curso de capacitação técnica

1. IMUNO-HEMATOLOGIA
Sistemas de grupos
sanguíneos
Maria Auxiliadora N Ferreira

2. DEFINIÇÃO
Estudo e classificação dos grupos sanguíneos através de reações
imunológicas entre antígenos e anticorpos.

3. HISTÓRICO
• Início do século XX – Landsteiner verifica a incompatibilidade
sanguínea entre as pessoas
•Reação de amostras de sangue de diversas pessoas Aglutinação
• Substâncias do plasma X Substâncias presentes na membrana das
hemácias
•1901, Landsteiner descreveu os tipos A, B e O das hemácias,
posteriormente, Decastello e Sturli descreveram o tipo AB.

4. Importância na Transfusão:
• Definir o fenótipo, sobretudo ABO e RhD dos doadores e receptores de
sangue.
• Pesquisar a presença de anticorpos no plasma do receptor contra antígenos
presentes na hemácias do doador.
• Evitar a reação transfusional, que pode ser leve a grave, podendo ocasionar a
morte do receptor.

5. ANTÍGENOS
Substâncias reconhecidas pelo organismo como “não-próprias”, podendo
se ligar especificamente a uma molécula de anticorpo ou receptor de célula
T.
• Antígeno completo ou imunógeno: é capaz de ativar uma resposta
imune.
• Antígeno incompleto: não é capaz de ativar uma resposta imune.
• Antígenos Eritrocitários: antígenos de grupos sanguíneos sendo A, B e
D os principais.

6. ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS
São substâncias produzidas a partir da ativação dos glóbulos brancos do
sangue (linfócitos B), em resposta à introdução de um dado antígeno.
• Funções:
Ligar-se ao antígeno Neutralização do Ag
Opsonização
Ativação dos FC

7. Pertencem a fração gama(gamaglobulinas), podendo ser classificadas :
IgG, IgM, IgE, IgA, IgD.
IgM
• Molécula pentamérica
• Capaz de ativar o sistema complemento
• Não atravessa a barreira placentária
• São Ac “frios” (a fixação do Ac sobre o Ag é máxima em baixa
temperatura 4 a 18°C)
IgG
• Principal imunoglobulina sérica (75%)
• Molécula monomérica
• Atravessa a barreira placentária
• São produzidas em respostas secundárias

8. ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS
• Anticorpos naturais: Ac formados contra antígenos não presentes
no organismo, sem necessidade de contato prévio com o Ag.
Surgem em resposta a antígenos presentes em bactérias e alimentos
com estrutura semelhante a dos grupos sanguíneos.
Ex: Ac sistema ABO (em geral da classe IgM)
• Anticorpos adquiridos: Formam-se após a ativação do sistema
imune.
Ex: Ac adquiridos por resposta imune a transfusão e/ou gravidez.
•Anticorpos irregulares: anticorpos formados a partir da exposição a
um antígeno. A ocorrência não é esperada.
Ex: aloimunização pelo sistema Rh

9. ANTICORPOS OU IMUNOGLOBLULINAS
• Anticorpos completos: promovem aglutinação de hemácias em meio
salino. Ex: IgM
• Anticorpos incompletos: reagem com antígeno mas não promovem
aglutinação de hemácias. Precisam de um meio artificial que promova a
aglutinação para visualização da reação. Ag-Ac. Ex: IgG

10. Fenômeno da aglutinação de hemácias
(HEMAGLUTINAÇÃO)
• É a técnica que objetiva detectar e quantificar as
reações Ag-Ac
• A aglutinação das hemácias ocorre quando há uma
diminuição das forças de repulsão das hemácias

11. TESTE DAANTIGLOBULINA HUMANA (TAG)
• Coombs (1945) : Sensibilização de animais com injeções de imunoglobulinas
humanas. Levando a produção de Ac contra a fração Fc das mesmas.
• Soro de coombs ( Ac contra Ac humanos – antiglobulinas humanas)
Direto- Hemácias sensibilizadas por Ac ou Fc (DHPN)
• Teste da antiglobulina
Indireto- Ac no soro/plasma (identificação de ac irregulares)

12. Sistema ABO
• Primeiro sistema de grupo sanguíneo a ser descoberto em 1900
• É o principal sistema de grupo sanguíneo
• Os genes ABO localizados no cromossomo 9, tem relação de
codominância. (A1, A2, B,O)
• Gene O é considerado silencioso
• Possui anticorpos de ocorrência “natural”
• Os Ac ABO são dirigidos contra os Ag ausentes nas hemácias do
próprio individuo. São de classe IgM e IgG, ativos a 37oC e
capazes de fixar e ativar o complemento, provocando hemólises
intravasculares severas em casos de incompatibilidades
transfusionais

13. Antígenos dos sistema ABO
• Presentes na membrana de diversos tecidos
• Encontrados na forma solúvel na saliva, leite, lágrima, urina,
líquido amniótico, etc.
• São produtos secundários dos genes ABO
• Os produtos primários são enzimas (glicosiltransferases) capazes
de adicionar carboidratos sobre uma estrutura precursora na
membrana da hemácia
• A expressão dos genes ABO depende da ação de outro gene, o
gene H (FUT1), localizado no cromossomo 19

14. Biossíntese dos Ag do sistema ABO
A- Ag H
B- Ag A
C- Ag B

16. Determinação do fenótipo ABO
• Prova Direta :Detecção de antígenos através do uso de de anti-soros
conhecidos
• Prova Reversa: Detecção de anticorpos através do uso de hemácias
conhecidas

17. MÉTODOS DE TIPAGEM
TUBOS
GEL CENTRIFUGAÇÃO
MICROPLACAS

18. Tubo
Mais difundida. Muito utilizada para resolver problemas nos resultados.
Realizada em pipetagem manual e de rotinas pequenas.

19. Microplaca
Mais utilizada para doadores, pode ser para sistemas automatizados ou
pipetarem manual .

20. Colunas de aglutinação
Gel centrifugação, para pipetagem manual ou sistema automatizado.

21. Principais variações das técnicas
TUBOS 15 SEGUNDOS
MICROPLACA 1 a 2 MINUTOS
COLUNA 9 a 10 MINUTOS
Tempo médio de centrifugação
TUBOS 2,5 a 5%
MICROPLACA 1 a 3%
COLUNA 0,8 a 1,2% ou 2,5 a 5%
Concentração da suspensão de hemácias

22. COMPATIBILIDADE ABO PARA HEMÁCIAS

23. Sistema Rh
• É o mais complexo sistema de grupos sanguíneos
• Depois do sistema ABO, é o de maior importância clinica
• Sistema composto de aproximadamente 49 antígenos
• Cinco deles (D,E,e,C,c) são responsáveis por 99% dos problemas clínicos
associados ao sistema Rh
• É exclusivamente eritrocitário ( Associado com o citoesqueleto da
membrana pela anquirina e proteína 4.2)
• Produzido a partir 10º semana de vida IU

24. • Controle da produção das Ptns não glicosadas RH por 2 genes(P34-36)
• O gene RHD codifica a produção da proteína RhD que carreia o antígeno D
• Gene RHCE que possui vários alelos (RHCe, RHcE, RHce, RHCE,) que
codifica a produção da proteína RhCE(CE)
• Indivíduos RhD positivos (genes RHD e RHCE), enquanto os negativos
apresentam somente o gene RHCE
Sistema Rh

25. HISTÓRICO
•1939 :Levine e Stetson atribuem a causa da eritroblastose fetal de um recém nascido à
atividade de Ac maternos contra suas hemácias;
•1940 : Landsteiner e Wiener produzem por imunização de coelhos com hemácias de
macacos Rhesus , soro Ac capazes de aglutinar 85% das hemácias humanas;

26. Variantes fenotípicas do Ag D
1)D fraco
• Indivíduos portadores de D fraco apresentam menor expressão de antígenos D
nas hemácias
D normal: 10.000 a 25.000 sítios antigênicos
D fraco: 66 a 5.000 sítios antigênicos
• Variação qualitativa do antígeno RhD que produz uma alteração quantitativa
de sítios antigênicos expressos na membrana eritrocitária.
• Indivíduos com esse fenótipo não produzem anti D caso recebam transfusão
de hemácias D normal.
As hemácias D fraco são consideradas como Rh POSITIVO, podendo
provocar aloimunizações transfusional ou feto-materna

27. 2)D Parcial
• Caracterizados pela ausência de um ou mais epítopos do antígeno
D que foram substituídos por epítopos da proteína CcEe
• Alteração qualitativa da proteína RhD na porção extracelular
• Produção de anticorpos anti-D contra as subunidades ausentes.

28. Anticorpos Rh
• Aloimunização por transfusão sanguínea ou gestação
• Classe IgG
• Responsáveis pela doença hemolítica do recém- nascido
• Clinicamente significativos
• Reagem otimamente a 37°C
• Não fixam complemento
• Hemólise extravascular
• Reação transfusional hemolítica retardada
• Uma vez formados, persistem por vários anos

29. Doença hemolítica Perinatal(DHPN)
1) Aloimunização materna
2) Incompatibilidade ABO entre Ag ABO fetais e os Ac naturais maternos

30. Condição: pai Rh+, mãe Rh- e filho Rh+.
1) Mãe Rh- é sensibilizada (exposta ao fator Rh por uma transfusão ou
primeira gestação de filho Rh +)
2) Mãe começa a produzir anti Rh
3) Em uma segunda gestação de filho Rh +, os anti Rh produzidos
passarão através da placenta atingindo o sangue da criança Rh+.
Ocorrerá a destruição das hemácias do feto (icterícia, anemia
hemolítica, insuficiência hepática, hepatoesplenomegalia e liberação
de eritroblastos).
DHPN

32. Procedimento após o parto
Administração de injeção intravenosa com anticorpos anti-Rh que
provocarão a destruição das hemácias fetais presentes na circulação
sanguínea materna.

33. Outros sistemas de grupos sanguíneos
de importância transfusional

34. Sistema Lewis – LE
•Sistema composto por 6 antígenos:
–Lea
–Leb
–Leab
–LebH
–ALeb
–BLeb

35. Sistema Lewis - LE
•Nome do gene: FUT3 (gene Lewis)
•Gene associado: FUT2 (gene secretor não ativo no eritroblasto )
•Genes herdados independentemente.
•Antígenos presentes nas hemácias e membranas de diversos
tecidos – considerados antígenos de histocompatibilidade
• Os genes FUT2 e FUT3 produzem enzimas
(fucosiltransferases) que atuam sobre a mesma substância de
base , produzindo as Ag Lea e H, respectivamente

36. Gene FUT 3 produz fucosiltransferase capaz de colocar uma fucose no N-acetil
glucosamina para produção do Ag Lea
Gene FUT 2 (secretor- Se) produz fucosiltransferase capaz de colocar uma fucose
na Galactose para produção do produzindo ag H solúvel

37. Sistema Lewis - LE
•Anticorpos
–IgM
–Não ocasionam a DHPN
•Hemácias fetais não expressam antígenos Lewis
• São capazes de fixar complemento e causar quadro
hemolítico grave

38. Sistema MNS
•Sistema formado por 43 antígenos
•Antígenos bem desenvolvidos ao nascimento
•Restritos a linhagem eritróide
•Associados a sialoglicoproteínas de membrana
(SGP)
–GPA e GPB transmembranas
•Função biológica:
–Manutenção do potencial zeta

39. Sistema MNS
•Anticorpos anti- M e anti-N:
–raramente causam DHPN
•Anticorpos anti-S e anti-s
–clinicamente significativos
–Produzem aloimunizações

40. OBRIGADA!!
Email:Camila.gil.pat@Hotmail.com