O documento discute a curadoria manual da anotação funcional de genomas procariotos. Ele explica que a anotação automática pode conter erros que precisam ser corrigidos, como atribuições funcionais incorretas e entradas erradas em bancos de dados. A curadoria manual usa ferramentas como Artemis e alinhamentos de sequências para revisar a anotação, corrigir problemas como regiões não cobertas e frameshifts, e melhorar a qualidade geral da anotação.
1. Curadoria da Anotação
funcional de genomas
procariotos
Alex Ranieri J Lima
Graduando em Biomedicina
Laboratório de Tecnologia Biomolecular – UFPA
CIT - IEC
2. Anotação Funcional
Processo que adiciona informações a
uma sequência bruta de DNA.
Automática (RAST, FgenesB_Annotator,
MaGe)
Curadoria manual (Editores de
sequências, Artemis)
3. Anotação Automática
Integra informações de diversos bancos
Algoritmos de comparação (BLASTn)
Evidência do gene (predito, confirmado)
Regiões de RNA
4.
5.
6.
7. Visualizando os Resultados
Artemis
ORFs (Open Read Frame)
CDSs (CoDing Sequences)
OriC (Genes de origem da replicação do
cromossomo)
8.
9. Ocorrência de Erros
Anotação funcional automatizada se
baseia em similaridade – atribuições
errôneas de funções.
Erro do “melhor hit”.
Entradas errôneas nos bancos de
dados.
10. Corrigindo Erros
Regiões não cobertas;
Erro na montagem;
Utilização do Artemis e um visualizador
de alinhamentos (CLC Genomics
Workbench)
15. Frameshifts
Realizar BLAST das duas CDSs
Verificar se possuem os mesmos
identificadores, tamanho, produto, etc.
Verificar o alinhamento das leituras e
tentar corrigir o problema – unir as
CDSs
20. Conclusões
A curadoria manual da anotação
permite corrigir:
Nomes de Genes e Produtos
Identificar se pseudogenes são
verdadeiros ou falsos, neste último caso
corrigi-los
Melhorar a qualidade da anotação