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1 von 36
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
1
Defensa
Trabajo Especial de Grado
R. Vegas
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
2
Tutor: Dr. Elis Aldana.
Jurado: Prof. Elis Aldana.
Prof. Elsa Nieves.
Prof. Laura Almeida.
Prof. Maritza Alarcón.
Laboratorio de Entomología “Herman Lent”
Universidad de Los Andes
Mérida - Venezuela
Determinación de respuestas no
condicionadas en Rhodnius proxilus Stål
1859, en condiciones de laboratorio.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
3
Rhodnius prolixus
 Principal Vector en
Venezuela.
 Asociación al domicilio
humano.
 Estudios del
comportamiento
alimenticio.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
4
Comportamiento alimenticio
R. prolixus
Fisiología y
Ecología sensorial
Psicología
del Aprendizaje
Comportamiento
La orientación como
respuesta innata
Categorías del aprendizaje:
•No asociativo
•Asociativo
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
5
Hipótesis del Trabajo
 El comportamiento de búsqueda de alimento
en R. prolixus revela respuestas innatas que
pueden ser modificadas por la experiencia.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
6
Objetivo General
 Estudiar las respuestas locomotoras y de
orientación para la búsqueda de la fuente de
alimentación en R. prolixus, en condiciones
de laboratorio.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
7
Objetivos Específicos
 Determinar la existencia de aprendizaje
asociativo frente a estímulos de temperatura y
olor.
 Determinación del patrón locomotor de
orientación frente al antebrazo humano como
estímulo incondicionado.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
8
Materiales y métodos
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
9
Material biológico
 Adultos de R. prolixus.
Alimentados sobre gallina
(Gallus gallus
domesticus), mantenidos a
28 – 30 ºC y 65 – 70 %HR.
15 a 21 días de ayuno hasta
el momento de los ensayos.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
10
Test de Adquisición – Extinción.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
11
Test
Adquisición - Extinción
Alimentador artificial de
insectos
hematófagos, descrito
por Aldana et al. (2005).
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
12
Test de Adquisición-Extinción.
 Estímulo no condicionado
(EI): 36ºC.
 Estímulo condicionado (EC):
– Olor de Orina de Mapache
– Olor de Cebo de Ciervo.
6cm5cm
7cm
50cc
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
13
Test de Adquisición-Extinción.
Adquisición
24 ensayos EC-EI
(1 al 24) de 2 min.
c/u
Frecuencia de
aproximación:
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
14
Test de Adquisición-Extinción.
Extinción
24 ensayos EC-EI
(24 al 48) de 2
min. c/u
Frecuencia de
aproximación:
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
15
Test de Orientación
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
16
Test de Orientación
 Estímulo atrayente:
Antebrazo humano.
 El cuadrante de posición
en un instante será aquel
donde se encuentra el
extremo anterior de la
cabeza.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
17
Test de Orientación
Trayectorias
1 2 3 4
5 6 7 8
9 10 11 12
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17 18 19 20
21 22 23 24
11
1 2 3 4
5 6 7 8
9 10 12
13 14 15 16
17 18 19 20
21 22 23 24
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
18
Resultados
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
19
Test Adquisición – Extinción
Cebo de Ciervo (EC)
0,0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1,0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48
Ensayo
Frecuenciadeaproximación
Olor Cebo de Ciervo (EC) + 36ºC (EI)
Temperatura 36ºC (EI)
Temp. ambiente (21-23ºC)
Temp. ambiente + olor Cebo de Ciervo (EC)
Figura 2.1. Frecuencia de aproximación de Rhodnius prolixus durante la fase de
adquisición y extinción con cebo de ciervo como EC y la temperatura como EI.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
20
Test Adquisición – Extinción
Orina de Mapache (EC)
0,0
0,1
0,2
0,3
0,4
0,5
0,6
0,7
0,8
0,9
1,0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 2425 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48
Ensayo
Frecuenciadeaproximación
Olor Mapache (EC)
Temp. 36ºC (EI)
Temp. ambiente (21-23ºC)
Temp. ambiente con olor Mapache
Figura 2.2. Frecuencia de aproximación de Rhodnius prolixus durante la fase
de adquisición y extinción con orina de mapache como EC y la temperatura
como EI.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
21
11
1 2 3 4
5 6 7 8
9 10 12
13 14 15 16
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21 22 23 24
Test
Orientación
A B
C
E F
D
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
22
Test de Orientación
Antebrazo humano, sin fragancia.
0,00
0,05
0,10
0,15
0,20
0,25
0,30
0,35
0,40
0,45
0,50
A1
A2
A3
A4
A5
A6
A7
A8
A9
A10
A11
B1
B2
B3
C1
C2
C3
C4
C5
D1
D2
D3
D4
D5
D6
D7
D8
D9
D10
D11
D12
D13
D14
D15
D16
D17
E1
F1
Trayectoria
Frecuenciadeaproximación
Figura 3.1. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano
a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes enumerados
Figura 3.4. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano
a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes de letras
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
23
Test de Orientación
Antebrazo con fragancia Almizcle
0,00
0,05
0,10
0,15
0,20
0,25
0,30
0,35
0,40
0,45
0,50
A1
A10
A12
A13
A14
A15
A16
A17
A18
A27
B3
B4
B5
B6
B7
B8
C4
C6
C7
C8
C9
C10
C11
C12
C13
C14
C15
D1
D2
D18
D19
D20
D21
E1
E2
Trayectoria
Frecuenciadeaproximación
Figura 4.1. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano
fragancia almizcle a través de las diferentes trayectorias descritas por
cuadrantes enumerados
Figura 4.2. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano
fragancia almizcle a través de las diferentes trayectorias descritas por
cuadrantes de letras
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
24
Test de Orientación
Antebrazo con fragancia Ruda
0,00
0,05
0,10
0,15
0,20
0,25
0,30
0,35
0,40
0,45
0,50
A1
A9
A19
A20
A21
A22
A23
A24
A25
A26
B6
B9
B10
B11
B12
B13
C10
C15
C16
C17
C18
C19
D1
D2
D9
D12
D21
D22
D23
D24
E3
E4
F2
F3
F4
F5
G1
Trayectoria
Frecuenciadeaproximación
Figura 5.1. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo
humano fragancia ruda a través de las diferentes trayectorias descritas
por cuadrantes enumerados
Figura 5.2. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano
fragancia ruda a través de las diferentes trayectorias descritas por
cuadrantes de letras
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
25
Discusión de los resultados
1) Test Adquisición – Extinción
2) Test de Orientación
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
26
Test
Adquisición - Extinción
 Falta de estudios de
aprendizaje en insectos
hematófagos.
 Alonso et al. (2003).
 Triatominos y los
paradigmas del
aprendizaje.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
27
Test
Adquisición - Extinción
 Sulbarán (2005).
 No se encontraron
evidencias de
aprendizaje asociativo
en R. prolixus.
 Números de ensayos
 Intensidad del estímulo
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
28
Test
Adquisición - Extinción
 Intervalo de tiempo de
exposición de EI – EC
 Mientras más
corto, mayor es la
asociación
Intervalo entre ensayos
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
29
Lecciones para el futuro
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
30
Qué funcionó bien
 Memoria pre-imagal
con los olores
almizcle, cebo de ciervo
u orina de mapache
(Sulbarán, 2005).
 Temperatura 36ºC (EI).
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
31
Test
Orientación
 Se evidenció un patrón de orientación del insecto hacia el
antebrazo humano, revelado por dos trayectorias de
aproximación con frecuencias superiores a 0,10 (B,D,F
0,36 y A,C,E 0,43) y además ocho trayectorias más con
valores inferiores a 0,10.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
32
Test
Orientación
 Trayectorias A,C,E y B,D,F
 Trayectoria A,B,D,F
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
33
Test
Orientación (Estudios Futuros)
 Estas evidencias señalan un efecto sobre la fisiología
sensorial en R. prolixus de las fragancias almizcle o
ruda, y dan inicio a un nuevo tema de estudio de la
fisiología de los receptores del insecto, que por
escapar a los alcances del presente trabajo, no
profundizaremos en el mismo.
 Las sustancias almizcle y ruda para la realización de
estudios futuros enfocados en la fisiología sensorial.
 Consideración de estas fragancias como posible
medida, en estudio, para el empleo de control
vectorial de triatominos; sustancias no toxicas para el
ser humano.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
34
Conclusiones
(Test Adquisición – Extinción)
 No se hallaron evidencias de Condicionamiento Clásico
en R. prolixus, con 36 ºC como EI y los olores orina de
mapache y cebo de ciervo como EC.
 La temperatura a 36 ºC demostró ser un EI efectivo
para evocar la extensión de la probóscide y
aproximación a la fuente alimenticia como Respuesta
Incondicionada (RI) en R. prolixus.
 Los olores empleados como EC, no evocan por si solos
la RI, podrían ser empleados en estudios futuros de
aprendizaje y comportamiento de orientación.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
35
Conclusiones
(Test de Orientación)
 El sistema experimental empleado en el test de
orientación resultó ser eficiente para revelar las
trayectorias de aproximación del insecto a un atrayente
natural como el antebrazo humano en condiciones de
laboratorio.
 Los fragancias almizcle y ruda, demostraron tener
efecto sobre la orientación de R. prolixus.
Laboratorio de Entomología
"Herman Lent"
36
Preguntas y comentarios
Laboratorio de Entomología “Herman Lent”
Universidad de Los Andes
Mérida - Venezuela

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  • 1. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 1 Defensa Trabajo Especial de Grado R. Vegas
  • 2. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 2 Tutor: Dr. Elis Aldana. Jurado: Prof. Elis Aldana. Prof. Elsa Nieves. Prof. Laura Almeida. Prof. Maritza Alarcón. Laboratorio de Entomología “Herman Lent” Universidad de Los Andes Mérida - Venezuela Determinación de respuestas no condicionadas en Rhodnius proxilus Stål 1859, en condiciones de laboratorio.
  • 3. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 3 Rhodnius prolixus  Principal Vector en Venezuela.  Asociación al domicilio humano.  Estudios del comportamiento alimenticio.
  • 4. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 4 Comportamiento alimenticio R. prolixus Fisiología y Ecología sensorial Psicología del Aprendizaje Comportamiento La orientación como respuesta innata Categorías del aprendizaje: •No asociativo •Asociativo
  • 5. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 5 Hipótesis del Trabajo  El comportamiento de búsqueda de alimento en R. prolixus revela respuestas innatas que pueden ser modificadas por la experiencia.
  • 6. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 6 Objetivo General  Estudiar las respuestas locomotoras y de orientación para la búsqueda de la fuente de alimentación en R. prolixus, en condiciones de laboratorio.
  • 7. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 7 Objetivos Específicos  Determinar la existencia de aprendizaje asociativo frente a estímulos de temperatura y olor.  Determinación del patrón locomotor de orientación frente al antebrazo humano como estímulo incondicionado.
  • 8. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 8 Materiales y métodos
  • 9. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 9 Material biológico  Adultos de R. prolixus. Alimentados sobre gallina (Gallus gallus domesticus), mantenidos a 28 – 30 ºC y 65 – 70 %HR. 15 a 21 días de ayuno hasta el momento de los ensayos.
  • 10. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 10 Test de Adquisición – Extinción.
  • 11. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 11 Test Adquisición - Extinción Alimentador artificial de insectos hematófagos, descrito por Aldana et al. (2005).
  • 12. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 12 Test de Adquisición-Extinción.  Estímulo no condicionado (EI): 36ºC.  Estímulo condicionado (EC): – Olor de Orina de Mapache – Olor de Cebo de Ciervo. 6cm5cm 7cm 50cc
  • 13. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 13 Test de Adquisición-Extinción. Adquisición 24 ensayos EC-EI (1 al 24) de 2 min. c/u Frecuencia de aproximación:
  • 14. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 14 Test de Adquisición-Extinción. Extinción 24 ensayos EC-EI (24 al 48) de 2 min. c/u Frecuencia de aproximación:
  • 15. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 15 Test de Orientación
  • 16. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 16 Test de Orientación  Estímulo atrayente: Antebrazo humano.  El cuadrante de posición en un instante será aquel donde se encuentra el extremo anterior de la cabeza.
  • 17. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 17 Test de Orientación Trayectorias 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 11 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24
  • 18. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 18 Resultados
  • 19. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 19 Test Adquisición – Extinción Cebo de Ciervo (EC) 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 Ensayo Frecuenciadeaproximación Olor Cebo de Ciervo (EC) + 36ºC (EI) Temperatura 36ºC (EI) Temp. ambiente (21-23ºC) Temp. ambiente + olor Cebo de Ciervo (EC) Figura 2.1. Frecuencia de aproximación de Rhodnius prolixus durante la fase de adquisición y extinción con cebo de ciervo como EC y la temperatura como EI.
  • 20. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 20 Test Adquisición – Extinción Orina de Mapache (EC) 0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 2425 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 Ensayo Frecuenciadeaproximación Olor Mapache (EC) Temp. 36ºC (EI) Temp. ambiente (21-23ºC) Temp. ambiente con olor Mapache Figura 2.2. Frecuencia de aproximación de Rhodnius prolixus durante la fase de adquisición y extinción con orina de mapache como EC y la temperatura como EI.
  • 21. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 21 11 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Test Orientación A B C E F D
  • 22. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 22 Test de Orientación Antebrazo humano, sin fragancia. 0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40 0,45 0,50 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 A8 A9 A10 A11 B1 B2 B3 C1 C2 C3 C4 C5 D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7 D8 D9 D10 D11 D12 D13 D14 D15 D16 D17 E1 F1 Trayectoria Frecuenciadeaproximación Figura 3.1. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes enumerados Figura 3.4. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes de letras
  • 23. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 23 Test de Orientación Antebrazo con fragancia Almizcle 0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40 0,45 0,50 A1 A10 A12 A13 A14 A15 A16 A17 A18 A27 B3 B4 B5 B6 B7 B8 C4 C6 C7 C8 C9 C10 C11 C12 C13 C14 C15 D1 D2 D18 D19 D20 D21 E1 E2 Trayectoria Frecuenciadeaproximación Figura 4.1. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano fragancia almizcle a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes enumerados Figura 4.2. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano fragancia almizcle a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes de letras
  • 24. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 24 Test de Orientación Antebrazo con fragancia Ruda 0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40 0,45 0,50 A1 A9 A19 A20 A21 A22 A23 A24 A25 A26 B6 B9 B10 B11 B12 B13 C10 C15 C16 C17 C18 C19 D1 D2 D9 D12 D21 D22 D23 D24 E3 E4 F2 F3 F4 F5 G1 Trayectoria Frecuenciadeaproximación Figura 5.1. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano fragancia ruda a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes enumerados Figura 5.2. Frecuencia de aproximación de R. prolixus al antebrazo humano fragancia ruda a través de las diferentes trayectorias descritas por cuadrantes de letras
  • 25. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 25 Discusión de los resultados 1) Test Adquisición – Extinción 2) Test de Orientación
  • 26. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 26 Test Adquisición - Extinción  Falta de estudios de aprendizaje en insectos hematófagos.  Alonso et al. (2003).  Triatominos y los paradigmas del aprendizaje.
  • 27. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 27 Test Adquisición - Extinción  Sulbarán (2005).  No se encontraron evidencias de aprendizaje asociativo en R. prolixus.  Números de ensayos  Intensidad del estímulo
  • 28. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 28 Test Adquisición - Extinción  Intervalo de tiempo de exposición de EI – EC  Mientras más corto, mayor es la asociación Intervalo entre ensayos
  • 29. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 29 Lecciones para el futuro
  • 30. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 30 Qué funcionó bien  Memoria pre-imagal con los olores almizcle, cebo de ciervo u orina de mapache (Sulbarán, 2005).  Temperatura 36ºC (EI).
  • 31. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 31 Test Orientación  Se evidenció un patrón de orientación del insecto hacia el antebrazo humano, revelado por dos trayectorias de aproximación con frecuencias superiores a 0,10 (B,D,F 0,36 y A,C,E 0,43) y además ocho trayectorias más con valores inferiores a 0,10.
  • 32. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 32 Test Orientación  Trayectorias A,C,E y B,D,F  Trayectoria A,B,D,F
  • 33. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 33 Test Orientación (Estudios Futuros)  Estas evidencias señalan un efecto sobre la fisiología sensorial en R. prolixus de las fragancias almizcle o ruda, y dan inicio a un nuevo tema de estudio de la fisiología de los receptores del insecto, que por escapar a los alcances del presente trabajo, no profundizaremos en el mismo.  Las sustancias almizcle y ruda para la realización de estudios futuros enfocados en la fisiología sensorial.  Consideración de estas fragancias como posible medida, en estudio, para el empleo de control vectorial de triatominos; sustancias no toxicas para el ser humano.
  • 34. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 34 Conclusiones (Test Adquisición – Extinción)  No se hallaron evidencias de Condicionamiento Clásico en R. prolixus, con 36 ºC como EI y los olores orina de mapache y cebo de ciervo como EC.  La temperatura a 36 ºC demostró ser un EI efectivo para evocar la extensión de la probóscide y aproximación a la fuente alimenticia como Respuesta Incondicionada (RI) en R. prolixus.  Los olores empleados como EC, no evocan por si solos la RI, podrían ser empleados en estudios futuros de aprendizaje y comportamiento de orientación.
  • 35. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 35 Conclusiones (Test de Orientación)  El sistema experimental empleado en el test de orientación resultó ser eficiente para revelar las trayectorias de aproximación del insecto a un atrayente natural como el antebrazo humano en condiciones de laboratorio.  Los fragancias almizcle y ruda, demostraron tener efecto sobre la orientación de R. prolixus.
  • 36. Laboratorio de Entomología "Herman Lent" 36 Preguntas y comentarios Laboratorio de Entomología “Herman Lent” Universidad de Los Andes Mérida - Venezuela