.
  • 15. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Mycobacterium bolletii • Recentemente caracterizado e reconhecido como espécie distinta por Adékambi et al., 2006.
  • 16. Árvore filogenética do gene rpoB de M. bolletii e outras espécies. Barra indica 2% de divergência na seqüência de nucleotídeos. Adékambi et al., 2006.
  • 17. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública • Surtos de infecção hospitalar por M. abscessus e M. chelonae têm sido descritos desde 1970. • Por que as MNT podem causar infecções hospitalares? 1. Presença destes microrganismos na água do hospital; 2. Relativa resistência ao glutaraldeído ou cloro; 3. Habilidade para sobreviver e crescer em água destilada e em amebas; 4. Envolvimento na formação de biofilmes; Adékambi et. al., 2006; Zhang et. al., 1997
  • 18. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Existem vários relatos de infecção por MNT após... • Traumas • Cirurgias diversas • Cirurgia cardíaca • Cirurgia plástica facial • Cirurgia dermatológica • Mamoplastia • Acupuntura • Lipoaspiração • Injeção de silicone • Implante de mama • Pedicure • Injeção subcutânea • Injeção de antibióticos • Injeção de corticóides • Injeção de medicamentos alternativos • Implantação de próteses • etc... Brown-Elliott et al., 2002; Uslan et al., 2006
  • 19. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Têm sido reportados surtos e pseudo-surtos relacionados a: • Úlceras de pele e tecido subcutâneo; • Infecções pulmonares; • Bacteremia relacionada a diálise e cateteres; • Procedimentos de broncoscopia, laparoscopia e artroscopia; • LASIK (keratitis after laser in situ keratomileusis). Freitas et al., 2003
  • 20. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública • Relatos de surtos de infecções causadas por MNT estão aumentando em todo o mundo. • Informações sobre a relação genética dos isolados obtidos durante o surto podem prover oportunidades para rápida intervenção.
  • 21. Emergence of nosocomial Mycobacterium massiliense infection in Goiás, Brazil. Cardoso et al., 2008, Microbes and Infection.
  • 22. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Diagnóstico Laboratorial • Coleta: biópsia ou amostra de tecido, secreção de abscessos (tubo estéril sem conservante ou fixador). • Amostras não aceitáveis: em swab; em formol. • Coloração de Ziehl-Neelsen: sensibilidade - 104 céls./mL. • Cultura em Lowenstein-Jensen: 37°C e 25°- 30°C.
  • 23. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Diagnóstico Laboratorial – identificação por testes fenotípicos: tempo e temperatura de crescimento, produção de pigmento MCR < 7 dias MCL > 7 dias
  • 24. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Jordan et al., 2007 (The society for Applied Microbiology, Letters in Applied Microbiology)
  • 25. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Diagnóstico Laboratorial Testes fenotípicos - Identificação bioquímica • Acúmulo de niacina: M. tuberculosis (+). • Redução do nitrato: M. tuberculosis (+). • Ácido p-nitrobenzóico (PNB-500 mg/mL): inibe crescimento das espécies do complexo M. tuberculosis. • TCH (hidrazina do ácido tiofeno): distingue M. tuberculosis (resistente) das outras espécies do complexo M. tuberculosis (sensíveis).
  • 26. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Diagnóstico Laboratorial Identificação molecular por PRA-hsp65 Produto da PCR hsp65 submetido à digestão enzimática Telenti et. al. 1993 J. Clin. Microbiol.
  • 27. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Devallois et. al, 1997 210 e 60 160 e 60 M. massiliense ou M. bolletii M. abscessus
  • 28. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Tratamento • Sensíveis à amicacina e claritromicina. • Teste de suscetibilidade in vitro pelo método de microdiluição em caldo. • NCCLS, 2003 (M24-A) – Antimycobacterial Susceptibility Testing for Rapidly Growing Mycobacteria: amicacina, cefoxitina, ciprofloxacina, claritromicina, doxiciclina, sulfametoxazol, tobramicina, linezolida. *ANVISA/OPAS/OMS, Edital n°13 - Monitoramento e Prevenção da Resistência Bacteriana em Serviços de Saúde.
  • 29. Micobactérias Atípicas e Saúde Pública Genotipagem por PFGE Emergence of nosocomial Mycobacterium massiliense infection in Goiás, Brazil. Cardoso et al., 2008, Microbes and Infection.
  • 30. Agradecimentos • Laboratório de Bacteriologia molecular - IPTSP – UFG Dr. André Kipnis • Laboratório de Imunopatologia – IPTSP - UFG Dra. Ana Paula Junqueira-Kipnis Eduardo Martins • Laboratório de Micobactérias – EPM - UNIFESP Dra. Sylvia Cardoso Leão Dra. Cristina Viana-Niero • LACEN - GO Sueli Lemes Alves • COMCIES – SMS – Goiânia - GO Zilah Cândida Pereira das Neves • Apoio financeiro: CNPq, OPAS-ANVISA
  • 31. Obrigada! alemarques5@yahoo.com.br “O mais importante da vida não é a situação em que estamos, mas a direção para a qual nos movemos.” Oliver W. Holmes, 1809 -1894