SlideShare ist ein Scribd-Unternehmen logo
1 von 5
Downloaden Sie, um offline zu lesen
Treponema+VDRL ViraBlot®, Диагностический набор для определения IgG, IgM
Иммунодиагностический метод для качественного определения специфических IgG или IgM антител к Treponema pallidum и количественного
определения VDRL специфических IgG, или IgM антител в человеческой сыворотке.
Treponema + VDRL ViraBlotquot; IgG, IgM использует Т. pallidum специфические белки p47, p44.5, p17, p15 (1) и дополнительный VDRL специфический
антиген (8).
Каждая полоска имеет интегрированную систему контроля, включая контроль сыворотки, конъюгат-контроль и пороговый контроль.
                                                IgG диагностический набор 25 тестов           Номер изделия: V-TPBGSK
 Treponema+VDRL ViraBlot
                                                IgM диагностический набор 25 тестов           Номер изделия: V-TPBMSK
 Treponema+VDRL ViraBlot
 Исследуемый образец:                           20 мкл сыворотки
 Время проведения теста                         90 минут
 Хранение/стабильность                          около. 12 месяцев при 2-8
Компоненты комплекта
 25 полосок        Полоски с антигенами: полоски нитроцеллюлозы с системой контроля           (Изделие номер: V-TPBG/MAS)
                   Treponema и VDRL-антигенами в аналитическом разделе; код полосок: TG
                   для IgG, ТМ для IgM, пронумерованы от 1-25, или от 26-50.
 4,5 мл            Конъюгат щелочной фосфатазы с антителами против IgG или IgM                (Изделие номер: V-UVNG/MKI45)
                   человека, 10-кратный концентрат
 100 мл            Буфер для разведения/промывки, 10-кратный концентрат                       (Изделие номер: V-TPNFWP)
 1 упаковка        Порошок для разведения/промывки, 5г                                        (Изделие номер: V-UVNUMP)
 90 мл             Раствор хромоген/субстрата, готовый к использованию.                       (ИзделиеНомер: V-UVNUCS)
 1 экз.            Инструкция по использованию Treponema+VDRL ViraBlot ®
                   диагностический набор для определения lgG, IgM
 1 экз.            Treponema+VDRL ViraBlot ® протокол оценки IgG или IgM с
                   изображением полоски положительного контроля (PC TP)
Буфер для разведения/промывки, порошок для разведения/промывки взаимозаменяемы между Treponema+VDRL IgG и IgM тестами Раствор
хромоген/субстрата и конъюгаты взаимозаменяемы между различными ViraStripe ®, соотв. ViraBlot ® тестами.
Дополнительно в наличии:
 0,33 мл           Трепонема IgG положительный контроль               человеческий, готовый к             Изделие № V-TPBGPK
                                                                      использованию
 0,33 мл           Трепонема Ig M положительный контроль              человеческий, готовый к             Изделие № V-TPBMPK
                                                                      использованию
 0,33 мл           Трепонема IgG, IgM отрицательный контроль          человеческий, готовый к             Изделие № V-TPBFNK
                                                                      использованию
 0,33 мл           Трепонема IgG слабо положительный контроль         человеческий, готовый к             Изделие № V-TPBGCO
                                                                      использованию
 0,33 мл           Трепонема IgM слабо положительный контроль,        человеческий, готовый к             Изделие № V-TPBMCO)
                                                                      использованию
 100 мл            Treponema, Буфер для разведения/промывки,                                              Изделие № V-TPNFWP)
                   Treponema, 10x концентрат, специфичный для
                   Treponema+VDRL ViraBlot ® IgG, IgM комплект
                   для тестирования
 50 листов         Трепонема ViraScan ® протоколы оценки для                                              Изделие № V-TPNUEP
                   использования с ViraScan ® программным
                   обеспечением
Хранение и стабильность реактивов
 Полоски с антигенами: полоски в закрытых пакетах устойчивы до        Рабочий раствор буфера: пригоден к использованию 2 недели, если
 истечения срока годности, если хранятся при 2 - 8°C. Пакеты с        хранится при 2 - 8°C. Рабочий раствор буфера может быть сохранен
 неиспользованными полосками хранить плотно закрытыми.                в определенных количествах в течение более длительного времени в
 Конъюгат, 10-кратный концентрат: устойчив до истечения срока         замороженном состоянии.
 годности, если хранится при 2-8°C.                                   Раствор хромоген/субстрата: устойчив до истечения срока годности,
 Рабочий раствор: использовать немедленно.                            если хранится при 2 - 8°C. Хранить в темноте! Избегать сильного
 Буфер для разведения/промывки_Treponema: концентрат и                освещения!
 порошок:устойчив до истечения срока годности если хранится при 2
 - 8°C.
Подготовка реактивов и образца
                                                                      Конъюгат, рабочий раствор:
 Перед использованием доведите все компоненты теста до
                                                                      Растворите необходимое количество 10-кратного концентрата
 комнатной температуры (20-25°C).
                                                                      согласно таблице 1 в течение первой процедуры промывки (шаг 7
 Полоски антигена:
                                                                      проведение теста).
 Тщательно отделите требуемое число полосок при помощи пинцета.
                                                                      Другие реактивы: готовы к использованию.
 Касайтесь полосок пинцетом только в области маркировки.
                                                                      Образцы пациента:
 Рабочий раствор буфера для разведения/промывки: чтобы
                                                                      Используйте 20 мкл неразведенной сыворотки пациента на одно
 подготовить рабочий раствор буфера, растворите 10-кратный
                                                                      испытание.
 концентрат 1:10 дистиллированной водой (100 мл концентрата +
                                                                      Дополнительный доступный контроль:
 900 мл дистиллированной воды), и добавьте порошок для
                                                                      Используйте 100 мкл каждого из контролей (слабоположительный,
 разведения/промывки до полного растворения. Поместите рабочий
                                                                      положительный и отрицательный) неразведенным на серию
 раствор буфера на 10 - 15 минут на магнитную мешалку, pH = 7,5±
                                                                      испытаний.
 0,1.




                                                                                                                                     1
Таблица 1: Разведение конъюгат (сопряженного) рабочего раствора
       Число   Разбавитель /промывной буфер                               Конечный
                                                  Конъюгат - концентрат
       полос          рабочий раствор                                      объем
                                                         0,15 мл
                          1,35 мл                                          1,5 мл
         1                                    +
                                                         0,30 мл
                          2.70 мл                                          3,0 мл
         2                                    +
                                                         0.45 мл
                          4,05 мл                                          4,5 мл
         3                                    +
                                                         0,60 мл
                          5,40 мл                                          6,0 мл
         4                                    +
                          8,10 мл                        0,75 мл           7,5 мл
         5                                    +
                          8,10 мл                        0,90 мл           9,0 мл
         6                                    +
                          9,45 мл                        1,05 мл           10,5 мл
         7                                    +
                          10,80 мл                       1,20 мл           12.0 мл
         8                                    +
                          10,80 мл                       1,35 мл           13,5 мл
         9                                    +
                          13,50 мл                       1,50 мл           13,5 мл
        10                                    +
                          14,85 м                        1,65 мл           16,5 мл
        11                                    +
                          16,20 мл                       1,80 мл           18,0 мл
        12                                    +
                          17,55 мл                       1,95 мл           19,5 мл
        13                                    +
                          18,90 мл                       2,10 мл           21,0 мл
        14                                    +
                          20,25 мл                       2,25 мл           22,5 мл
        15                                    +
                          21,60 мл                       2,40 мл           24,0 мл
        16                                    +
                          22,95 мл                       2,55 мл           25,5 мл
        17                                    +
                          24,30 мл                       2,70 мл           27,0 мл
        18                                    +
                          25,65 мл                       2,85 мл           28,5 мл
        19                                    +
                          27,00 мл                       3,00 мл           30,0 мл
        20                                    +
                          28,35 мл                       3,15 мл           31,5 мл
        21                                    +
                          29,70 мл                       3,30 мл           33,0 мл
        22                                    +
                          31,05 мл                       3,45 мл           34,5 мл
        23                                    +
                          32,40 мл                       3,60 мл           36,0 мл
        24                                    +
                          33,75 мл                       3,75 мл           37,5 мл
        25                                    +
                          35,10 мл                       3,90 мл           39,0 мл
        26                                    +
                          36,45 мл                       4,05 мл           40,5 мл
        27                                    +
                          37,80 мл                       4,20 мл           42,0 мл
        28                                    +
                          39,15 мл                       4,35 мл           43,5 мл
        29                                    +
                          40,50 мл                       4,50 мл           45,0 мл
        30                                    +
                          41,85 мл                       4,65 мл           46,5 мл
        31                                    +
                          43,20 мл                       4,80 мл           48,0 мл
        32                                    +
                          44,55 мл                       4,95 мл           49,5 мл
        33                                    +
                          45,90 мл
        34                                    +          5,10ml            51,0ml
                          47,25 мл                       5.25 мл                     
                                                                           52,5 мл
        35                                    +
                          48,60 мл                       5,40 мл           54,0 мл
        36                                    +
                          49.95 мл                       5,55 мл           55,5 мл
        37                                    +
                          51,30 мл                       5.70 мл           57,0 мл
        38                                    +
                          52,65 мл                       5,85 мл           58,5 мл
        39                                    +
                          54,00 мл                       6,00 мл           60,0 мл
        40                                    +
                          55,35 мл                       6,15 мл           61,5 мл
        41                                    +
                          56,70 мл                       6,30 мл           63,0 мл
        42                                    +
                          58,05 мл                       6,45 мл           64,5 мл
        43                                    +
                          59,40 мл                       6,60 мл           66,0 мл
        44                                    +
                          60,75 мл                       6,75 мл           67,5 мл
        45                                    +
                          62,10 мл                       6,90 мл           69,0 мл
        46                                    +
                          63,45 мл                       7,05 мл           70,5 мл
        47                                    +
                          64,80 мл                       7,20 мл           72,0 мл
        48                                    +
                          66,15 мл                       7,35 мл           73,5 мл
        49                                    +

                         67,50 мл                        7,50 мл           75,0 мл
         50                                   +

Проведение теста:
 1. Ополоснуть инкубационную ванну буфером для                                Маркировать подносы несмываемым маркером. Удалять загрязнения
 разведения/промывки и удалить раствор.                                       кратким ополаскиванием буфером.
 2. Разместить по одной полоске в каждый канал.                               Разместить полосы в каналы подноса инкубации, одна полоса для каждого
                                                                              образца, соответственно для контроля, номером вверх. Используйте
                                                                              пинцет.
 3. Добавить в каждый канал по 1.5 мл буфера и                                Визуально удостоверьтесь, что полосы полностью смочены и не плавают
 инкубировать в течение 5 минут при комнатной температуре                     частично на поверхности буфера. Используйте платформу шейкера с
 на шейкере.                                                                  частотой колебаний 40 циклов/мин.
 4. Добавить 20 мкл каждого образца пациента или 100 мкл                      Пипеткой наносите контроль и образцы непосредственно на номер
 каждого контроля соответственно                                              полоски, в то время как происходят колебания платформы.
 5. Инкубировать при колебаниях в течение 30 минут                            Работайте при комнатной температуре (20 - 25°C).
 6.Декантировать жидкость                                                     Полоски прилипают к инкубационному подносу. Удалите оставшуюся
                                                                              жидкость с инкубационного подноса на фильтровальной бумаге.
 7. Промывка 3 раза по 5 минут: добавить 1.5 мл буфера для                    Промойте на платформе шейкера. Во время процесса промывки готовят
 разведения/промывки, выдержать 5 мин., декантировать                         рабочий раствор конъюгата согласно приложенной таблице разведений.
 жидкость полностью.                                                          Осушите поднос инкубации на фильтровальной бумаге, чтобы удалить
                                                                              оставшуюся жидкость.
 8. Нанести пипеткой 1.5 мл рабочего раствора буфера в                        Визуально удостоверьтесь, что полоски смочены полностью и не плавают
 каждый канал.                                                                частично на поверхности буфера.
 9. Выдержать в течение 15 минут, при колебаниях, при
 комнатной температуре.
 10. Декантировать жидкость.                                                  Удалите оставшуюся жидкость, тщательно осушая поднос инкубации на
                                                                              фильтровальной бумаге.
 11. Промывка 3 раза по 5 минут (см. пункт 7).
 12. Добавить 1.5 мл дистиллированной воды
 13. Выдержать в течение 1 минуты, при колебаниях при
 комнатной температуре.
 14. Декантировать жидкость.                                                  Удалите оставшуюся жидкость, тщательно осушая поднос инкубации на
                                                                              фильтровальной бумаге.
 15. Добавить 1.5 мл раствора хромоген/субстрата.                             Визуально удостоверьтесь, что полосы полностью смочены и не плавают
                                                                              частично на поверхности раствора хромоген/субстрата.
 16. Выдержать на платформе шейкера:                                          Остановите реакцию, когда полоса порогового контроля станет видимой,
 Treponema IgG: 5-15 минут                                                    Внимание:
 Treponema IgM: 5-15 минут.                                                   Превышение срока инкубации вызывает появление фоновых пятен. Полоса
                                                                              порогового контроля для IgG или IgM в секции контроля
 17. Остановить реакцию, удалив жидкость.                                     Удалите оставшуюся жидкость, тщательно осушая поднос инкубации на
                                                                              фильтровальной бумаге.
                                                                                                                                                      2
18. Промывка: 3 раза дистиллированной водой 1.5 мл.        После инкубации.

19. Высушить полоски для интерпретации результатов.        Удалите влажные полосы из каналов, используя пинцет. Разместите
                                                           влажные полосы на фильтровальной бумаге и высушите на воздухе перед
                                                           интерпретацией данных.
Принцип теста.
При помощи Treponema+VDRL ViraBlot quot; Treponema cпецифическиe и липоид-антитела могут быть определены в человеческой сыворотке в пределах
одного испытания.
Специфические антитела связываются с установленным антигеном на полоске во время инкубации сыворотки. Конъюгат щелочной фосфатазы
связывается с комплексом антиген-антитело во время своей инкубации. Щелочная фосфатаза конвертирует хромоген/субстрат и окрашивает
комплекс антиген-антитело на полоске в фиолетовый цвет.
Процедуры промывки между инкубацией сыворотки, конъюгата и хромоген/субстрата удаляют непрореагировавшие реактивы.
Иммунологический тест с интегрированной системой контроля: зеленая линия разделения делит полоску на секцию контроля и аналитическую
секцию. Секция контроля содержит контроль сыворотки, три конъюгат-контроля (IgG, IgA, IgM) и пороговый контроль. Аналитическая секция
содержит специфичные Treponema- и липоид- антигены.
Оценка результатов теста
  1. Подготовить протокол     Регистрируйте данные в протоколе оценки. Приклейте или закрепите пленкой полоски на протокол. Поместите
  оценки:                     зеленую линию разделения точно на напечатанную линию разделения в протоколе.
2. Действиельность            Тест считается действительным, если полосы функционального контроля, конъюгат контроля и порогового
  теста                       контроля становится четко видимыми на каждой полоске. Если нет реакции по крайней мере одного из них, тест
                              считается недействительным и должен быть проведен повторно при точном соблюдении инструкций.
                              Не оценивайте недействительные полоски.
  3. Оценка образцов          Протокол оценки включает в себя напечатанную полосу положительного контроля (обозначенную как PC TP).
  пациента                    Выровняйте разделяющие линии на полоске пациента и на полоске положительного контроля. Позиция полосы
                              показана на полоске положительного контроля. Определите полосы на полоске пациента и отметьте их в
                              протоколе. Неопределенные полосы не оцениваются.
  4. Оценка полос с           В соответствии с лабораторными качественными методиками, пороговый контроль должен использоваться для
  помощью порогового          каждой серии испытаний (11). Полоса порогового контроля интегрирована в контрольной секции каждой
  контроля:                   полоски диагностического теста Treponema+VDRL ViraBlot. Интенсивность полосы порогового контроля
                              отражает границу, по которой оценивают полосы.
                              Полосу считают реактивной, если ее интенсивность равна или выше, чем интенсивность полосы порогового
  Оценка lgG, lgM             контроля. Четкие полосы отмечаются знаком X в протоколе. Полосу считают нечеткой, если ее интенсивность
                              меньше, чем интенсивность полосы порогового контроля.
  Treponema –
  специфических полос         Нечеткие полосы отмечают знаком (X) в протоколе.
                              Каждая из пяти VDRL полос оценивается в соответствии со следующим руководством:
                              0 - нет VDRL полос или их интенсивность меньше, чем интенсивность полосы порогового контроля.
  Единицы оценки VDRL 1 - VDRL-полоса по интенсивности равна или сильнее выражена, чем полоса порогового контроля.
                              2 - VDRL-полосы по интенсивности много выше, чем полоса порогового контроля.
  ViraBlot
                              Отметьте дополнительно единицы оценки VDRL Vira Blot в протоколе.
Оценка образцов пациента.
Полосы нужно рассматривать как симптомы болезни. Для заключительного клинического диагноза все результаты этого и других испытаний должны
быть соотнесены с клинической историей, эпидемиологическими данными и другими данными, доступными лечащему врачу.
Антигены 47 kD, 44.5 kD, 17 kD, 15 kD характеризируются, как специфические для Treponema. Могут появиться дополнительные не характерные
полосы, но они не оцениваются.
IgGTreponema ViraBlot ®:
  Идентифицированные полосы / kD                результат               интерпретация
  Нет или одна - три нечетких полосы,           отрицательный           Специфические антитела против антигенов Treponema pallidum не
  Или одна четкая полоса или                                            обнаружены.
  Одна четкая полоса и одна нечеткая полоса
  Одна четкая полоса и две или три нечеткие     сомнительный            Предполагается инфекция Treponema pallidum.Проверить
  полосы                                                                вторичный образец через 2-3 недели для контроля. Дополнительно
  Или четыре нечеткие полосы                                            исследовать антитела на lgM в случае подозрения на первичную
                                                                        инфекцию.
  По крайней мере две четких полосы             положительный           lgG-антитела против Treponema pallidum определены. Инфекция
                                                                        T.pallida весьма вероятна.
IgM Treponema ViraBlot ®:
  Идентифицированные полосы / kD                результат                 интерпретация

 Нет полос                                    Отрицательный           Не обнаружено специфических антител к антигенам T.pallida
 Или одна четкая полоса p44.5,
 Или от одной до четырех нечетких полос
  Одна четкая полоса из трех p47, p17 или Сомнительный                Предполагается инфекция T.pallida.Проверить повторный
                                                                      образец через 2-3-недели для контроля. Дополнительно
 p15,
 Или одна четкая полоса p44.5 и от одной до                           исследовать антитела на lgG в случае подозрения на первичную
 трех нечетких полос                                                  инфекцию.
 По крайней мере одна четкая полоса из трех: Положительный            lgM-антитела против Treponema pallidum определены. Инфекция
 p47, p17 или p15 и одна из трех нечетких                             T.pallida весьма вероятна
 полос
Оценка VDRL специфических полос:
Качественная оценка VDRL реакции:
                            Значение                        Интерпретация
 VDRLViraBlot
 Единицы оценки
                            Отрицательное по VDRL           Не обнаружено липоидных антител. В случае клинического подозрения на
 0
                                                            первичную инфекцию T.pallida рекомендуется последующий повторный
                                                            контроль.
 ≥1                         Реактивное по VDRL              Результат указывает на первичную или прошлую инфекцию T.pallida, В
                                                            зависимости от клинической картины тест может указывать на
                                                            необходимость терапевтического лечения.
                                                                                                                                 3
Количественная оценка VDRL реакции:
Treponema+VDRL ViraBlotquot; IgG – первый диагностический тест, допускающий количественную оценку VDRL реакции на нитроцеллюлозе. Его
результаты могут указывать на потребность лечения или на успешность проводимой терапии. Единицы оценки VDRL ViraBlot' коррелируют с общим
VDRL, соотв. кардиолипин- титром, как указано ниже (5):

              Активность липоид-     Титр VDRL         Титр              Результаты               Интерпретация
 VDRL
              антител                тест              Кардиолипина
 ViraBlotquot;
                                                       CFT тест
 Units
              нет                    ≤1; 1             ≤1; 1             Отрицательный             Не обнаружено липоид-антител.
 0
                                                                                                   Рекомендуется последующий
                                                                                                   контроль в течение короткого
                                                                                                   времени при подозрении на
                                                                                                   первичную инфекцию T.pallida
               Низкая                                                    Реактивный                Результат указывает на первичную
 1-2                                   1:1-1:8         1:1-1:8
                                                                                                   или прошлую, активную в
               Средняя                                                   Реактивный
 3-6                                   1:8-1:32        1:16-1:64
                                                                                                   настоящее время инфекцию
               высокая                                                   Реактивный
 7-10                                  1:16-1:64       1:32-1:256
                                                                                                   T.pallida.
           Замечание: Всегда обращайте внимание на более высокие значения при диагностике IgG или IgM с помощью VDRL теста
Характеристики полос Treponema+VDRL ViraBlot ®(2)
    Молекулярный вес           Антиген                     Замечания
                               Главный мембранный          Высокоспецифические дляTreponema. Липопротеин, активирующий клетки
    P 47 kD
                               протеин                     эндотелия.
                               Мембранный липопротеин      Высокоспецифичен для Treponema
    P 44.5 kD
                               Главный мембранный          Высокоспецифичен для T.pallidum
    P 17 kD
                               протеин

   Трепонема специфические IgG, IgM-антитела. через 2-3 недели специфический IgM синтезируется спустя некоторое время и
   после первичной инфекции сифилиса, появляются антитела обнаруживается только с очень низкими титрами. Из-за этого факта
   IgM.(3,4). После коррективного лечения в первичной стадии титр вторичные и многократные инфекции часто обнаруживаются только
   IgM-антител снижается ниже нормы обнаружения в течение 6 повышением титров IgG-антител, а не появлением IgM-антител.
   месяцев. После коррективного лечения во вторичной или третичной VDRL антитела: В ранней стадии сифилиса уровень
   стадии IgM антитела обнаруживаются до 24 месяцев (4). В случае чувствительности VDRL низок; испытание является реактивным у
   отсутствия или недостаточного лечения IgM антитела могут всех пациентов во вторичной стадии. Также отмечается большое
   сохраняться в течение многих лет. В этом случае инфекция может количество неспецифичных результатов. Только при
   перейти в хроническую скрытую стадию (3,4). У некоторых комбинированном использовании Treponema+VDRL ViraBlot ® IgG
   пациентов, не получающих терапию, Трепонема-специфические и IgM, VDRL реактивность может быть оценена правильно в
   IgM-антитела исчезают в случае хронической инфекции (около. 2 отношении титра антител и контроля терапии (7,10).
   %), в то время как высокие титры IgG-антител присутствуют. Поэтому значение VDRL испытания - главным образом
   Предполагается, что синтез IgM-антител блокирован в естественных существенно для контроля терапии. Четырехкратное увеличение
   условиях высоким титром IgG-антитела в случаях хронической титра в последующем образце указывает на инфекцию, ре-
   инфекции (4). Нет различия между первичной и вторичной инфекцию или неудачу терапии. Четырехкратное снижение титра в
   инфекцией, если первичная инфекция была вылечена своевременно последующем образце указывает на успешную терапию.
   до исчезновения IgG-антител (3). При вторичной инфекции, высоко 3. Применение лекарственных препаратов или иммуноглобулинов
   повышающейся титр IgG обнаруживается из-за бустерного эффекта может сказаться на результате (7).
   в случае остающихся IgG-антител после первичной инфекции.
   Одновременно может происходить ингибирование синтеза IgM-
   антител. В этом случае
                             Липопротеин                  Высокоспецифичен для T.pallida; липопротеин с функцией клеточного
   P 15 kD
                                                          медиатора иммунной реакции




                                                                                                                                  4
Диагностическая оценка
Таблица 2: Результаты Treponema+VDRL ViraBlot ® IgM, IgG и оценка диагностического теста
    По Muller und Hagedorn (7) *
    Для заключительной оценки объединенные результаты Treponema+VDRL IgG и IgM диагностических тестов должны интерпретироваться
    совместно.
         Трепонема                                                                Интерпретация
                             Treponema        VDRL ViraBlot ®      ViraBlot ®
      ViraBlot ® IgM      ViraBlot ® IgG             IgM              IgG
                                                                                  Нет указаний на инфекцию Treponema. В случаях подозрения
             0                   0                     0               0
                                                                                  на раннюю стадию рекомендуется последующий
                                                                                  кратковременный контроль, а также учет мягкого шанкра и
                                                                                  генитального герпеса.
                                                                                  Липоидные антитела указывают на активную инфекцию
             0                   0                    +                0
                                                                                  Treponema. Выделение липоид-антител может быть
             0                   0                     0               +
                                                                                  результатом других инфекций, аутоиммунных заболеваний
             0                   0                    +                +
                                                                                  или беременности.
                                                                                  Ранняя стадия инфекции Treponema
             +                   0                     0               0
                                                                                  Ранняя стадия инфекции Treponema. Липоидные антитела
             +                   0                    +                0
                                                                                  указывают на активную инфекцию.
                                                                                  Ранняя стадия инфекции Treponema. Липоидные антитела
             +                   0                     0               +
                                                                                  дополнительно указывают на активную инфекцию.
             +                   0                    +                +
                                                                                  Недавно перенесенная инфекция, вызванная Treponema. По
             +                   +                     0               0
                                                                                  клиническим симптомам -указание на активный вторичный
             +                   +                    +                0
                                                                                  сифилис.VDRL могут отсутствовать в некоторых случаях
             +                   +                     0               +
                                                                                  активной инфекции. В случаях подозрения на кон-натальный
             +                   +                    +                +
                                                                                  сифилис трепонема-специфически lgM антитела и VDRL
                                                                                  указывают на инфекцию у ребенка. lgG антитела могут
                                                                                  передаваться от матери.
                                                                                  Указание на прошлую инфекцию или сероконверсию. lgG
             0                   +                     0               0
                                                                                  антитела могут сохраняться годами.
                                                                                  Указание на инфекцию трепонемой. Липоидные антитела
             0                   +                    +                0
                                                                                  дополнительно указывают на активную инфекцию и
             0                   +                     0               +
                                                                                  необходимость лечения.
             0                   +                    +                +
    0- отрицательный
    +- положительный
    Параметры выполнения.
    Всесторонняя совокупность данных по аналитической и диагностической чувствительности, специфичности и воспроизводимости испытаний
    доступна при запросе.
    Предупреждения и предосторожности:
                1. Все человеческие компоненты сыворотки в наших Промыть большим количеством воды после контакта с кожей или
     изделиях были проверены на отсутствие ВИЧ - и HCV-антител и глазами. Ядовит при попадании внутрь! (см. листы данных о
                                                              компоненты безопасности).
                        Однако       все     человеческие
     Hbs-антигена.
     диагностического теста, а также образцы пациентов нужно считать 6. Раствор Хромоген/субстрата содержит BCIP и нитросиний
     потенциально инфекционными и обращаться с соответственными тетразолий. Избегайте контакта с кожей и глазами. В случае
                                                                            контакта с кожей и глазами промыть большим количеством воды.
     предосторожностями..
                                                                            7. Образцы и все потенциально загрязненные материалы должны
                2. Не набирать пипетку ртом.
                                                                            быть дезактивированы, используя установленные лабораторные
                3. Носить одноразовые перчатки при работе.
                                                                            методы, например путем автоклавирования при 121,5°C в течение
                4. Не есть, не пить и не курить в рабочей зоне.
                5. Конъюгат содержит азид натрия 0,1 %, контроль и 20 минут. Жидкие отходы смешать с гипохлоритом натрия в
                                                                            окончательной концентрации 1%-гипохлорита натрия. Выдержать
     буфер для разведения/промывки содержат 0,02 % тимеросал:
                                                                            30 минут для окончательной дезинфекции.
                Внимание: вреден для здоровья.

   Литература:
            1. BYRNE РЕ И другие. 1992 ОценкаTreponema pallidum испытание иммуноблота как подтверждающее испытание на сифилис J. Clin
Microbiol 30 1 15-122 2. НОРРИС. S.J. Treponema pallidum Группа Исследования Полипептидов, 1993. ПолипептидыTreponema pallidum: продвижение к
пониманию их структурной, функциональной, иммунологической ролей. Microbiol. Rev. 57: 750-779 3. MULLER, F., Лаборатория. .med, 7: 12-16, 4.
MULLER, F mta 1. 86-93. 1986 5. HAGEDORN. H J.: wissenschaftliches Gutachten zumTreponema ViraBlot, 2003. 6. АБЕЛЬ, U.: Ди Бюертанг diagnostischer
Tests. , S 7. Hippokrates Verlag. Штутгарт, 1993. 7. ТОМАС L. 1995, Labour und Diagnost. Med. Verlagsgesellschaft Марбург 8. MATTHEWS, H.. М., и ал,
1979 Уникальный состав липидаTreponema pallidum. Infect. Immun. 24: 713-719 9. JANDA. W.M., 1994. Иммунология p9.7 1-9.7 20 In H.D. Isenberg
(редактор). Клиническое руководство процедур микробиологии, vol 2 американскjt Общества Микробиологии, Вашингтон D.C.,. HAGEDORN H.-J. 2001
MIQ 16-200! Qualitatsstandards в der mikrobiologisch-infektiologischen Диагностический Сифилис. Urban*Fischer. Munchen. Йена 11. Rili-bak Bak-Richtlime
zur Quahtatssicherung quantitativer laboratoriumsmedizinischer Untersuchungen. (1.1 2002).




                                                                                                                                                  5

Weitere ähnliche Inhalte

Mehr von anzor

инструкция Liver Vira Stripe Ig G
инструкция Liver Vira Stripe   Ig Gинструкция Liver Vira Stripe   Ig G
инструкция Liver Vira Stripe Ig G
anzor
 
инструкция Borrelia Vira Stripe Lg G
инструкция Borrelia Vira Stripe   Lg Gинструкция Borrelia Vira Stripe   Lg G
инструкция Borrelia Vira Stripe Lg G
anzor
 
инструкция Borrelia Vira Stripe Ig M
инструкция Borrelia Vira Stripe Ig Mинструкция Borrelia Vira Stripe Ig M
инструкция Borrelia Vira Stripe Ig M
anzor
 
Svid
SvidSvid
Svid
anzor
 
Свидетельства
СвидетельстваСвидетельства
Свидетельства
anzor
 
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig ABordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
anzor
 
Yersinia Vira Blot ® Lg G, Ig A
Yersinia Vira Blot ® Lg G, Ig AYersinia Vira Blot ® Lg G, Ig A
Yersinia Vira Blot ® Lg G, Ig A
anzor
 
Liver Vira Stripe Ig G
Liver Vira Stripe  Ig GLiver Vira Stripe  Ig G
Liver Vira Stripe Ig G
anzor
 
Ebv Vira Stripe Lg G, Ig M
Ebv Vira Stripe  Lg G, Ig MEbv Vira Stripe  Lg G, Ig M
Ebv Vira Stripe Lg G, Ig M
anzor
 
Ena Vira Stripe® Ig G
Ena Vira Stripe® Ig GEna Vira Stripe® Ig G
Ena Vira Stripe® Ig G
anzor
 
Helicobacter Pylori Vira Blot® Ig G, Ig A
Helicobacter Pylori Vira Blot®  Ig G, Ig AHelicobacter Pylori Vira Blot®  Ig G, Ig A
Helicobacter Pylori Vira Blot® Ig G, Ig A
anzor
 
Borrelia Vira Stripe® Ig M
Borrelia Vira Stripe®  Ig MBorrelia Vira Stripe®  Ig M
Borrelia Vira Stripe® Ig M
anzor
 
Borrelia Virastripe Ig G
Borrelia Virastripe Ig GBorrelia Virastripe Ig G
Borrelia Virastripe Ig G
anzor
 
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig ABordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
anzor
 

Mehr von anzor (14)

инструкция Liver Vira Stripe Ig G
инструкция Liver Vira Stripe   Ig Gинструкция Liver Vira Stripe   Ig G
инструкция Liver Vira Stripe Ig G
 
инструкция Borrelia Vira Stripe Lg G
инструкция Borrelia Vira Stripe   Lg Gинструкция Borrelia Vira Stripe   Lg G
инструкция Borrelia Vira Stripe Lg G
 
инструкция Borrelia Vira Stripe Ig M
инструкция Borrelia Vira Stripe Ig Mинструкция Borrelia Vira Stripe Ig M
инструкция Borrelia Vira Stripe Ig M
 
Svid
SvidSvid
Svid
 
Свидетельства
СвидетельстваСвидетельства
Свидетельства
 
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig ABordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
 
Yersinia Vira Blot ® Lg G, Ig A
Yersinia Vira Blot ® Lg G, Ig AYersinia Vira Blot ® Lg G, Ig A
Yersinia Vira Blot ® Lg G, Ig A
 
Liver Vira Stripe Ig G
Liver Vira Stripe  Ig GLiver Vira Stripe  Ig G
Liver Vira Stripe Ig G
 
Ebv Vira Stripe Lg G, Ig M
Ebv Vira Stripe  Lg G, Ig MEbv Vira Stripe  Lg G, Ig M
Ebv Vira Stripe Lg G, Ig M
 
Ena Vira Stripe® Ig G
Ena Vira Stripe® Ig GEna Vira Stripe® Ig G
Ena Vira Stripe® Ig G
 
Helicobacter Pylori Vira Blot® Ig G, Ig A
Helicobacter Pylori Vira Blot®  Ig G, Ig AHelicobacter Pylori Vira Blot®  Ig G, Ig A
Helicobacter Pylori Vira Blot® Ig G, Ig A
 
Borrelia Vira Stripe® Ig M
Borrelia Vira Stripe®  Ig MBorrelia Vira Stripe®  Ig M
Borrelia Vira Stripe® Ig M
 
Borrelia Virastripe Ig G
Borrelia Virastripe Ig GBorrelia Virastripe Ig G
Borrelia Virastripe Ig G
 
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig ABordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
Bordetella Pertussis Vira Stripe® Ig G, Ig A
 

инструкция Treponema+Vdrl Vira Blot , Ig M

  • 1. Treponema+VDRL ViraBlot®, Диагностический набор для определения IgG, IgM Иммунодиагностический метод для качественного определения специфических IgG или IgM антител к Treponema pallidum и количественного определения VDRL специфических IgG, или IgM антител в человеческой сыворотке. Treponema + VDRL ViraBlotquot; IgG, IgM использует Т. pallidum специфические белки p47, p44.5, p17, p15 (1) и дополнительный VDRL специфический антиген (8). Каждая полоска имеет интегрированную систему контроля, включая контроль сыворотки, конъюгат-контроль и пороговый контроль. IgG диагностический набор 25 тестов Номер изделия: V-TPBGSK Treponema+VDRL ViraBlot IgM диагностический набор 25 тестов Номер изделия: V-TPBMSK Treponema+VDRL ViraBlot Исследуемый образец: 20 мкл сыворотки Время проведения теста 90 минут Хранение/стабильность около. 12 месяцев при 2-8 Компоненты комплекта 25 полосок Полоски с антигенами: полоски нитроцеллюлозы с системой контроля (Изделие номер: V-TPBG/MAS) Treponema и VDRL-антигенами в аналитическом разделе; код полосок: TG для IgG, ТМ для IgM, пронумерованы от 1-25, или от 26-50. 4,5 мл Конъюгат щелочной фосфатазы с антителами против IgG или IgM (Изделие номер: V-UVNG/MKI45) человека, 10-кратный концентрат 100 мл Буфер для разведения/промывки, 10-кратный концентрат (Изделие номер: V-TPNFWP) 1 упаковка Порошок для разведения/промывки, 5г (Изделие номер: V-UVNUMP) 90 мл Раствор хромоген/субстрата, готовый к использованию. (ИзделиеНомер: V-UVNUCS) 1 экз. Инструкция по использованию Treponema+VDRL ViraBlot ® диагностический набор для определения lgG, IgM 1 экз. Treponema+VDRL ViraBlot ® протокол оценки IgG или IgM с изображением полоски положительного контроля (PC TP) Буфер для разведения/промывки, порошок для разведения/промывки взаимозаменяемы между Treponema+VDRL IgG и IgM тестами Раствор хромоген/субстрата и конъюгаты взаимозаменяемы между различными ViraStripe ®, соотв. ViraBlot ® тестами. Дополнительно в наличии: 0,33 мл Трепонема IgG положительный контроль человеческий, готовый к Изделие № V-TPBGPK использованию 0,33 мл Трепонема Ig M положительный контроль человеческий, готовый к Изделие № V-TPBMPK использованию 0,33 мл Трепонема IgG, IgM отрицательный контроль человеческий, готовый к Изделие № V-TPBFNK использованию 0,33 мл Трепонема IgG слабо положительный контроль человеческий, готовый к Изделие № V-TPBGCO использованию 0,33 мл Трепонема IgM слабо положительный контроль, человеческий, готовый к Изделие № V-TPBMCO) использованию 100 мл Treponema, Буфер для разведения/промывки, Изделие № V-TPNFWP) Treponema, 10x концентрат, специфичный для Treponema+VDRL ViraBlot ® IgG, IgM комплект для тестирования 50 листов Трепонема ViraScan ® протоколы оценки для Изделие № V-TPNUEP использования с ViraScan ® программным обеспечением Хранение и стабильность реактивов Полоски с антигенами: полоски в закрытых пакетах устойчивы до Рабочий раствор буфера: пригоден к использованию 2 недели, если истечения срока годности, если хранятся при 2 - 8°C. Пакеты с хранится при 2 - 8°C. Рабочий раствор буфера может быть сохранен неиспользованными полосками хранить плотно закрытыми. в определенных количествах в течение более длительного времени в Конъюгат, 10-кратный концентрат: устойчив до истечения срока замороженном состоянии. годности, если хранится при 2-8°C. Раствор хромоген/субстрата: устойчив до истечения срока годности, Рабочий раствор: использовать немедленно. если хранится при 2 - 8°C. Хранить в темноте! Избегать сильного Буфер для разведения/промывки_Treponema: концентрат и освещения! порошок:устойчив до истечения срока годности если хранится при 2 - 8°C. Подготовка реактивов и образца Конъюгат, рабочий раствор: Перед использованием доведите все компоненты теста до Растворите необходимое количество 10-кратного концентрата комнатной температуры (20-25°C). согласно таблице 1 в течение первой процедуры промывки (шаг 7 Полоски антигена: проведение теста). Тщательно отделите требуемое число полосок при помощи пинцета. Другие реактивы: готовы к использованию. Касайтесь полосок пинцетом только в области маркировки. Образцы пациента: Рабочий раствор буфера для разведения/промывки: чтобы Используйте 20 мкл неразведенной сыворотки пациента на одно подготовить рабочий раствор буфера, растворите 10-кратный испытание. концентрат 1:10 дистиллированной водой (100 мл концентрата + Дополнительный доступный контроль: 900 мл дистиллированной воды), и добавьте порошок для Используйте 100 мкл каждого из контролей (слабоположительный, разведения/промывки до полного растворения. Поместите рабочий положительный и отрицательный) неразведенным на серию раствор буфера на 10 - 15 минут на магнитную мешалку, pH = 7,5± испытаний. 0,1. 1
  • 2. Таблица 1: Разведение конъюгат (сопряженного) рабочего раствора Число Разбавитель /промывной буфер Конечный Конъюгат - концентрат полос рабочий раствор объем 0,15 мл 1,35 мл 1,5 мл 1 + 0,30 мл 2.70 мл 3,0 мл 2 + 0.45 мл 4,05 мл 4,5 мл 3 + 0,60 мл 5,40 мл 6,0 мл 4 + 8,10 мл 0,75 мл 7,5 мл 5 + 8,10 мл 0,90 мл 9,0 мл 6 + 9,45 мл 1,05 мл 10,5 мл 7 + 10,80 мл 1,20 мл 12.0 мл 8 + 10,80 мл 1,35 мл 13,5 мл 9 + 13,50 мл 1,50 мл 13,5 мл 10 + 14,85 м 1,65 мл 16,5 мл 11 + 16,20 мл 1,80 мл 18,0 мл 12 + 17,55 мл 1,95 мл 19,5 мл 13 + 18,90 мл 2,10 мл 21,0 мл 14 + 20,25 мл 2,25 мл 22,5 мл 15 + 21,60 мл 2,40 мл 24,0 мл 16 + 22,95 мл 2,55 мл 25,5 мл 17 + 24,30 мл 2,70 мл 27,0 мл 18 + 25,65 мл 2,85 мл 28,5 мл 19 + 27,00 мл 3,00 мл 30,0 мл 20 + 28,35 мл 3,15 мл 31,5 мл 21 + 29,70 мл 3,30 мл 33,0 мл 22 + 31,05 мл 3,45 мл 34,5 мл 23 + 32,40 мл 3,60 мл 36,0 мл 24 + 33,75 мл 3,75 мл 37,5 мл 25 + 35,10 мл 3,90 мл 39,0 мл 26 + 36,45 мл 4,05 мл 40,5 мл 27 + 37,80 мл 4,20 мл 42,0 мл 28 + 39,15 мл 4,35 мл 43,5 мл 29 + 40,50 мл 4,50 мл 45,0 мл 30 + 41,85 мл 4,65 мл 46,5 мл 31 + 43,20 мл 4,80 мл 48,0 мл 32 + 44,55 мл 4,95 мл 49,5 мл 33 + 45,90 мл 34 + 5,10ml 51,0ml 47,25 мл 5.25 мл 52,5 мл 35 + 48,60 мл 5,40 мл 54,0 мл 36 + 49.95 мл 5,55 мл 55,5 мл 37 + 51,30 мл 5.70 мл 57,0 мл 38 + 52,65 мл 5,85 мл 58,5 мл 39 + 54,00 мл 6,00 мл 60,0 мл 40 + 55,35 мл 6,15 мл 61,5 мл 41 + 56,70 мл 6,30 мл 63,0 мл 42 + 58,05 мл 6,45 мл 64,5 мл 43 + 59,40 мл 6,60 мл 66,0 мл 44 + 60,75 мл 6,75 мл 67,5 мл 45 + 62,10 мл 6,90 мл 69,0 мл 46 + 63,45 мл 7,05 мл 70,5 мл 47 + 64,80 мл 7,20 мл 72,0 мл 48 + 66,15 мл 7,35 мл 73,5 мл 49 + 67,50 мл 7,50 мл 75,0 мл 50 + Проведение теста: 1. Ополоснуть инкубационную ванну буфером для Маркировать подносы несмываемым маркером. Удалять загрязнения разведения/промывки и удалить раствор. кратким ополаскиванием буфером. 2. Разместить по одной полоске в каждый канал. Разместить полосы в каналы подноса инкубации, одна полоса для каждого образца, соответственно для контроля, номером вверх. Используйте пинцет. 3. Добавить в каждый канал по 1.5 мл буфера и Визуально удостоверьтесь, что полосы полностью смочены и не плавают инкубировать в течение 5 минут при комнатной температуре частично на поверхности буфера. Используйте платформу шейкера с на шейкере. частотой колебаний 40 циклов/мин. 4. Добавить 20 мкл каждого образца пациента или 100 мкл Пипеткой наносите контроль и образцы непосредственно на номер каждого контроля соответственно полоски, в то время как происходят колебания платформы. 5. Инкубировать при колебаниях в течение 30 минут Работайте при комнатной температуре (20 - 25°C). 6.Декантировать жидкость Полоски прилипают к инкубационному подносу. Удалите оставшуюся жидкость с инкубационного подноса на фильтровальной бумаге. 7. Промывка 3 раза по 5 минут: добавить 1.5 мл буфера для Промойте на платформе шейкера. Во время процесса промывки готовят разведения/промывки, выдержать 5 мин., декантировать рабочий раствор конъюгата согласно приложенной таблице разведений. жидкость полностью. Осушите поднос инкубации на фильтровальной бумаге, чтобы удалить оставшуюся жидкость. 8. Нанести пипеткой 1.5 мл рабочего раствора буфера в Визуально удостоверьтесь, что полоски смочены полностью и не плавают каждый канал. частично на поверхности буфера. 9. Выдержать в течение 15 минут, при колебаниях, при комнатной температуре. 10. Декантировать жидкость. Удалите оставшуюся жидкость, тщательно осушая поднос инкубации на фильтровальной бумаге. 11. Промывка 3 раза по 5 минут (см. пункт 7). 12. Добавить 1.5 мл дистиллированной воды 13. Выдержать в течение 1 минуты, при колебаниях при комнатной температуре. 14. Декантировать жидкость. Удалите оставшуюся жидкость, тщательно осушая поднос инкубации на фильтровальной бумаге. 15. Добавить 1.5 мл раствора хромоген/субстрата. Визуально удостоверьтесь, что полосы полностью смочены и не плавают частично на поверхности раствора хромоген/субстрата. 16. Выдержать на платформе шейкера: Остановите реакцию, когда полоса порогового контроля станет видимой, Treponema IgG: 5-15 минут Внимание: Treponema IgM: 5-15 минут. Превышение срока инкубации вызывает появление фоновых пятен. Полоса порогового контроля для IgG или IgM в секции контроля 17. Остановить реакцию, удалив жидкость. Удалите оставшуюся жидкость, тщательно осушая поднос инкубации на фильтровальной бумаге. 2
  • 3. 18. Промывка: 3 раза дистиллированной водой 1.5 мл. После инкубации. 19. Высушить полоски для интерпретации результатов. Удалите влажные полосы из каналов, используя пинцет. Разместите влажные полосы на фильтровальной бумаге и высушите на воздухе перед интерпретацией данных. Принцип теста. При помощи Treponema+VDRL ViraBlot quot; Treponema cпецифическиe и липоид-антитела могут быть определены в человеческой сыворотке в пределах одного испытания. Специфические антитела связываются с установленным антигеном на полоске во время инкубации сыворотки. Конъюгат щелочной фосфатазы связывается с комплексом антиген-антитело во время своей инкубации. Щелочная фосфатаза конвертирует хромоген/субстрат и окрашивает комплекс антиген-антитело на полоске в фиолетовый цвет. Процедуры промывки между инкубацией сыворотки, конъюгата и хромоген/субстрата удаляют непрореагировавшие реактивы. Иммунологический тест с интегрированной системой контроля: зеленая линия разделения делит полоску на секцию контроля и аналитическую секцию. Секция контроля содержит контроль сыворотки, три конъюгат-контроля (IgG, IgA, IgM) и пороговый контроль. Аналитическая секция содержит специфичные Treponema- и липоид- антигены. Оценка результатов теста 1. Подготовить протокол Регистрируйте данные в протоколе оценки. Приклейте или закрепите пленкой полоски на протокол. Поместите оценки: зеленую линию разделения точно на напечатанную линию разделения в протоколе. 2. Действиельность Тест считается действительным, если полосы функционального контроля, конъюгат контроля и порогового теста контроля становится четко видимыми на каждой полоске. Если нет реакции по крайней мере одного из них, тест считается недействительным и должен быть проведен повторно при точном соблюдении инструкций. Не оценивайте недействительные полоски. 3. Оценка образцов Протокол оценки включает в себя напечатанную полосу положительного контроля (обозначенную как PC TP). пациента Выровняйте разделяющие линии на полоске пациента и на полоске положительного контроля. Позиция полосы показана на полоске положительного контроля. Определите полосы на полоске пациента и отметьте их в протоколе. Неопределенные полосы не оцениваются. 4. Оценка полос с В соответствии с лабораторными качественными методиками, пороговый контроль должен использоваться для помощью порогового каждой серии испытаний (11). Полоса порогового контроля интегрирована в контрольной секции каждой контроля: полоски диагностического теста Treponema+VDRL ViraBlot. Интенсивность полосы порогового контроля отражает границу, по которой оценивают полосы. Полосу считают реактивной, если ее интенсивность равна или выше, чем интенсивность полосы порогового Оценка lgG, lgM контроля. Четкие полосы отмечаются знаком X в протоколе. Полосу считают нечеткой, если ее интенсивность меньше, чем интенсивность полосы порогового контроля. Treponema – специфических полос Нечеткие полосы отмечают знаком (X) в протоколе. Каждая из пяти VDRL полос оценивается в соответствии со следующим руководством: 0 - нет VDRL полос или их интенсивность меньше, чем интенсивность полосы порогового контроля. Единицы оценки VDRL 1 - VDRL-полоса по интенсивности равна или сильнее выражена, чем полоса порогового контроля. 2 - VDRL-полосы по интенсивности много выше, чем полоса порогового контроля. ViraBlot Отметьте дополнительно единицы оценки VDRL Vira Blot в протоколе. Оценка образцов пациента. Полосы нужно рассматривать как симптомы болезни. Для заключительного клинического диагноза все результаты этого и других испытаний должны быть соотнесены с клинической историей, эпидемиологическими данными и другими данными, доступными лечащему врачу. Антигены 47 kD, 44.5 kD, 17 kD, 15 kD характеризируются, как специфические для Treponema. Могут появиться дополнительные не характерные полосы, но они не оцениваются. IgGTreponema ViraBlot ®: Идентифицированные полосы / kD результат интерпретация Нет или одна - три нечетких полосы, отрицательный Специфические антитела против антигенов Treponema pallidum не Или одна четкая полоса или обнаружены. Одна четкая полоса и одна нечеткая полоса Одна четкая полоса и две или три нечеткие сомнительный Предполагается инфекция Treponema pallidum.Проверить полосы вторичный образец через 2-3 недели для контроля. Дополнительно Или четыре нечеткие полосы исследовать антитела на lgM в случае подозрения на первичную инфекцию. По крайней мере две четких полосы положительный lgG-антитела против Treponema pallidum определены. Инфекция T.pallida весьма вероятна. IgM Treponema ViraBlot ®: Идентифицированные полосы / kD результат интерпретация Нет полос Отрицательный Не обнаружено специфических антител к антигенам T.pallida Или одна четкая полоса p44.5, Или от одной до четырех нечетких полос Одна четкая полоса из трех p47, p17 или Сомнительный Предполагается инфекция T.pallida.Проверить повторный образец через 2-3-недели для контроля. Дополнительно p15, Или одна четкая полоса p44.5 и от одной до исследовать антитела на lgG в случае подозрения на первичную трех нечетких полос инфекцию. По крайней мере одна четкая полоса из трех: Положительный lgM-антитела против Treponema pallidum определены. Инфекция p47, p17 или p15 и одна из трех нечетких T.pallida весьма вероятна полос Оценка VDRL специфических полос: Качественная оценка VDRL реакции: Значение Интерпретация VDRLViraBlot Единицы оценки Отрицательное по VDRL Не обнаружено липоидных антител. В случае клинического подозрения на 0 первичную инфекцию T.pallida рекомендуется последующий повторный контроль. ≥1 Реактивное по VDRL Результат указывает на первичную или прошлую инфекцию T.pallida, В зависимости от клинической картины тест может указывать на необходимость терапевтического лечения. 3
  • 4. Количественная оценка VDRL реакции: Treponema+VDRL ViraBlotquot; IgG – первый диагностический тест, допускающий количественную оценку VDRL реакции на нитроцеллюлозе. Его результаты могут указывать на потребность лечения или на успешность проводимой терапии. Единицы оценки VDRL ViraBlot' коррелируют с общим VDRL, соотв. кардиолипин- титром, как указано ниже (5): Активность липоид- Титр VDRL Титр Результаты Интерпретация VDRL антител тест Кардиолипина ViraBlotquot; CFT тест Units нет ≤1; 1 ≤1; 1 Отрицательный Не обнаружено липоид-антител. 0 Рекомендуется последующий контроль в течение короткого времени при подозрении на первичную инфекцию T.pallida Низкая Реактивный Результат указывает на первичную 1-2 1:1-1:8 1:1-1:8 или прошлую, активную в Средняя Реактивный 3-6 1:8-1:32 1:16-1:64 настоящее время инфекцию высокая Реактивный 7-10 1:16-1:64 1:32-1:256 T.pallida. Замечание: Всегда обращайте внимание на более высокие значения при диагностике IgG или IgM с помощью VDRL теста Характеристики полос Treponema+VDRL ViraBlot ®(2) Молекулярный вес Антиген Замечания Главный мембранный Высокоспецифические дляTreponema. Липопротеин, активирующий клетки P 47 kD протеин эндотелия. Мембранный липопротеин Высокоспецифичен для Treponema P 44.5 kD Главный мембранный Высокоспецифичен для T.pallidum P 17 kD протеин Трепонема специфические IgG, IgM-антитела. через 2-3 недели специфический IgM синтезируется спустя некоторое время и после первичной инфекции сифилиса, появляются антитела обнаруживается только с очень низкими титрами. Из-за этого факта IgM.(3,4). После коррективного лечения в первичной стадии титр вторичные и многократные инфекции часто обнаруживаются только IgM-антител снижается ниже нормы обнаружения в течение 6 повышением титров IgG-антител, а не появлением IgM-антител. месяцев. После коррективного лечения во вторичной или третичной VDRL антитела: В ранней стадии сифилиса уровень стадии IgM антитела обнаруживаются до 24 месяцев (4). В случае чувствительности VDRL низок; испытание является реактивным у отсутствия или недостаточного лечения IgM антитела могут всех пациентов во вторичной стадии. Также отмечается большое сохраняться в течение многих лет. В этом случае инфекция может количество неспецифичных результатов. Только при перейти в хроническую скрытую стадию (3,4). У некоторых комбинированном использовании Treponema+VDRL ViraBlot ® IgG пациентов, не получающих терапию, Трепонема-специфические и IgM, VDRL реактивность может быть оценена правильно в IgM-антитела исчезают в случае хронической инфекции (около. 2 отношении титра антител и контроля терапии (7,10). %), в то время как высокие титры IgG-антител присутствуют. Поэтому значение VDRL испытания - главным образом Предполагается, что синтез IgM-антител блокирован в естественных существенно для контроля терапии. Четырехкратное увеличение условиях высоким титром IgG-антитела в случаях хронической титра в последующем образце указывает на инфекцию, ре- инфекции (4). Нет различия между первичной и вторичной инфекцию или неудачу терапии. Четырехкратное снижение титра в инфекцией, если первичная инфекция была вылечена своевременно последующем образце указывает на успешную терапию. до исчезновения IgG-антител (3). При вторичной инфекции, высоко 3. Применение лекарственных препаратов или иммуноглобулинов повышающейся титр IgG обнаруживается из-за бустерного эффекта может сказаться на результате (7). в случае остающихся IgG-антител после первичной инфекции. Одновременно может происходить ингибирование синтеза IgM- антител. В этом случае Липопротеин Высокоспецифичен для T.pallida; липопротеин с функцией клеточного P 15 kD медиатора иммунной реакции 4
  • 5. Диагностическая оценка Таблица 2: Результаты Treponema+VDRL ViraBlot ® IgM, IgG и оценка диагностического теста По Muller und Hagedorn (7) * Для заключительной оценки объединенные результаты Treponema+VDRL IgG и IgM диагностических тестов должны интерпретироваться совместно. Трепонема Интерпретация Treponema VDRL ViraBlot ® ViraBlot ® ViraBlot ® IgM ViraBlot ® IgG IgM IgG Нет указаний на инфекцию Treponema. В случаях подозрения 0 0 0 0 на раннюю стадию рекомендуется последующий кратковременный контроль, а также учет мягкого шанкра и генитального герпеса. Липоидные антитела указывают на активную инфекцию 0 0 + 0 Treponema. Выделение липоид-антител может быть 0 0 0 + результатом других инфекций, аутоиммунных заболеваний 0 0 + + или беременности. Ранняя стадия инфекции Treponema + 0 0 0 Ранняя стадия инфекции Treponema. Липоидные антитела + 0 + 0 указывают на активную инфекцию. Ранняя стадия инфекции Treponema. Липоидные антитела + 0 0 + дополнительно указывают на активную инфекцию. + 0 + + Недавно перенесенная инфекция, вызванная Treponema. По + + 0 0 клиническим симптомам -указание на активный вторичный + + + 0 сифилис.VDRL могут отсутствовать в некоторых случаях + + 0 + активной инфекции. В случаях подозрения на кон-натальный + + + + сифилис трепонема-специфически lgM антитела и VDRL указывают на инфекцию у ребенка. lgG антитела могут передаваться от матери. Указание на прошлую инфекцию или сероконверсию. lgG 0 + 0 0 антитела могут сохраняться годами. Указание на инфекцию трепонемой. Липоидные антитела 0 + + 0 дополнительно указывают на активную инфекцию и 0 + 0 + необходимость лечения. 0 + + + 0- отрицательный +- положительный Параметры выполнения. Всесторонняя совокупность данных по аналитической и диагностической чувствительности, специфичности и воспроизводимости испытаний доступна при запросе. Предупреждения и предосторожности: 1. Все человеческие компоненты сыворотки в наших Промыть большим количеством воды после контакта с кожей или изделиях были проверены на отсутствие ВИЧ - и HCV-антител и глазами. Ядовит при попадании внутрь! (см. листы данных о компоненты безопасности). Однако все человеческие Hbs-антигена. диагностического теста, а также образцы пациентов нужно считать 6. Раствор Хромоген/субстрата содержит BCIP и нитросиний потенциально инфекционными и обращаться с соответственными тетразолий. Избегайте контакта с кожей и глазами. В случае контакта с кожей и глазами промыть большим количеством воды. предосторожностями.. 7. Образцы и все потенциально загрязненные материалы должны 2. Не набирать пипетку ртом. быть дезактивированы, используя установленные лабораторные 3. Носить одноразовые перчатки при работе. методы, например путем автоклавирования при 121,5°C в течение 4. Не есть, не пить и не курить в рабочей зоне. 5. Конъюгат содержит азид натрия 0,1 %, контроль и 20 минут. Жидкие отходы смешать с гипохлоритом натрия в окончательной концентрации 1%-гипохлорита натрия. Выдержать буфер для разведения/промывки содержат 0,02 % тимеросал: 30 минут для окончательной дезинфекции. Внимание: вреден для здоровья. Литература: 1. BYRNE РЕ И другие. 1992 ОценкаTreponema pallidum испытание иммуноблота как подтверждающее испытание на сифилис J. Clin Microbiol 30 1 15-122 2. НОРРИС. S.J. Treponema pallidum Группа Исследования Полипептидов, 1993. ПолипептидыTreponema pallidum: продвижение к пониманию их структурной, функциональной, иммунологической ролей. Microbiol. Rev. 57: 750-779 3. MULLER, F., Лаборатория. .med, 7: 12-16, 4. MULLER, F mta 1. 86-93. 1986 5. HAGEDORN. H J.: wissenschaftliches Gutachten zumTreponema ViraBlot, 2003. 6. АБЕЛЬ, U.: Ди Бюертанг diagnostischer Tests. , S 7. Hippokrates Verlag. Штутгарт, 1993. 7. ТОМАС L. 1995, Labour und Diagnost. Med. Verlagsgesellschaft Марбург 8. MATTHEWS, H.. М., и ал, 1979 Уникальный состав липидаTreponema pallidum. Infect. Immun. 24: 713-719 9. JANDA. W.M., 1994. Иммунология p9.7 1-9.7 20 In H.D. Isenberg (редактор). Клиническое руководство процедур микробиологии, vol 2 американскjt Общества Микробиологии, Вашингтон D.C.,. HAGEDORN H.-J. 2001 MIQ 16-200! Qualitatsstandards в der mikrobiologisch-infektiologischen Диагностический Сифилис. Urban*Fischer. Munchen. Йена 11. Rili-bak Bak-Richtlime zur Quahtatssicherung quantitativer laboratoriumsmedizinischer Untersuchungen. (1.1 2002). 5