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MICOLOGÍA CLÍNICA

                    Micosis subcutáneas




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Curs 2006/2007
Micosis Subcutáneas
.




      .
    Afectan al tej. subcutáneo y, a
      veces, hueso o músculo.




      La capa inferior de la piel, el tejido subcutáneo, está formada por tejido
      conectivo, glándulas sudoríparas, vasos sanguíneos y adipocitos. Protege el cuerpo
      contra golpes, lesiones y ayuda a mantener la temperatura corporal.



                                                                                       2
Curs 2006/2007
Micosis Subcutáneas

            • Se adquieren por medio de una herida

            • Hay un periodo de incubación

            • Se relacionan al sistema circulatorio y linfático. Por esto se pueden diseminar

            • Las lesiones, papulomatosas o ulcerativas, son desde sencillas hasta deformar
            huesos (radiografía y amputación)

            • La mayoría de estos organismos son geofilicos .

            • Se da en condiciones tropicales

            • Afecta a cualquier raza. Predomina en varones. Es raro en niños.

            • Es frecuente en trabajadores agrícolas




                                                                                                3
Curs 2006/2007
Micosis Subcutáneas

     En España se pueden encontrar en tres patologías:


                 Cromomicosis (Lesión verrucosa)



                 Maduromicosis o Micetomas (Lesión granulante)




                 Esporotricosis (Lesión nodular)




                                                                 4
Curs 2006/2007
Cromomicosis
       Lesión nodular en las extremidades inferiores que se extiende
       lentamente, con el tiempo se vuelve verrugosa. A veces
       parecidos a la psoriasis pero se pueden ulcerar.


       No afecta a los huesos. Aspecto elefantiásico.


       Hongos filamentosos pigmentados que se encuentran en la
       vegetación.


          Fonsecacea pedrosoi, Phialophora y Cladosporium



                                                                       5
Curs 2006/2007
Cromomicosis




                           Cuerpos   fumagoides    (como    un   GR)   son
                           estructuras del h. dematiáceo en examen directo

                                                                 6
Curs 2006/2007
Cromomicosis Fonsecacea pedrosoi   (+ común)

                            blastoconidias




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Curs 2006/2007
Cromomicosis Phialophora

                           Sin teñir




                       Conidias biseptadas en grupos




                                                       8
Curs 2006/2007
Cromomicosis Cladosporium

                   Conidias blastocatenadas




                              Cultivo de 10 dias




                                                   9
Curs 2006/2007
MICETOMA

        El micetoma es una micosis en la que el hongo in vivo produce
        gránulos. Son microcolonias que están creciendo en el tejido .

        Infección crónica de la piel que puede afectar el hueso. Aumento en
        el volumen de los tejidos por inflamación y fístulas que drenan
        material purulento y granos.

       Puede ser causado por hongos (Madurella) o bacterias (actinomicetos).

       Dejan cicatrices profundas

       La evolución de la enfermedad es crónica y el paciente cursa sin dolor,
       lo que casi siempre lleva a consultar tardíamente.


          ,

                                                                             10
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MICETOMA Madurella
                                      Tiñe el medio




                                                      11
Curs 2006/2007
MICETOMA. Armas diagnósticas


                                      Estudio de los granos


                                      Corte histologico


                                      Cultivo en ADS


                                      Radiografías
                 grano

                              hongo




                                                              12
Curs 2006/2007
Dematiáceos
     Alternaria, Curvularia, Fonsecaea, Cladosporium, Feoanelomices, Piedraia, etc.



   MC: Sabouraud con antibióticos pero crecen más rápido en
   agar papa y fructifican mejor en agar harina de maíz; se
   desarrollan a la temperatura ambiente o a 37ºC.

   El crecimiento es lento, 10 días se observan colonias de
   superficie algodonosa, de color negro a verde oscuro.




                                                                                 13
Curs 2006/2007
ESPOROTRICOSIS

     Lesiones ulcerativas que comienzan como pequeños nódulos y se ulceran rápidamente

      Micosis crónica que se puede diseminar en pacientes inmunocomprometidos

      Lesiones granulomatosas a lo largo del canal linfático que se ulceran

      El hueso no se afecta

          Sporothrix. Es un hongo
                dimórfico
                                                                     Hilera de
                                                                     úlceras
      El examen físico revela lesiones típicas. Se confirma con un cultivo de tejido obtenido
      por biopsia

      La esporotricosis sistémica tb. se desarrolla en inmunocomprometidas al inhalar
      polvo con esporas


                                                                                       14
Curs 2006/2007
ESPOROTRICOSIS




        Hay ESPOROTRICOSIS articular, pulmonar, ocular... pero en
                  un 75 % de los caoso es subcutánea


                                                                    15
Curs 2006/2007
ESPOROTRICOSIS

     Crece de forma filamentosa a 30ºC y en forma de levadura a 37ºC




        Colonia “vieja” en ADS a 30º               Examen microscòpico

          La morfología puede estimularse en medio de harina de maíz o Czapek

                                                                                16
Curs 2006/2007
ESPOROTRICOSIS




        Colonia “vieja” en ADS a 37º          Examen microscòpico

   El exámen microscópico de la muestra es de poco valor debido al escaso número de
        levaduras presentes, pero puede utilizarse la tinción con PAS o calcofluor



                                                                                 17
Curs 2006/2007
MICOLOGÍA CLÍNICA

                    Micosis sistémicas




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Curs 2006/2007
Clasificación (recordatorio)


H. inferiores FICOMICETOS                Reproducción sexuada por zigosporas
(Micelio sin septos.
Esporas asexuadas
dentro de esporangios
Forman mohos)
                        ASCOMICETOS Reproducción sexuada por ascosporas




H. superiores           BASIDIOMICETOS Reproducción sexuada por basidiosporas
 (Micelio septado
 o son levaduras.
 Esporas asexuadas
 externas o conidios.
 Forman mohos y
 setas)                 DEUTEROMICETOS           Reproducción sexuada desconocida
                            h. imperfectos


                                                                                    19
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas (profundas)
                 Se pueden clasificar en dos grandes grupos:
                 1) H. patógenos primarios
                       distribución limitada a ciertas áreas geográficas
                       afecta a cualquiera




                 2) H. oportunistas
                       distribución universal
                       afecta a inmunodeprimidos, (neutropénicos, SIDA, etc)




                                                                               20
Curs 2006/2007
Patógenos primarios
    • Los hongos patógenos primarios de tipo
      sistémico incluyen:
          –   Coccidioides immitis
          –   Histoplasma capsulatum
          –   Blastomyces dermatitidis,
          –   Paracoccidioides brasiliensis.



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Curs 2006/2007
crecimiento filamentoso a Tª ambiente y en estado saprofito (suelo)
H. Dimórficos térmicos
                         forma levaduriforme al parasitar al ser humano o en cultivo a 37 °C




Patógenos
primarios




                                                                                           22
  Curs 2006/2007
Blastomyces, Coccidioides, Histoplasma y Paracoccidioides

        Blastomicosis, Coccidiomicosis, Histoplasmosis, Paracocidiomicosis



        H. muy peligrosos para el técnico de laboratorio

        Se adquieren por inhalación de esporas desde el suelo (estado natural)

        Cuadros clínicos diversos, según estado inmunológico del huésped
                   - cuadros asintomáticos inespecíficos
                   - procesos pulmonares (RX)

        Desarrollan reacciones inmunológicas claras: INTRADERMOREACCIONES
        (como la tuberculina)
        Anamnesis

        Muestras: esputo, tejidos biopsiados, pus de abscesos, sangre, hisops, LCR.

        Se agregan antibióticos para el transporte pero no siempre para el cultivo

                                                                                      23
Curs 2006/2007
Blastomyces, Coccidioides, Histoplasma y Paracoccidioides


         Lactofenol o KOH al 20%.


         En corte histológico, Grocott (tinción argéntica) para diferenciarlos de la tuberculosis


         El cultivo se hace por cuatro semanas en medios comunes a 28º C y en medios enriquecidos a
         37º C para comprobar el dimorfismo
                     - micelio filamentoso en Sabouraud
                     - forma levaduriforme en AS


         Serología Ac y Ag por : Inmunodifusión, FC, CIE, ELISA y RIA.


         Para llegar al diagnóstico se toman muestras de suero pareadas (una al inicio de la
         enfermedad y otra dos semanas más tarde




                                                                                                    24
Curs 2006/2007
Blastomyces, Coccidioides, Histoplasma y Paracoccidioides




                            Placa de inmunoprecipitación en gel
                                                                    25
Curs 2006/2007
Coccidiomicosis
       • Infección por la inhalación de los artroconidios del hongo Coccidioides
       immitis
       • Puede producir un cuadro pulmonar con o sin diseminación
       • Si las defensas del huésped son capaces de destruirlas dejan un estado
       de inmunidad
       • Presentan un cuadro tipo alérgico-gripal
       •      Si se disemina hay una infección sistémica generalizada, con
       participación ósea, meníngea y cutánea
       • Estas formas diseminadas se observan en inmunodeprimidos
       • Generalmente asintomático.
       • Grave en enfermos de SIDA
       • Norteamérica. Desiertos
       •    Se diagnostica examinando el esputo (KOH o calcofluor) o de piel
       (biopsia). FC. Eosinófilia




                                                                          26
Curs 2006/2007
Coccidiomicosis
          En los tejidos biopsiados se observan esférulas repletas de endosporas
                                           Típico
                                                                        (Calcofluor)




                 (Grocott)




                                          (PAS)

                                                                                       27
Curs 2006/2007
Coccidiomicosis



  Artroconidios
  con lactofenol




                         ADS a 30º




                                     28
Curs 2006/2007
Coccidiomicosis




                                               cavitación
      Lesión granulomatosa

                             Lesión ulcerada




                                                            29
Curs 2006/2007
Paracoccidiomicosi
                     s
       • Infección por el hongo Paracoccidioides brasiliensis
       • Patología pulmonar, mucosas, piel y huesos. Tb adenopatias.
       • Si las defensas del huésped son capaces de destruirlas dejan un estado
       de inmunidad, como siempre probado por la intradermorreacción
       •     Si se disemina hay una infección sistémica generalizada, con
       adenopatías, hepatoesplenomegalia, afectación ósea y cutánea
       • Generalmente asintomático.
       • En inmunodeprimidos es una enfermedad grave
       • América latina.
       • Se diagnostica examinando el esputo o tejido (KOH o calcofluor): típicas
       levaduras multigemantes en forma de rueda de timón




                       Adenopatia que drena
                                                                           30
Curs 2006/2007
Paracoccidiomicosi
           s




 En tubo a 37º




                                31
Curs 2006/2007
Paracoccidiomicosi
                                   s




    Paracoccidioidomicosis sistémica con implicación de las mucosas y adenopatias

         (Grocott)                                  (PAS)




                                                                                    32
Curs 2006/2007
Blastomicosis
       • Infección por la inhalación de esporas del suelo del hongo Blastomyces
       dermatidis
       • Puede recordar una neumonía bacteriana.
       • La micosis sistémica puede implicar a: Piel (pústulas), huesos y tracto
       genitourinario
       • Síntomas gripales
       • Es principalmente una afección pulmonar, pero en ocasiones se extiende
       a través de la S.
       • Las formas asintomáticas son las más comunes
       • La enfermedad es rara en los enfermos de SIDA
       • Norteamérica y África: suelo de corrales
       • afecta tb a animales domésticos

       • Se diagnostica examinando una muestra de esputo (KOH o calcofluor)
       o de piel (biopsia) observándose las levaduras. Si se encuentran hongos,
       puede cultivarse a 37 °C y verificar el diagnóstico
       • Con tratamiento antifúngico cura fácilmente




                                                                          33
Curs 2006/2007
                                pústula
Blastomico
                                  sis




    Levaduras
                                               Conidias y micelio




        Desdarrollo lento a 30º
                                                                34
Curs 2006/2007
Blastomicosis




                         Calcofluor de los micelios y de las levaduras




                                                                    35
Curs 2006/2007
Blastomicosis
      Levaduras en tejido por tinción de Grocott




                                                   Granuloma




                                                           36
Curs 2006/2007
Histoplasmosi
                              s
                 • Producida por variedades de Histoplasma capsulatum.
                 • Afecta al pulmón pero se puede diseminar
                 • Afeca a enfermos de SIDA
                 • Distribución mundial, pero predomina en gallineros y palomares de
                 cualquier parte del mundo.
                 • Zonas con alta pluviosidad y clima templado.
                 • También existen focos de infección en ciudades: histoplasmosis
                 urbana
                 • Generalmente asintomática
                 • Cuadro gripal
                 • A RX calcificaciones parecidas a la tuberculosis
                 •  El diagnóstico se hace aislando el hongo de la Sangre, MO, LCR o
                 por biopsia del tejido. Difícil en esputo. En el tejido se observan las
                 típicas formas de levadura intracelulares, con un halo alrededor,
                 semejando una cápsula

                                                                                           37
Curs 2006/2007
Histoplasmosis


                                    Macrofagos conteniendo levaduras




                 En tejidos (PAS)                                      En MO




                                                                               38
Curs 2006/2007
Histoplasmos
                 is




                  Levaduras en tejido (Grocott)

                                                  39
Curs 2006/2007
Histoplasmosi
                                  s        Micelio y macroconidias equinuladas




          ADS sin antibióticos.
Crecimiento muy lento, de hasta 8 semanas




                                                                                 40
Curs 2006/2007
Histoplasmosis

                 En AS a 37º   Sin antibióticos




                                                  levaduras




                                                              41
Curs 2006/2007
Patogenos oportunistas
    • Los oportunistas incluyen:
          –   Candida spp.
          –   Aspergillus spp.
          –   Zygomycetes: Trichosporon beigelii, y Fusarium spp
          –   Cryptococcus neoformans
          –   Sporothrix
          –   Penicillium marneffei,
          –   .


                                                                   42
Curs 2006/2007
Candidiasis sistémica

El h. Cándida puede provocar infecciones sistémicas graves como candidiasis
diseminada del tracto urinario, cardiaca, pulmonar, del sistema nervioso
central, del peritoneo, hígado, bazo, vesícula biliar, ojos, etc. Los factores que
predisponen a este tipo de candidiasis son:

-Las prótesis cardíacas
-las alteraciones del sistema inmunológico (lupus, tratamiento, etc)
-Los antibióticos.Los costicosteriodes
-Las maniobras que facilitan la entrada de las cándidas a la sangre (catéteres....)
-Neoplasias
-La diabetes
-Neutropenia
-Otros: desnutrición, drogadicción, intervenciones quirúrgicas, quemaduras, ...



                                                                               43
Curs 2006/2007
Candidiasis sistémica
      Estas candidiasis no son diseminaciones a partir de las superficiales EXCEPTO en prematuros

      Es un oportunista, que pueden producir la muerte


      Métodos poco fiables de diagnosticar, pronosticar la enfermedad


      Se manifiesta con fiebre, sin que existan síntomas específicos


      Se confunde con una infección bacteriana

      No existen muchos antifúngicos que puedan hacerle frente


       La Candidemia es una infección sistémica fúngica, que prolifera y afecta órganos y tejidos de
       todo el cuerpo: riñones, hígado, huesos, músculos, articulaciones, bazo, ojos, (candidiasis
       sistémicas)


      Típico en inmunocomprometidos

                                                                                             44
Curs 2006/2007
Candidiasis sistémica
                              La Candida solamente
                              puede permanecer por
                               un corto tiempo en la
                                  sangre cuando un
                                 órgano interno está
                                infectado, así es que
                               los análisis de sangre
         Endoftalmitis             no son siempre
       Conduce a la ceguera          confiables.




                                                        45
Curs 2006/2007
Candidiasis. Diagnóstico




                                            46
Curs 2006/2007
Candidiasis. Diagnóstico




        Colonias de Candida en ADS a 37º   Colonias de Cryptococcus en CGB a 37º




                                                                              47
Curs 2006/2007
Candidiasis sistémica
       Interpretacion: El cultivo positivo de sangre, u otros fluidos estériles o
       tejidos biopsiados se considera significativo. La lisis y centrifugación es
       el método mas sensible para el aislamiento de Candida en sangre.

       Sin embargo, el cultivo positivo de muestras no estériles como esputos,
       orina, heces, drenajes, etc., son de bajo valor diagnostico.

       Recordar que la Candida es habitualmente aislado de la boca, vagina, y
       demás mucosas, individuos normales sin candidiasis.



                                   Recordar: Los h. parásitos sistémicos del
                                   hombre son, en la mayoría de los casos,
                                   difásicos, con un aspecto levaduriforme
                                   cuando invaden tejidos, en fase parasitaria (o
                                   cuando son cultivados a 37º C), y en forma de
                                   micelio o seudomicelio cuando se hallan en
                                   fase saprofítica (a temperatura ambiente en
                                   un medio pobre)...
                                                                                    48
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas

          H. inferiores (zigomicetos o ficomicetos)
          Rhizopus, Rhizomucor, Mucor, Absidia




           H. superiores
           Aspergillus, Cladosporium, Fusarium y Penicillum




                                                              49
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores)
      Aspergillus, Fusarium, Cladosporium y Penicillum (según frecuencia)


           Estos h. crecen bien en ADS a 37 ºC con ciclohexomida


           Su identificación a nivel de género suele ser fácil


           Patología muy variada: desde benignas (otitis, asma) a complicadas
           (infección pulmonar, fungemia, etc)


           La granulopenia es el factor predisponente más común


           Son h. contaminantes en microbiología


          Producción de toxinas (elastasa, restrictocina, fumigatoxina, etc.)


                                                                                50
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores)
                 Aspergillus        Aspergillus
                  (esputo)

                                    Aparece en forma de brotes hospitalarios
                                    tras obras: Nosocomial

                                    Ubicuo: Está en el polvo ambiente y tierra
                                    (requiere poca humedad)


 • Conidias pequeñas que son aspiradas fácilmente ⇒ infección
 en pulmón y senos
 • Crecer a 37ºC ⇒ afecta al hombre
 • Su capacidad de adherencia a endotelios ⇒ invaden vasos




                                                                               51
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores)
                                         Aspergillus

   • Onicomicosis, sinusitis y otomicosis (raros). En inmunodepres

   • Alérgia: Aspergilosis pulmonar alérgica (IgE totales y las IgG anti-Aspergillus en
   suero) ⇒fibrosis pulmonar en trabajadores de molinos de grano, de silos, etc.

   • Aspergilosis pulmonar invasiva: En leucemias, y neutropenias. La infección puede
   diseminarse por vía hematógena. Mortalidad muy elevada. ELISA, IFI ¡NO existe
   tratamiento efectivo! TÍPICO DE LOS QUIRÓFANOS, INCLUSO EN PERSONAS
   NORMALES

   • Aspergiloma (puede ser asintomático)



                                                                                          tuberculosis




                                                                                          52
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores)
                                           Aspergillus

      Diagnóstico: clínico, radiológico, histológico, microbiológico y serológico.

      Temperatura óptima de crecimiento: 37º C pudiendo ser visibles los micelios a las 48 h.

      KOH, Calcofluor

      Se debe considerar la posibilidad de contaminación




    Aspergillus fumigatus (85%)
                                                                                                53
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores)
                                        Fusarium




                 • Patógenos facultativos
                 •
                     En materiales en descomposición

                 • Contaminación en los laboratorios de microbiología (+++ )  ν
                 • Antes se consideraba no patógeno (patologia emergente)

                 • Distribución amplia: suelo, plantas y del aire. Cosmopolita

                 • Queratitis (córnea), onicomicosis, fungemia sistémica. Todas en inmunosuprimidos

                 • Inhalación de las esporas

                 • Capacidad para adherirse al plástico: catéteres y lentes de contacto
                                                                                                 54
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores)
                                Cladosporium (dematiáceo)


     De las esporas en el ambiente un 98% correspondieron a Cladosporium




                 Características similares al anterior pero menos frecuente


                                                                              55
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores)
                               Penicillum




   Algunas epecies causan infección letal sistémica con fiebre y anemia
   similar a la cryptococcosis diseminada en inmunocomprometidos (VIH)

   Similar al los anteriores


                                                                          56
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (zigomicetos)
                 Mucor, Rhizomucor, Absidia y Rhizopus   (según frecuencia)

        Producen zigomicosis (mucormicosis)

        Crecen bien y rápido (48-72 horas) en ADS SIN
        CICLOHEXIMIDA a temperatura de 25, 37 o 45Cº según
        especies (factor diagnóstico) ⇒ colonias características.

        La adscripción precisa a un género es difícil

        Hábitat natural: materia orgánica en descomposición (geofílico)

        Distribución mundial

        El hongo ingresa habitualmente a través del tracto respiratorio

        Mortalidad elevada (80%)
        Frecuente contaminante de MC de laboratorio
                                                                              57
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (zigomicetos)
                                   Mucor
           Se da especialmente en neutropenia primaria o secundaria
esporangiosporas y esporangio




                                                                      58
 Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (zigomicetos)
                                 Rhizomucor
          Cigomicosis generalmente pulmonar

                                                Esporangiospora




                                                            59
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (zigomicetos)
                                   Absidia
          Absidiosis, generalmente pulmonar y rinocerebral. SIDA y RN

      Esporangio piriforme




                                                                        60
Curs 2006/2007
Absidia




        Corte histológico




                            61
Curs 2006/2007
Micosis sistémicas oportunistas (zigomicetos)
                               Rhizopus
          Se da especialmente en diabéticos




                                                           62
Curs 2006/2007
Criptococcosis

• Infección subaguda o crónica, pulmonar o meníngea, causada por la levadura
Cryptococcus neoformans
• Especie ubicua en la naturaleza
• No se ha desarrollado Ag adecuado para la intradermorreacción
• Su hábitat es el suelo contaminado con material fecal de aves
• El reservorio más importante son las palomas, sobre todo la urbana (Columbia livia)
• El hongo no está en deyecciones recientes, pero sí en las acumuladas en aleros,
áticos o balcones donde duermen las palomas

 • La enfermedad dependerá de la eficacia fagocítica de
 los macrófagos, así como de la RI celular del huésped.

 • La forma pulmonar suele ser asintomática e
 inespecífica
 • La forma cutánea se da en inmunocomprometidos
 • La más ν peligrosa en la cerebral: meningitis                                    63
Curs 2006/2007
Criptococcosis

    • El LCR es la muestra más adecuada para la observación de las levaduras capsuladas

    • Aglutinación (látex) para la determinación polisacárido capsular

    • En la forma diseminada cualquier órgano puede estar afectado

    • El aislamiento a partir de la sangre es el método diagnóstico más eficaz en los enfermos
    con SIDA

    • El aislamiento de C. neoformans es sencillo pues crece bien en los medios habituales,
    donde se aprecian las colonias mucoides características




     Tejido pulmonar
      con levaduras




                                                                                                 64
Curs 2006/2007
Criptococcosis




         Criptococcosis cutánea




                                                      65
Curs 2006/2007                               En LCR
Esporotricosis
  La esporotricosis, causada por el h. dimórfico es generalmenete una
  infection cronica subcutanea, con tendencia a ulcerar, producida por
  rasgaduras en la piel. La padecen ganaderos, forestales, agricultores, etc.

  Recientemente está aumentando el nº de casos de enfermemdad
  pulmonar diseminada, en inmunodeprimidos, cuando
  inhalan esporas. Tb se implican los huesos
  y meninges.                                      CBIH a 30º

  Simula una tuberculosis.

  Es universal y el habitat es el suelo.




      CBIH a 37º
                                                                                66
Curs 2006/2007
Esporotricosis
 Las colonias claras son típicas de cultivos jóvenes. Con el tiempo pasan a ser
 oecuras y muy rugosas. Es un h. dematiáceo.

                     Anverso y reverso de colonias “viejas” en ADS “inclinado”




                                                                                 Levaduras a 37º


       Cultivo a a 30º
     La pigmentación, formación de micelio y conidias en sus
conidióforos se favorecen con medios especiales como agar Czapek
                         o harina de maiz                                               67
 Curs 2006/2007
Esporotricosis


La IDR es importante y es positiva para un 95   % de la esporitricosis no subcutánea.
Para las subcutáneas el 50   %
Tb existe una prueba de intradermorreacción


                                                                PAS




                                                         Levadura en tejido




                                                                                  68
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Micologia micosis subcutaneas y sistemicas

  • 1. MICOLOGÍA CLÍNICA Micosis subcutáneas 1 Curs 2006/2007
  • 2. Micosis Subcutáneas . . Afectan al tej. subcutáneo y, a veces, hueso o músculo. La capa inferior de la piel, el tejido subcutáneo, está formada por tejido conectivo, glándulas sudoríparas, vasos sanguíneos y adipocitos. Protege el cuerpo contra golpes, lesiones y ayuda a mantener la temperatura corporal. 2 Curs 2006/2007
  • 3. Micosis Subcutáneas • Se adquieren por medio de una herida • Hay un periodo de incubación • Se relacionan al sistema circulatorio y linfático. Por esto se pueden diseminar • Las lesiones, papulomatosas o ulcerativas, son desde sencillas hasta deformar huesos (radiografía y amputación) • La mayoría de estos organismos son geofilicos . • Se da en condiciones tropicales • Afecta a cualquier raza. Predomina en varones. Es raro en niños. • Es frecuente en trabajadores agrícolas 3 Curs 2006/2007
  • 4. Micosis Subcutáneas En España se pueden encontrar en tres patologías: Cromomicosis (Lesión verrucosa) Maduromicosis o Micetomas (Lesión granulante) Esporotricosis (Lesión nodular) 4 Curs 2006/2007
  • 5. Cromomicosis Lesión nodular en las extremidades inferiores que se extiende lentamente, con el tiempo se vuelve verrugosa. A veces parecidos a la psoriasis pero se pueden ulcerar. No afecta a los huesos. Aspecto elefantiásico. Hongos filamentosos pigmentados que se encuentran en la vegetación. Fonsecacea pedrosoi, Phialophora y Cladosporium 5 Curs 2006/2007
  • 6. Cromomicosis Cuerpos fumagoides (como un GR) son estructuras del h. dematiáceo en examen directo 6 Curs 2006/2007
  • 7. Cromomicosis Fonsecacea pedrosoi (+ común) blastoconidias 7 Curs 2006/2007
  • 8. Cromomicosis Phialophora Sin teñir Conidias biseptadas en grupos 8 Curs 2006/2007
  • 9. Cromomicosis Cladosporium Conidias blastocatenadas Cultivo de 10 dias 9 Curs 2006/2007
  • 10. MICETOMA El micetoma es una micosis en la que el hongo in vivo produce gránulos. Son microcolonias que están creciendo en el tejido . Infección crónica de la piel que puede afectar el hueso. Aumento en el volumen de los tejidos por inflamación y fístulas que drenan material purulento y granos. Puede ser causado por hongos (Madurella) o bacterias (actinomicetos). Dejan cicatrices profundas La evolución de la enfermedad es crónica y el paciente cursa sin dolor, lo que casi siempre lleva a consultar tardíamente. , 10 Curs 2006/2007
  • 11. MICETOMA Madurella Tiñe el medio 11 Curs 2006/2007
  • 12. MICETOMA. Armas diagnósticas Estudio de los granos Corte histologico Cultivo en ADS Radiografías grano hongo 12 Curs 2006/2007
  • 13. Dematiáceos Alternaria, Curvularia, Fonsecaea, Cladosporium, Feoanelomices, Piedraia, etc. MC: Sabouraud con antibióticos pero crecen más rápido en agar papa y fructifican mejor en agar harina de maíz; se desarrollan a la temperatura ambiente o a 37ºC. El crecimiento es lento, 10 días se observan colonias de superficie algodonosa, de color negro a verde oscuro. 13 Curs 2006/2007
  • 14. ESPOROTRICOSIS Lesiones ulcerativas que comienzan como pequeños nódulos y se ulceran rápidamente Micosis crónica que se puede diseminar en pacientes inmunocomprometidos Lesiones granulomatosas a lo largo del canal linfático que se ulceran El hueso no se afecta Sporothrix. Es un hongo dimórfico Hilera de úlceras El examen físico revela lesiones típicas. Se confirma con un cultivo de tejido obtenido por biopsia La esporotricosis sistémica tb. se desarrolla en inmunocomprometidas al inhalar polvo con esporas 14 Curs 2006/2007
  • 15. ESPOROTRICOSIS Hay ESPOROTRICOSIS articular, pulmonar, ocular... pero en un 75 % de los caoso es subcutánea 15 Curs 2006/2007
  • 16. ESPOROTRICOSIS Crece de forma filamentosa a 30ºC y en forma de levadura a 37ºC Colonia “vieja” en ADS a 30º Examen microscòpico La morfología puede estimularse en medio de harina de maíz o Czapek 16 Curs 2006/2007
  • 17. ESPOROTRICOSIS Colonia “vieja” en ADS a 37º Examen microscòpico El exámen microscópico de la muestra es de poco valor debido al escaso número de levaduras presentes, pero puede utilizarse la tinción con PAS o calcofluor 17 Curs 2006/2007
  • 18. MICOLOGÍA CLÍNICA Micosis sistémicas 18 Curs 2006/2007
  • 19. Clasificación (recordatorio) H. inferiores FICOMICETOS Reproducción sexuada por zigosporas (Micelio sin septos. Esporas asexuadas dentro de esporangios Forman mohos) ASCOMICETOS Reproducción sexuada por ascosporas H. superiores BASIDIOMICETOS Reproducción sexuada por basidiosporas (Micelio septado o son levaduras. Esporas asexuadas externas o conidios. Forman mohos y setas) DEUTEROMICETOS Reproducción sexuada desconocida h. imperfectos 19 Curs 2006/2007
  • 20. Micosis sistémicas (profundas) Se pueden clasificar en dos grandes grupos: 1) H. patógenos primarios distribución limitada a ciertas áreas geográficas afecta a cualquiera 2) H. oportunistas distribución universal afecta a inmunodeprimidos, (neutropénicos, SIDA, etc) 20 Curs 2006/2007
  • 21. Patógenos primarios • Los hongos patógenos primarios de tipo sistémico incluyen: – Coccidioides immitis – Histoplasma capsulatum – Blastomyces dermatitidis, – Paracoccidioides brasiliensis. 21 Curs 2006/2007
  • 22. crecimiento filamentoso a Tª ambiente y en estado saprofito (suelo) H. Dimórficos térmicos forma levaduriforme al parasitar al ser humano o en cultivo a 37 °C Patógenos primarios 22 Curs 2006/2007
  • 23. Blastomyces, Coccidioides, Histoplasma y Paracoccidioides Blastomicosis, Coccidiomicosis, Histoplasmosis, Paracocidiomicosis H. muy peligrosos para el técnico de laboratorio Se adquieren por inhalación de esporas desde el suelo (estado natural) Cuadros clínicos diversos, según estado inmunológico del huésped - cuadros asintomáticos inespecíficos - procesos pulmonares (RX) Desarrollan reacciones inmunológicas claras: INTRADERMOREACCIONES (como la tuberculina) Anamnesis Muestras: esputo, tejidos biopsiados, pus de abscesos, sangre, hisops, LCR. Se agregan antibióticos para el transporte pero no siempre para el cultivo 23 Curs 2006/2007
  • 24. Blastomyces, Coccidioides, Histoplasma y Paracoccidioides Lactofenol o KOH al 20%. En corte histológico, Grocott (tinción argéntica) para diferenciarlos de la tuberculosis El cultivo se hace por cuatro semanas en medios comunes a 28º C y en medios enriquecidos a 37º C para comprobar el dimorfismo - micelio filamentoso en Sabouraud - forma levaduriforme en AS Serología Ac y Ag por : Inmunodifusión, FC, CIE, ELISA y RIA. Para llegar al diagnóstico se toman muestras de suero pareadas (una al inicio de la enfermedad y otra dos semanas más tarde 24 Curs 2006/2007
  • 25. Blastomyces, Coccidioides, Histoplasma y Paracoccidioides Placa de inmunoprecipitación en gel 25 Curs 2006/2007
  • 26. Coccidiomicosis • Infección por la inhalación de los artroconidios del hongo Coccidioides immitis • Puede producir un cuadro pulmonar con o sin diseminación • Si las defensas del huésped son capaces de destruirlas dejan un estado de inmunidad • Presentan un cuadro tipo alérgico-gripal • Si se disemina hay una infección sistémica generalizada, con participación ósea, meníngea y cutánea • Estas formas diseminadas se observan en inmunodeprimidos • Generalmente asintomático. • Grave en enfermos de SIDA • Norteamérica. Desiertos • Se diagnostica examinando el esputo (KOH o calcofluor) o de piel (biopsia). FC. Eosinófilia 26 Curs 2006/2007
  • 27. Coccidiomicosis En los tejidos biopsiados se observan esférulas repletas de endosporas Típico (Calcofluor) (Grocott) (PAS) 27 Curs 2006/2007
  • 28. Coccidiomicosis Artroconidios con lactofenol ADS a 30º 28 Curs 2006/2007
  • 29. Coccidiomicosis cavitación Lesión granulomatosa Lesión ulcerada 29 Curs 2006/2007
  • 30. Paracoccidiomicosi s • Infección por el hongo Paracoccidioides brasiliensis • Patología pulmonar, mucosas, piel y huesos. Tb adenopatias. • Si las defensas del huésped son capaces de destruirlas dejan un estado de inmunidad, como siempre probado por la intradermorreacción • Si se disemina hay una infección sistémica generalizada, con adenopatías, hepatoesplenomegalia, afectación ósea y cutánea • Generalmente asintomático. • En inmunodeprimidos es una enfermedad grave • América latina. • Se diagnostica examinando el esputo o tejido (KOH o calcofluor): típicas levaduras multigemantes en forma de rueda de timón Adenopatia que drena 30 Curs 2006/2007
  • 31. Paracoccidiomicosi s En tubo a 37º 31 Curs 2006/2007
  • 32. Paracoccidiomicosi s Paracoccidioidomicosis sistémica con implicación de las mucosas y adenopatias (Grocott) (PAS) 32 Curs 2006/2007
  • 33. Blastomicosis • Infección por la inhalación de esporas del suelo del hongo Blastomyces dermatidis • Puede recordar una neumonía bacteriana. • La micosis sistémica puede implicar a: Piel (pústulas), huesos y tracto genitourinario • Síntomas gripales • Es principalmente una afección pulmonar, pero en ocasiones se extiende a través de la S. • Las formas asintomáticas son las más comunes • La enfermedad es rara en los enfermos de SIDA • Norteamérica y África: suelo de corrales • afecta tb a animales domésticos • Se diagnostica examinando una muestra de esputo (KOH o calcofluor) o de piel (biopsia) observándose las levaduras. Si se encuentran hongos, puede cultivarse a 37 °C y verificar el diagnóstico • Con tratamiento antifúngico cura fácilmente 33 Curs 2006/2007 pústula
  • 34. Blastomico sis Levaduras Conidias y micelio Desdarrollo lento a 30º 34 Curs 2006/2007
  • 35. Blastomicosis Calcofluor de los micelios y de las levaduras 35 Curs 2006/2007
  • 36. Blastomicosis Levaduras en tejido por tinción de Grocott Granuloma 36 Curs 2006/2007
  • 37. Histoplasmosi s • Producida por variedades de Histoplasma capsulatum. • Afecta al pulmón pero se puede diseminar • Afeca a enfermos de SIDA • Distribución mundial, pero predomina en gallineros y palomares de cualquier parte del mundo. • Zonas con alta pluviosidad y clima templado. • También existen focos de infección en ciudades: histoplasmosis urbana • Generalmente asintomática • Cuadro gripal • A RX calcificaciones parecidas a la tuberculosis • El diagnóstico se hace aislando el hongo de la Sangre, MO, LCR o por biopsia del tejido. Difícil en esputo. En el tejido se observan las típicas formas de levadura intracelulares, con un halo alrededor, semejando una cápsula 37 Curs 2006/2007
  • 38. Histoplasmosis Macrofagos conteniendo levaduras En tejidos (PAS) En MO 38 Curs 2006/2007
  • 39. Histoplasmos is Levaduras en tejido (Grocott) 39 Curs 2006/2007
  • 40. Histoplasmosi s Micelio y macroconidias equinuladas ADS sin antibióticos. Crecimiento muy lento, de hasta 8 semanas 40 Curs 2006/2007
  • 41. Histoplasmosis En AS a 37º Sin antibióticos levaduras 41 Curs 2006/2007
  • 42. Patogenos oportunistas • Los oportunistas incluyen: – Candida spp. – Aspergillus spp. – Zygomycetes: Trichosporon beigelii, y Fusarium spp – Cryptococcus neoformans – Sporothrix – Penicillium marneffei, – . 42 Curs 2006/2007
  • 43. Candidiasis sistémica El h. Cándida puede provocar infecciones sistémicas graves como candidiasis diseminada del tracto urinario, cardiaca, pulmonar, del sistema nervioso central, del peritoneo, hígado, bazo, vesícula biliar, ojos, etc. Los factores que predisponen a este tipo de candidiasis son: -Las prótesis cardíacas -las alteraciones del sistema inmunológico (lupus, tratamiento, etc) -Los antibióticos.Los costicosteriodes -Las maniobras que facilitan la entrada de las cándidas a la sangre (catéteres....) -Neoplasias -La diabetes -Neutropenia -Otros: desnutrición, drogadicción, intervenciones quirúrgicas, quemaduras, ... 43 Curs 2006/2007
  • 44. Candidiasis sistémica Estas candidiasis no son diseminaciones a partir de las superficiales EXCEPTO en prematuros Es un oportunista, que pueden producir la muerte Métodos poco fiables de diagnosticar, pronosticar la enfermedad Se manifiesta con fiebre, sin que existan síntomas específicos Se confunde con una infección bacteriana No existen muchos antifúngicos que puedan hacerle frente La Candidemia es una infección sistémica fúngica, que prolifera y afecta órganos y tejidos de todo el cuerpo: riñones, hígado, huesos, músculos, articulaciones, bazo, ojos, (candidiasis sistémicas) Típico en inmunocomprometidos 44 Curs 2006/2007
  • 45. Candidiasis sistémica La Candida solamente puede permanecer por un corto tiempo en la sangre cuando un órgano interno está infectado, así es que los análisis de sangre Endoftalmitis no son siempre Conduce a la ceguera confiables. 45 Curs 2006/2007
  • 46. Candidiasis. Diagnóstico 46 Curs 2006/2007
  • 47. Candidiasis. Diagnóstico Colonias de Candida en ADS a 37º Colonias de Cryptococcus en CGB a 37º 47 Curs 2006/2007
  • 48. Candidiasis sistémica Interpretacion: El cultivo positivo de sangre, u otros fluidos estériles o tejidos biopsiados se considera significativo. La lisis y centrifugación es el método mas sensible para el aislamiento de Candida en sangre. Sin embargo, el cultivo positivo de muestras no estériles como esputos, orina, heces, drenajes, etc., son de bajo valor diagnostico. Recordar que la Candida es habitualmente aislado de la boca, vagina, y demás mucosas, individuos normales sin candidiasis. Recordar: Los h. parásitos sistémicos del hombre son, en la mayoría de los casos, difásicos, con un aspecto levaduriforme cuando invaden tejidos, en fase parasitaria (o cuando son cultivados a 37º C), y en forma de micelio o seudomicelio cuando se hallan en fase saprofítica (a temperatura ambiente en un medio pobre)... 48 Curs 2006/2007
  • 49. Micosis sistémicas oportunistas H. inferiores (zigomicetos o ficomicetos) Rhizopus, Rhizomucor, Mucor, Absidia H. superiores Aspergillus, Cladosporium, Fusarium y Penicillum 49 Curs 2006/2007
  • 50. Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores) Aspergillus, Fusarium, Cladosporium y Penicillum (según frecuencia) Estos h. crecen bien en ADS a 37 ºC con ciclohexomida Su identificación a nivel de género suele ser fácil Patología muy variada: desde benignas (otitis, asma) a complicadas (infección pulmonar, fungemia, etc) La granulopenia es el factor predisponente más común Son h. contaminantes en microbiología Producción de toxinas (elastasa, restrictocina, fumigatoxina, etc.) 50 Curs 2006/2007
  • 51. Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores) Aspergillus Aspergillus (esputo) Aparece en forma de brotes hospitalarios tras obras: Nosocomial Ubicuo: Está en el polvo ambiente y tierra (requiere poca humedad) • Conidias pequeñas que son aspiradas fácilmente ⇒ infección en pulmón y senos • Crecer a 37ºC ⇒ afecta al hombre • Su capacidad de adherencia a endotelios ⇒ invaden vasos 51 Curs 2006/2007
  • 52. Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores) Aspergillus • Onicomicosis, sinusitis y otomicosis (raros). En inmunodepres • Alérgia: Aspergilosis pulmonar alérgica (IgE totales y las IgG anti-Aspergillus en suero) ⇒fibrosis pulmonar en trabajadores de molinos de grano, de silos, etc. • Aspergilosis pulmonar invasiva: En leucemias, y neutropenias. La infección puede diseminarse por vía hematógena. Mortalidad muy elevada. ELISA, IFI ¡NO existe tratamiento efectivo! TÍPICO DE LOS QUIRÓFANOS, INCLUSO EN PERSONAS NORMALES • Aspergiloma (puede ser asintomático) tuberculosis 52 Curs 2006/2007
  • 53. Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores) Aspergillus Diagnóstico: clínico, radiológico, histológico, microbiológico y serológico. Temperatura óptima de crecimiento: 37º C pudiendo ser visibles los micelios a las 48 h. KOH, Calcofluor Se debe considerar la posibilidad de contaminación Aspergillus fumigatus (85%) 53 Curs 2006/2007
  • 54. Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores) Fusarium • Patógenos facultativos • En materiales en descomposición • Contaminación en los laboratorios de microbiología (+++ ) ν • Antes se consideraba no patógeno (patologia emergente) • Distribución amplia: suelo, plantas y del aire. Cosmopolita • Queratitis (córnea), onicomicosis, fungemia sistémica. Todas en inmunosuprimidos • Inhalación de las esporas • Capacidad para adherirse al plástico: catéteres y lentes de contacto 54 Curs 2006/2007
  • 55. Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores) Cladosporium (dematiáceo) De las esporas en el ambiente un 98% correspondieron a Cladosporium Características similares al anterior pero menos frecuente 55 Curs 2006/2007
  • 56. Micosis sistémicas oportunistas (H. superiores) Penicillum Algunas epecies causan infección letal sistémica con fiebre y anemia similar a la cryptococcosis diseminada en inmunocomprometidos (VIH) Similar al los anteriores 56 Curs 2006/2007
  • 57. Micosis sistémicas oportunistas (zigomicetos) Mucor, Rhizomucor, Absidia y Rhizopus (según frecuencia) Producen zigomicosis (mucormicosis) Crecen bien y rápido (48-72 horas) en ADS SIN CICLOHEXIMIDA a temperatura de 25, 37 o 45Cº según especies (factor diagnóstico) ⇒ colonias características. La adscripción precisa a un género es difícil Hábitat natural: materia orgánica en descomposición (geofílico) Distribución mundial El hongo ingresa habitualmente a través del tracto respiratorio Mortalidad elevada (80%) Frecuente contaminante de MC de laboratorio 57 Curs 2006/2007
  • 58. Micosis sistémicas oportunistas (zigomicetos) Mucor Se da especialmente en neutropenia primaria o secundaria esporangiosporas y esporangio 58 Curs 2006/2007
  • 59. Micosis sistémicas oportunistas (zigomicetos) Rhizomucor Cigomicosis generalmente pulmonar Esporangiospora 59 Curs 2006/2007
  • 60. Micosis sistémicas oportunistas (zigomicetos) Absidia Absidiosis, generalmente pulmonar y rinocerebral. SIDA y RN Esporangio piriforme 60 Curs 2006/2007
  • 61. Absidia Corte histológico 61 Curs 2006/2007
  • 62. Micosis sistémicas oportunistas (zigomicetos) Rhizopus Se da especialmente en diabéticos 62 Curs 2006/2007
  • 63. Criptococcosis • Infección subaguda o crónica, pulmonar o meníngea, causada por la levadura Cryptococcus neoformans • Especie ubicua en la naturaleza • No se ha desarrollado Ag adecuado para la intradermorreacción • Su hábitat es el suelo contaminado con material fecal de aves • El reservorio más importante son las palomas, sobre todo la urbana (Columbia livia) • El hongo no está en deyecciones recientes, pero sí en las acumuladas en aleros, áticos o balcones donde duermen las palomas • La enfermedad dependerá de la eficacia fagocítica de los macrófagos, así como de la RI celular del huésped. • La forma pulmonar suele ser asintomática e inespecífica • La forma cutánea se da en inmunocomprometidos • La más ν peligrosa en la cerebral: meningitis 63 Curs 2006/2007
  • 64. Criptococcosis • El LCR es la muestra más adecuada para la observación de las levaduras capsuladas • Aglutinación (látex) para la determinación polisacárido capsular • En la forma diseminada cualquier órgano puede estar afectado • El aislamiento a partir de la sangre es el método diagnóstico más eficaz en los enfermos con SIDA • El aislamiento de C. neoformans es sencillo pues crece bien en los medios habituales, donde se aprecian las colonias mucoides características Tejido pulmonar con levaduras 64 Curs 2006/2007
  • 65. Criptococcosis Criptococcosis cutánea 65 Curs 2006/2007 En LCR
  • 66. Esporotricosis La esporotricosis, causada por el h. dimórfico es generalmenete una infection cronica subcutanea, con tendencia a ulcerar, producida por rasgaduras en la piel. La padecen ganaderos, forestales, agricultores, etc. Recientemente está aumentando el nº de casos de enfermemdad pulmonar diseminada, en inmunodeprimidos, cuando inhalan esporas. Tb se implican los huesos y meninges. CBIH a 30º Simula una tuberculosis. Es universal y el habitat es el suelo. CBIH a 37º 66 Curs 2006/2007
  • 67. Esporotricosis Las colonias claras son típicas de cultivos jóvenes. Con el tiempo pasan a ser oecuras y muy rugosas. Es un h. dematiáceo. Anverso y reverso de colonias “viejas” en ADS “inclinado” Levaduras a 37º Cultivo a a 30º La pigmentación, formación de micelio y conidias en sus conidióforos se favorecen con medios especiales como agar Czapek o harina de maiz 67 Curs 2006/2007
  • 68. Esporotricosis La IDR es importante y es positiva para un 95 % de la esporitricosis no subcutánea. Para las subcutáneas el 50 % Tb existe una prueba de intradermorreacción PAS Levadura en tejido 68 Curs 2006/2007