2. Coloración de Ziehl-Neelsen
Franz Ziehl (1857-1926), propuso tan sólo emplear
ácido carbólico en lugar de anilina y Friedrich Karl A.
Neelsen (1854-1894), cambió la genciana por fucsina.
Es mérito de Paul Ehrlich. Fundamentó su método en el
carácter AAR, utilizando ácido nítrico y coloreando con
violeta de genciana o con fucsina, fortificadas por la
presencia de anilina disuelta en agua
Paul Ehrlich comunicó su descubrimiento el 1
de mayo de 1882
3. Fundamento
El mecanismo de la ARR es doble y requiere la
interacción química con los ácidos micólicos y
glicolípidos y péptidos de la pared celular de las
micobacterias con la Fucsina
Ac. Micólico
Los ácidos micólicos (complejo Fucsina-Pared)
confieren la propiedad de resistir la decoloracíón
con alcohol-ácido, después de la tinción con
colorantes básicos
La coloración clásica de Ziehl-Neelsen requiere
calentamiento para que el colorante atraviese la
pared bacteriana que contiene ceras, así como
aumenta la energía cinética de las moléculas del
colorante facilitando su entrada a las bacterias
4. Control para la coloración de ZN
Control positivo: Muestra positiva se le agrega unas gotas de Hipoclorito
de Sodio se realizan extendidos cortos se dejan secar y se guardan
protegidos de la luz.
Control negativo: Extendidos con muestra negativa. Se procesan igual a C+
04
05
06
C
(+)
C
(-)
5. Defectos de la coloración
Falsos positivos en la
coloración de ZN
• Transferencia de bacilos de
una lámina a otra.
• Precipitados de colorante no
filtrados.
• Decoloración deficiente.
• Láminas reutilizadas.
• Error administrativo
Falsos negativos en la
coloración de ZN
• Toma, transporte, conservación
inadecuada de las baciloscopias.
• Muestra insuficiente en el
extendido.
• Técnica de coloración incorrecta.
• Observación microscópica
inadecuada.
• Error administrativo
6. Procedimiento
Aplicar la Fucsina Fenicada
Caliente suavemente hasta
que se inicien vapores por 5
minutos
Deje enfriar y lave
suavemente con agua
Lave suavemente con agua y
deje secar
Cubra con azul de metileno por 2
minutos o estandarice el tiempo
Lave suavemente con agua
Cubra con alcohól ácido al 3% V/V
por 1 minuto o mas si es necesario.
No exceder 2 minutos.
