1. Пренатальна діагностика:
про що мовчить нормальний каріотип?
Д.О. Микитенко
Л.Я. Пилип
О.И.Соловйов
В. Д. Зукін
Харків 2013

2. Ситуації в перинатальній медицині, де
потрібно медико-генетичне
консультування
• Зміни в результатах скринингу
• Наявність хворого члена сім’ї
• Наявність патології при УЗД

3. Каріотипування
46,XY,Yqh+,t(5;19)(q11.1;q12)
3

4. БВХ або амніоцентез?
БВХ
Переваги
Недоліки

5. БВХ або амніоцентез?
Амніоцентез
Переваги
Недоліки

6. БВХ або амніоцентез?
В.Х.
Амніоцити

7. Суть проблеми
Обмежена роздільна здатність стандартного
каріотипування (можливість визначення анеуплоїдій та
структурних перебудов із залученням районів
хромосом розміром понад 10 Mb) визначає обмежені
діагностичні можливості стандартного цитогенетичного
дослідження в пренатальній діагностиці

8. Товщина комірцевого простору –
безсумнівний маркер анеуплоїдій.
А якщо каріотип нормальний?

9. Збільшення NT + нормальний стандартний каріотип маркер, асоційований з:
Внутрішньоутробною
загибеллю
4991 еуплоїдних
плодів зі збільшенням
комірцевого простору
У випадках NT > 6,5
мм – 20% вн.утробна
загибель, випадки
переривання
вагітності.
Вадами серця
NT = 2,5 – 3,5 мм
– 5%
NT = 8,5 мм –
84%
Генетичними
синдромами, що не
виявляються за
допомогою
стандартного
каріотипування
NT –
неспецифічний
маркер
аномального
розвитку
Bilardo et al. Increased nuchal translucency in euploid fetuses—what
should we be telling the parents? // Prenatal Diagnosis. 2010

10. •
12-летний опыт пренатального определения микроделеции 22q11.2
22q11.2 deletion syndrome – наиболее частый микроделеционный синдром (частота от 1:4000
до 1:6000 новорожденных)
Фенотипическое проявление разное: от множественных нарушений до асимптоматического
93% случаев возникают de novo; 7% наследуются
Наиболее известный пренатальный маркер – конотрункальные аномалии (fetal conotruncal
anomaly) или врожденные пороки сердца– показание для исследования микроделеции
методом FISH
169 пациенток с нормальным кариотипом плода и аномальными результатами УЗИ

11. Bilardo et al. Increased nuchal translucency in euploid fetuses—what
should we be telling the parents? // Prenatal Diagnosis. 2010

12. Bilardo et al. Increased nuchal translucency in euploid fetuses—what
should we be telling the parents? // Prenatal Diagnosis. 2010

13. Наявність вади серця не є обов’язковим
свідченням наявності мікроделеції
22q11.2
З метою
виключення інших
хромосомних
аномалій
необхідно
проведення aCGH

14. 3000 пренатальных образцов
Исследование с помощью стандартного кариотипирования (АЖ+ВХ) и СГГ
(BAC; BlueGnome)
В 0,8% случаев стандартный кариотип не позволил определить наличие
хромосомных аномалий; из них 0,6% - в группе с низким риском (возраст +
обеспокоенность родителей)
НО !!!
В 6,3% (6 из 95) пациентов в группе высокого риска (при проведении
ультразвукового исследования выявлены аномалии) стандартный кариотип
не позволил определить наличие хромосомной аномалии, выявленной
методом СГГ

15. 5,5% - микроаномалии, не
выявленые при стандартном
краиотипипровании

16. Стандартный
кариотип
При условии соответствия
стандартам качества (450
дисков на гаплоидный
геном, GTG-banding)
Shaffer et al. Experience with microarray-based
comparative genomic
hybridization for prenatal diagnosis in over 5000
pregnancies // Prenatal Diagnosis. - 2012

17. Shaffer et al. Experience with microarray-based comparative genomic
hybridization for prenatal diagnosis in over 5000 pregnancies // Prenatal Diagnosis. - 2012

18. 100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
6-8 нед
8-10 нед
16
10-12 нед 12-14 нед
14
Количество замерших
беременностей с
выявленными ХА, %
Количество замерших
беременностей с
выявленными ХА, %
Исследование кариотипа ворсин хориона замерших
беременностей ( из 70 исследований в 45 случаях
выявлены анеуплоидии)
12
10
8
6
4
2
0
5
7
8
10
13
14
15
16
18
19
20
21
22 половые 3n
хромосомы
4n
10n

19. Gao J., et al. // Molecular Cytogenetics. – July 2012
Исследование кариотипа 100 самопроизволных абортов
Метод
Уровень детекции хромосомных
аномалий
aCGH
93,4%
Стандартний каріотип
77%
FISH
68,9%

20. Консультирование пациентов с ПНБ
Кол-во самоабортов
1
1
1
2
2
2
2
2
3
3
3
3
3
3
3
Хромосомнаям
аномалия
неизвестно
Нет
Подтверждена
неизвестно
Нет 1
Нет2
Подтверждена 1
Подтверждена 2
неизвестно
Нет 1
Нет 2
Нет 3
Подтверждена 1
Подтверждена 2
Подтверждена 3
Повторный риск
15%
12%
22%
25%
24%
28%
34%
45%
40%
46%
49%
55%
51%
58%
68%
Рекомендации
PGS?
PGS
PGS
PGS !
PGS!!
PGS!!!

21. Алгоритм діагностики
Алгоритм пренатальної диагностики
Каріотипування
Без патології
Вади розвитку
Досліджуваний
матеріал:
-Кордова кров
-Ворсини хоріону
-амніоцити
-Тканина плода
Відсутність
мітотичної
активності
клітин
Складні
хром.перебудови,
маркерні хромосоми,
транслокації
FISH
Sagoo G.S. et al. Genet Med. 2009; 11(3):139-46
Siggberg L. et al. Am J Med Genet. 2010; 152A(6): 1398-410
Shaw-Smith C. et al. J Med Genet. 2004; 41: 241-8
Патологія
каріотипу
aCGH
Консультування,
дослідження
батьків
21

22. Допологова діагностика
Вада розвитку серця плода: дефект
міжшлуночкової та міжпередсердної
перетинок, єдиний артеріальний стовбур
46,XY,15ps+,22ps+
Хромосомна патологія виключена.
22

23. Допологова діагностика
Хромосомна патологія виключена -
46,XY,15ps+,22ps+
вагітність збережена, дитина
народжена, успішно оперована, живе й
розвивається,
23

24. Випадок
• Ж. 38 р.
Ч 35 р. астенозооспермія
Безпліддя ІІ, чоловічий ф-р
Уражена дитина перенесла 2 балонізації у Центрі дитячої кардіології та кардіохірургії
2
arr (1-22)x2,(XY)x1,2p16.3(51,314,401-51,510,932)x1
Ch
Size
2 (loss)
0,2 Mb
Genes
Associated
pathology
Pathol | CNV
59% (?) | 0%
24

25. Клінічні варіанти з аналогічною перебудовою 2p16.3x1
25

26. Випадок
Пренатальна діагностика
Биоптат плаценты, 19 нед
Вагітність І у 41 рік, МВВР
Вагітність ІІ – гіпоплазія носових кісток,
мікрогенія, синдром Денді-Уокера
FISH: центромерні зонди 13,18,21,X,Y
локус-специфічні – 15, 22
Гібридизації вказаних проб на маркерній
хромосомі не було
Скеровані на aCGH.
46,XY, + mar.arr 11q23.3q25x3,22q11.1q11.21 x3

27. Випадок
Завмерла вагітність.
Каріотип не отримано
arr CGH 15q25.1q26.3 x 1 (24 Mb)

28. Висновки
• Медико-генетичне консультування та обстеження є
невід’ємною частиною медичної допомоги вагітним
• У випадку нормального каріотипу плода та
наявності УЗ-ознак вад розвитку, а також у випадку
неможливості отримання каріотипу (завмерлі
вагітності) доцільним є застосування високоточних
методів молекулярно-цитогенетичної діагностики
• Розвиток генетичних технологій дозволяє не лише
встановити діагноз на різних етапах онтогенезу , а й
розрахувати повторні ризики та забезпечити
народження здорових дітей у носіїв генетичних
аномалій.
• Інтерпретація результатів генетичних досліджень
повинна здійснюватись виключно спеціалістом,
обізнаним з тонкощами конкретного дослідження

29. “Our goal is to preserve the past
using 21st century technology”
James Dewey Watson
Дякую за увагу
(044) 592 21 78
Клініка репродуктивної медицини
«НАДІЯ»
www.ivf.com.ua
29