O documento descreve testes para identificar aminoácidos e ligações peptídicas em proteínas através dos métodos da ninhidrina e biureto. O teste da ninhidrina identificou apenas o aminoácido livre glicina, enquanto o teste de biureto detectou ligações peptídicas nas proteínas ovoalbumina e gelatina.

1. REAÇÕES DE CARACTERIZAÇÃO DE AMINOÁCIDOS E PROTEÍNAS
INTRODUÇÃO
Proteínas são macromoléculas naturais com uma ou mais cadeias polipeptídicas
, isto é, são polímeros de aminoácidos; constituem 50% ou mais da matéria seca
celular, sendo fundamentais tanto no aspecto estrutural como funcional. As
proteínas podem ser separadas umas das outras e de outros tipos de moléculas
através de métodos baseados em certas propriedades características , tais como
solubilidade , peso molecular , carga elétrica e afinidade por determinados
compostos. É também possível caracterizar as proteínas por reações de
precipitação e coloração.
OBJETIVOS
Identificação de aminoácidos e ligação peptídica pelos métodos da Ninhidrina e
Biureto.
MATERIAL
 Ovoalbumina 1%
 Gelatina 1%
 Glicina 1%
 H2O Destilada
 NaOH 6N
 Solução de Ninhidrina
 Reagente de biureto
 Pipetas 5ml e pêra
 Banho-maria a 100°
 Tubos de ensaio/ estantes para tubos de ensaio

2. PROCEDIMENTOS
1° ETAPA: Teste de Ninhidrina (Identificar somente aminoácidos livres)
Essa reação é dada pela presença do amino grupo livre e possibilita inclusive a
determinação quantitativa do aminoácido – formação de composto colorido.
1. Numerar os 4 tubos de 1 á 4.
2. Colocar em cada tubo 3ml de solução de ovoalbumina, gelatina, glicina e
água, respectivamente.
3. Adicionar 1 ml de Ninhidrina.
4. Aquecer em banho-maria por 10 minutos e observar.
2°ETAPA: Teste de Biureto
Essa reação é dada por substância que contêm no mínimo duas ligações
peptídicas(tripeptídeo). Sendo assim, essa reação é positiva para todas as
proteínas , graças as suas ligações peptídicas. O íon cobre fornecido por uma
solução diluída e alcalina de CuSO4 se complexa com os grupos aminos as
ligações peptídicas desenvolvendo uma coloração violeta.
1. Numerar tubos 4 tubos de 1 á 4
2. Colocar em cada tubo 3ml de solução de ovoalbumina, gelatina,
glicina e água, respectivamente.
3. Adicionar 0,5 ml de NaOH e agitar com cuidado.
4. Adicionar a cada tubo 3 gotas de reativo de Biureto.

3. RESULTADOS
ETAPA 1 TUBOS DE ENSAIO EM BANHO MARIA 1ML DE NINHIDRINA +
10 MINUTOS EM BANHO-MARIA
Tubo 1 -> Ovoalbumina = NÃO OCORREU REAÇÃO
Tubo 2 -> Gelatina = NÃO OCORREU REAÇÃO
Tubo 3 -> Glicina = HOUVE REAÇÃO ( VIOLETA ESCURO)
Tubo 4 -> H20 = NÃO HOUVE REAÇÃO PEPTÍDICA
ETAPA 2 TUBOS DE ENSAIO + 0,5ml DE NaOH + 3 GOTAS DE REATIVO DE
BIURETO
Tubo 1 -> Ovoalbumina = REAÇÃO PEPTÍDICA
Tubo 2 -> Gelatina = REAÇÃO PEPTÍDICA
Tubo 3 -> Glicina = NÃO HOUVE REAÇÃO
Tubo 4 -> H20 = NÃO HOUVE REAÇÃO