como realizar mediciones de ph cuantitativamente con pHmetro y cualitativamente con indicadores, además se evidencia la accion amortiguadora del bicarbonato.

1. Bioquímica
Determinación de pH.
Buffer. Acción
amortiguadora
La determinación del pH (potencial de iones
Hidronios) es importante dentro del ámbito del
laboratorio clínico, pues una pequeña variación del
pH en un sistema determinará la manifestación de
una patología. Por tal motivo se hace necesario el
aprendizaje del manejo de potenciómetros y la
utilización de indicadores para determinar el pH de
una solución.
Instituto Superior
Daniel Alcides Carrión
Laboratorio Clínico
3ML41
Alumno:
Granados Cirilo Andrés

2. El pH es una medida de acidez o alcalinidad de una disolución. El pH indica la concentración de
iones hidronio [H3O]+presentes en determinadas disoluciones.
El término "pH" se ha utilizado universalmente por lo práctico que resulta para evitar el
manejo de cifras largas y complejas. En disoluciones diluidas, en lugar de utilizar la actividad
del ion hidrógeno, se le puede aproximar empleando la concentración molar del ion
hidrógeno.
Por ejemplo, una concentración de [H3O+] = 1 × 10−7 M (0,0000001) es simplemente un pH de
7, ya que pH = –log [10−7] = 7
En disolución acuosa, la escala de pH varía, típicamente, de 0 a 14. Son ácidas las disoluciones
con pH menores que 7 (el valor del exponente de la concentración es mayor, porque hay más
iones en la disolución) y alcalinas las de pH superiores a 7. Si el disolvente es agua, el pH = 7
indica neutralidad de la disolución.
En productos de aseo y limpieza se suele usar la expresión "pH neutro". En este caso la
neutralidad hace referencia a un nivel de pH 5,5. Debido a las características de la piel humana,
cuyo pH es 5,5[cita requerida], se indica neutralidad de pH en este tipo de productos que están
destinados a entrar en contacto con la piel para destacar su no agresividad. Si se aplicaran
productos de pH 7 a la piel se produciría una variación del pH cutáneo con posibles
consecuencias negativas.

3.  Determinación de pH de algunas muestras cualitativamente. Uso de
indicadores.
 Aprender método de calibración del pH-metro.
 Determinación del pH de algunas sustancias cuantitativamente. Uso del pH-
metro.
Naranja de metilo

4. MEDICION DEL PH
PH-METRO. Es un sensor utilizado en el método electroquímico para medir el eh de
una disolución. PH es el potencial que se desarrolla a través de una fina membrana de
vidrio que se sepa dos soluciones con diferentes concentraciones de protones.
Buffer son las disoluciones reguladoras de pH conocido.
Un potencio metro necesita (para hacer los cálculos) de unas pequeñas cositas
llamadas CELDAS, estas son sumergidas en la disolución del pH que necesitamos. Lo
que también necesita un pH-metro es un electrolito, son sustancias que en solución
acuosa dan lugar a la formación y conducen la corriente eléctrica.
 Electrolitos fuertes: totalmente ionizados
 Electrolitos débiles: parcialmente ionizados representación de la disociación del
agua.
METODOS PARA DETERMINAR EL pH.
A. METODOS VISUALES:
1. Indicadores. Son sustancias que pueden utilizarse en formas de solución o
impregnadas en papeles especiales y que cambian de color según el carácter del
pH.
2. Papel Tornasol. El papel tornasol es un indicador de pH que se colorea de rojo
sumergido en un ácido o la base, más intenso será el color del indicador.
B. METODOS ELECTROMETRICOS:
La actividad de iones H+ se puede determinar potencio métricamente para ello se
introduce una célula electroquímica con un electrodo indicador y otro de
referencia, sumergidos en la solución a la cual se le quiere determinar el pH, para
generar una diferencia Potencial, que es registrada por el sistema de medición
donde se transforma a la escala de pH.
El medidor de pH-metro consiste en:
 Electrodo de referencia
 Electrodo indicador
 Sistema de medición.

5. Los electrodos, indicador y de referencia, pueden presentarse separados o bien en
una misma unidad, llamándose en este caso electrodos de pH combinados.
Solución buffer es una solución compuesta por ácidos débiles y sus sales o de bases
débiles sus sales.
MANTENIMIENTO.
 Un electrodo es de vidrio necesita ser inmune las interferencia del color,
turbieza, material coloidal, oxidante y reductor.
 El electrodo no da una buena medida cuando está sucio con grasa o material
orgánico insoluble en agua.
 El electrodo tiene que ser enjuagados con agua destilada, este no se seca con
un trapo, solo se coloca en un papel para que se seque.
 Tienden a ser calibrados periódicamente para asegurar la precisión.
PRECAUSIONES.
 El electrodo siempre tiene que estar húmedo.
 No guardarlos o dejarlos todo el tiempo en agua destilada, ya que este
resbalaría a los iones con el bulbo de vidrio y el electrodo se volverá inútil.
 No son medidas presos, todo depende del sentido de la vista de cada uno.
 Existen diferentes tipos de pH-metros
CALIBRACIÓN.
Para verificar la calibración en el intervalo de pH 4.00 a 10.00, se conectó el calibrador
HAN NA y se seleccionaron los pH 4.00, 5.5, 7.00, 8.5 y 10.00 y se registraron en el pH-
metro los valores de potencial correspondientes en mili voltios a una temperatura
ajustada a 25 °C. Una vez verificado el buen funcionamiento, se conectaron los
electrodos de vidrio y de referencia, se sumergió en una solución de pH 7.00 termos
atizada a 25ºC con una precisión de ± 0.1º, y se realiza lectura en mili voltios. Luego se
introdujeron electrodos en las soluciones de referencias de pH 4.00 y 10.00 y se
realizaron las lecturas correspondientes en mili voltios. Se hicieron 5 lecturas en mili
voltios para cada valor de pH. Para verificar la calibración se realizaron las lecturas de
las soluciones de referencia en el modo pH, se obtuvo el modelo de calibración y se
evaluaron la pendiente y el intercepto es importante que recuerde tener suma
responsabilidad con este tipo de material, mas con las cosas más pequeñas, por
ejemplo las celdas de vidrio.

6. PH-METRO
CALIBRACION DEL PH-METRO
1. Encender el sistema
2. Luego el medidor dará el pase para ingresar a la medición.
3. Presionar CALL. Dará el menú de calibración.
4. Introducir en la solución Buffer de pH 7 el electrodo de pH y temperatura.
Agitar y esperar a que se apague.
5. Cuando aparezca en la pantalla la sigla SFM (CFM), presionar en el teclado SFM.
Automáticamente el calibrador pedirá una segunda solución Buffer que puede
ser de pH 4 ó pH 10.
6. Enjuagar con agua destilada, sumergir el electrodo en el nuevo Buffer que pidió
el potenciómetro.
7. El medidor reconocerá el Buffer automáticamente y dará el valor
correspondiente.
8. Esperar hasta que el símbolo se apague y presionar nuevamente SFM para
confirmar el segundo punto de pH.
9. El medidor regresará a la forma de medición manual, saque el electrodo y
enjuague con agua abundante.
MEDICION DEL PH
1. Introducir el electrodo en la muestra, agitar brevemente y esperar que la
lectura se establezca.
2. La pantalla mostrará la lectura del pH equilibrado con temperatura, saque el
electrodo de la muestra y lave con agua destilada antes de realizar la lectura de
una segunda muestra.
PAPEL TORNASOL
1. Sumergir el papel tornasol dentro de la
muestra.
2. Apreciar el cambio de color.

7. INDICADORES
A. NARANJA DE METILO:
1. Agregar dos gotas de naranja de metilo a cada muestra.
2. Observar resultados.
B. FENOFTALEINA:
3. Agregar dos gotas de fenolftaleína a cada muestra.
4. Observar resultados.
ACCIÓN ANTIÁCIDA
1. Medir el pH de diferentes sustancias (agua, coca cola y Sprite) y anotarlas.
2. Agregar una cucharada de bicarbonato a cada una de las sustancias.
3. Nuevamente medir el pH de las sustancias y anotarlas.
4. Comparar los pH medidos antes y después de agregar el bicarbonato y anotar
discusiones.
Naranja de metilo

8. DETERMINACION DE PH DE AGUA CUANTITATIVAMENTE (PH-METRO)
Cuadro de Resultados de pH Agua
Tipo de agua pH Amortiguador Acción Amortiguadora (pH)
Agua hervida 7 Bicarbonato 7.86
Agua San Luis 7.56 Bicarbonato 8.19
Agua de Pozo 7.04 Bicarbonato 8.04
Agua San Mateo 7.03 Bicarbonato 7.79
Agua Cielo 7.11 Bicarbonato 8.02
DISCUSIÓN DE RESULTADOS: Una de las evaluaciones que deben cumplir todos los
alimentos embotellados son los análisis fisicoquímicos, entre otros como
microbiológicos, etc. Una de las evaluaciones fisicoquímicas es la medición de pH que,
según la norma guiada por los métodos APHA 2005 Métodos Normalizados para el
Análisis de Aguas Potables y Residuales E.E.U.U., debe estar entre 6.5 a 8.5. Como se
observó en los resultados todos los valores de las aguas analizadas están dentro del
límite establecido. Sin embargo no quiere decir esto que sean aptas para el consumo
humano, además de los análisis fisicoquímicos se deben realizar análisis
microbiológicos de aguas para determinar m. o. que podrían estar contaminando dicha
agua. Al agregar el bicarbonato se observó el incremento de pH lo que demuestra que
esta sustancia es un buen antiácido, que podría ser usado en nuestra dieta, pero de
forma controlada.

9. DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUANTITATIVAMENTE
(PH-METRO)
Cuadro de Resultados de pH de diferentes muestras
# Muestra pH Amortiguador Acción Amortiguadora
(pH)
pH Bibliografía
1 CH2COOH - Bicarbonato - Varia
2 NaOH - Bicarbonato - Varia
3 HCl - Bicarbonato - Varía
4 Leche de Vaca 7.27 Bicarbonato - 6.2-6.8
5 Lejía 12.45 Bicarbonato - 12.4
6 Shampoo 8.16 Bicarbonato - 8.5
7 Vino 3.77 Bicarbonato - 2.9 – 4.2
8 Café 4.94 Bicarbonato - 5.0
9 Leche magnesia 9.75 Bicarbonato - 10
10 Jugo de Tómate 4.45 Bicarbonato - 4.2 – 4.5
11 Limón 2.16 Bicarbonato - 2.4
12 Agua de Azahar 8.35 Bicarbonato - 5 - 7.9
13 Sprite 3.43 Bicarbonato 7.04 2.5
14 Coca Cola 2.57 Bicarbonato 6.61 2.5

10. DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUALITATIVAMENTE
(PAPEL TORNASOL)
# Muestra pH Tornasol azul Tornasol Rosado
1 CH2COOH - Rosado No viró
2 NaOH - No viró Azul
3 HCl - Rosado No Viró
4 Leche de Vaca 7.27 Rosado No viró
5 Lejía 12.45 No viró Azul
6 Shampoo 8.16 Rosado No viró
7 Vino 3.77 Rosado No viró
8 Café 4.94 Rosado No viró
9 Leche magnesia 9.75 No viró Azul
DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUALITATIVAMENTE
(TIRA DE MEDICION DE PH)
Leche Magnesia pH = 10
Café  pH = 5

11. DETERMINACION DE PH DE DIFERENTES SUSTANCIAS CUALITATIVAMENTE
INDICADORES DE PH
Grupo 1
Indicadores Muestras
# NaOH HCL CH2COOH
1 Naranja de Metilo Amarillo Rojo Naranaja
2 Fenolftaleína Rosella Incoloro incoloro
Naranja de metilo

12. Grupo 2
Grupo 3
Indicadores Muestras
# Shampoo Limón
1 Naranja de Metilo Amarillo Rosado
2 Fenolftaleína incoloro Incoloro
Indicadores Muestras
# Sprite Vino
1 Naranja de Metilo Naranja oscuro Rojo claro
2 Fenolftaleína incoloro Ligeramente
incoloro

13. Grupo 4
 http://tesis.unjbg.edu.pe:8080/bitstream/handle/unjbg/135/29_Zavalaga_Talledo_EN
_FACI_Biologia_Microbiologia_2012_Resumen.pdf?sequence=2
 es.wikipedia.org/wiki/PH-metro
Indicadores Muestras
# Coca cola Leche
1 Naranja de Metilo Rojo oscuro Incoloro
2 Fenolftaleína incoloro Incoloro