1. TÉCNICAS DE
MICROMANIPULACIÓN
CÓMO MEJORAR LAS TASA DE
GESTACIÓN
ESTHER GREGORI MACHÍ
Licenciada en Biología.
Máster en Biología Clínica y Experimental de la Reproducción.
Instituto FIVIR

2. HISTORIA
Patrick Steptoe y Robert Edwards
Primer “bebé probeta”.
Louise Brown, 1978.

3. HISTORIA
FIV convencional
Complejo Cumulo-Corona-Ovocito Cultivo ovocito-espermatozoides

4. EQUIPO de MICROMANIPULACIÓN

5. EQUIPO de MICROMANIPULACIÓN

6. EL OVOCITO
Espacio Perivitelino
Zona Pelúcida: glicoproteínas
Ooplasma
Oolema

8. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN
• “Zona Drilling”: ácido Tyrodes.
• “Partial Zona Dissection” PZD: incisión en la ZP.
• “Subzonal Insertion” SUZI: inserción de spzs en el espacio perivitelino.
• Yanagimachi, 1976.

9. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN
• ICSI “Intracytoplasmic Sperm Injection”: “Pregnancies after
intracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte”, Palermo
y cols., 1992.

10. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN
• ICSI
• IMSI
• Assisted Hatching: Eclosión Asistida.
• Eliminación de fragmentos.
• Transferencia de citoplasma.
• DGP: biopsia CP o blastómeras.
FUTURO:
• Clonación.
• Células madre.
• Transgénicos.

11. ICSI
• Denudación ovocitaria: Hyaluronidasa + pipeteo mecánico
• Caja de ICSI

12. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN
Ovocito VG
Ovocito MI
Ovocito MII

13. ICSI – Indicaciones
• Factor masculino grave: oligozoospermia, asteno, terato.
• Factor inmunológico: presencia Ac-antispz.
• “Sémenes valiosos”
• Fallos previos de FIV.
• DGP
• Baja respuesta.
• Mala calidad ovocitaria.
• Ovocitos desvitrificados.

14. ICSI - Modificaciones
• Ebner y cols., 2002: presión y succión
• Rienzi y cols, 2001.
Nagy y cols., 2002: ICSI por láser.
• Tesarik y cols., 2002: dislocación ooplasma.
• Baltaci y cols., 2009: activación piezoeléctrica.

15. IMSI: ICSI Altamente Magnificada

16. ASSISTED HATCHING
• Cohen, 1989.
• Objetivo: mejorar el potencial implantatorio.
• Metodología: perforación o adelgazamiento ZP
- Zona Drilling,
- PZD
- Ablación por láser
- Tratamiento enzimático
Balaban, 2002: evaluó los cuatro métodos
diferentes y concluyó que tenían similares tasas
de implantación y embarazo.

17. ASSISTED HATCHING
• INDICACIONES recomendadas:
• Ovocitos de pacientes mayores 37 años.
• Ovocitos ZP engrosada, color anormal.
• Valores elevado de FSH basal sérica.
• Fracaso repetido de implantación.
• Embriones de baja calidad.
• Embriones congelados/descongelados.
 Mayor incidencia gemelos monocigóticos y
embarazos ectópicos.

18. ELIMINACION
DE FRAGMENTOS

19. TRANSFERENCIA de CITOPLASMA
• Hipótesis: efectos ooplasma interfieren en
desarrollo e implantación.
• Ha habido embarazos pero faltan estudios
controlados para verificar sus beneficios.
• Futuro: implicaciones éticas.

20. CONTRACCIÓN ARTIFICIAL
CAVIDAD BLASTOCELE
• Blastocele: cavidad llena de agua.
• Para mejorar la vitrificación: reducción
blastocele y salida del agua.
• Las tasas de embarazo mejoran al compararlo
con un grupo control sin micromanipular.
• Mukaida: láser para contracción. Método más
simple y conveniente.

21. FUTURO
CLONACION
- Transferencia Nuclear de Células Somáticas
(SCNT)
- Clonación TERAPÉUTICA
- Clonación REPRODUCTIVA
CÉLULAS MADRE
TRANSGÉNICOS

22. MUCHAS GRACIAS