Diagnostico de amebiasis en Nicaragua

1. Amibiasis en León,
Nicaragua:sobrediagnóstico y
sobretratamiento.
Byron Leiva MSc., PhD.
Departamento de Microbiología y Parasitología
Facultad de Ciencias Médicas
UNAN- León

2. Entamoeba histolytica
 E. histolytica es la ameba causante de la
disentería amebiana.
 Es indistinguible morfológicamente de E.
dispar
 La patogenicidad en E. histolytica se
debe a la presencia de la lecitina de
galactosa-galactosamina en la superficie
de los trofozoito, responsables de la
adhesión a las células intestinales.
 Es más frecuentemente en la región
ileocecal del intestino grueso.

3. Ciclo de vida de Entamoeba histolytica

4. Actualmente el hallazgo de amebas en heces
plantea la interrogante: ¿es
Entamoeba histolytica o Entamoeba dispar?

5. Entamoeba moshkovskii
Tshalaia in 1941, Moscow, sewage.
Dreyer in 1961, Laredo TX, human.
(E. histolytica like laredo)

6. Patología
 Ulceras intestinales como cráteres o
frascos que son debidas a la
degradación enzimática del tejido
 La infección puede dar como
resultado una apendicitis,
perforaciones, granulomas,
pseudopólipos.

7. Síntomas
 Agudos: Disentería frecuente (5 a 10
veces) con mucosa necrótica y dolor
abdominal.
 Crónicos: Episodios recurrentes de
disentería (moco y sangre en las
heces). Pueden presentarse disturbios
intestinales y constipación.

8. Tratamiento
 La OPS / OMS recomienda que, cuando sea posible, E.
histolytica debe ser diferenciada de especies morfológicamente
similares y se trata adecuadamente.
 Si E. dispar es la única especie identificada, entonces no hay
tratamiento y deben buscarse otras causas.
 La OPS / OMS recomienda interrumpir el tratamiento de
pacientes asintomáticos, cuando sólo un diagnóstico
morfológico de la materia fecal está disponible (es decir, E.
histolytica / E. dispar / E. moshkovskii).
 La infección asintomática intestinal con E. histolytica deben ser
tratados con amebicidas luminales, como la paromomicina y
furoate de diloxanida. Un curso de 10 días a 30 mg / kg por día
(dividido en 3 dosis diarias) es típico.
 En la enfermedad invasora intestinal y extraintestinal son
procesos anaeróbicos y deben ser tratados con amebicidas
tejidos, como el 5 - nitroimidazoles (por ejemplo,
metronidazol), que son fácilmente absorbidos en sangre, (750
mg, 3 veces al día, durante 5-10 días)

9. Métodos de diagnóstico
Microscópico
Fresco:
- Solución salina y lugol
- SAF(Sodium acetate-acetic acid formalin
- Formalin-ethyl acetate sedimentation
8 µm
E.histolytica/E.dispar 40X Entamoeba hartmanni 40X Entamoeba coli 40 X

10. Tinciones: Hematoxilina Entamoeba histolytica
Trofozoito Quiste
Ziehl Neelsen
Cryptosporidium

11. Método enzimático:
Triage
Adesina
ELISA
Anticuerpos monoclonales anti-adhesina
(N-acetil-D-glactosamine-lectina)
Inmunocromatografía:
Detección de antígenos específico

12. Molecular : PCR
Una parte de heces
+ 4 etanol
E. dispar
QIAamp DNA
mini Kit
E. histolytica
Extracción de ADN

13. Estudio realizado en León
Resultados

14. Comparación de examen microscópico de las heces en
centros de salud y Departamento de Microbiología, UNAN-
León.
Centros salud Dpto. de Microbiologia
Directo Directo Otros*
N (%) N (%) N (%)
Parasitos detectados
Protozoan
(32.8)
Blastocystis hominis 24 (18) 47 (35) 44 2
Cryptosporidium sp. 0 (0) 0 (0) 1 (0.7)3
Cyclospora cayetanensis 0 (0) 0 (0) 3 (2.2)3
Dientamoeba fragilis 0 (0) 0 (0) 3 (2.2)2
E. histolytica/E. dispar 32 (24) 6 (4,5) 8 (6)2
(16.4)
Giardia intestinalis 18 (13.4) 21 (15,7) 22 2
Isospora belli 0 (0) 0 (0) 1 (0.7)3
Helminths
Ascaris lumbricoides 5 (3.7) 3 (2.2) 5 (3.7)1
Hymenolepis nana 0 (0) 3 (2.2) 8 (6)1
Trichuris trichiura 3 (2.2) 7 (5.2) 7 (5.2)1
*Formalin-ethyl acetate sedimentation technique 1, Iron Hematoxylin staining2 and modified Ziehl- Neelsen staining3

15. Examen microscópico Entamoeba histolytica/E. dispar y PCR,
en un grupo de pacientes con diarrea y grupo control
Grupo de con Grupo control
diarrea N= 480
N= 134
Ex. Ex.
Especies (PCR) Microscópico Microscópico
=8 =58
Entamoeba dispar 10 (7.5%) 34 (8%)
Entamoeba 2 (1.5%) 3 (0.6%)
histolytica
Total 12 37

16. Sorediagnóstico y sobretratamiento
Estudio de Control de Estudio retrospectivo
calidad
2 Centros de salud
15 laboratorios de Expediente de100 pacientes:
Centros de salud, del Con síntomas intestinales,
Dpto. de León edad, examen microscópico
de heces

17. Estudio de Control de Calidad:
Panel de 10 muestras con parásitos intestinales
No. Parasitos
01 Quistes de Endolimax nana
02 Huevos de Trichuris trichiura
03 Quistes de Giardia intestinalis
04 Huevos de Ascaris lumbricoides
05 Huevos deTaenia sp.
06 Quistes de Entamoeba coli
07 Huevos de Hymenolepsis nana
08 Quistes Entamoeba histolytica /
E. dispar
09 Negativo
10 Quistes de Entamoeba hartmanni

18. Resultados

19. Control de calidad en 15 laboratorios en el
Dpto. de León
Fracaso en la identificación de parásitos
Parasitos V. positivo False (+)
E. histolytica/E. dispar 15 15
Entamoeba hartmanni 1 0
Endolimax nana 7 2
Taenia sp. 6 1
Giardia intestinalis 11 1
Entamoeba coli 12 1
Trichuirs trichiura 13 1
Ascaris lumbricoides 14 1
Hymenolepsis nana 14 0

20. Evaluación de condiciones de trabajo en 15 laboratorios
del departamento de León
Parámetros evaluados N= 15 (%)
Trabajo permanente en 7(47)
coproparasitología
Figuras y libros en el 8 (53)
laboratorio
Grado académico de Lic. 1 (7)
Ocular micrométrico 0 (0)
Uso de Iodo, en examen 13 (87)
general

21. Grado de profesionalidad de los encargados de
realizar examen parasitológico
1, 7%
2, 13%
5, 33%
7, 47%
auxilar técnico medio técnico superior licenciado

22. Tratamientos con drogas anti-parasitarias en 100
pacientes con síntomas gastro intestinales en dos
centros de salud
E. Otros* No ex.
Droga histolytica/ parasito microsc Total
E. dispar
Metronidazol 23 12 21 56
Albendazol 0 15 17 32
Tinidazol 5 0 2 7
Metro+Alb. 4 0 0 4
Tinida+Alb. 0 0 1 1
Total 32 27 41 100
*G. intestinalis 9

23. Tratamientos con drogas anti-parasitarias en
100 pacientes con síntomas gastro intestinales
en dos centros de salud
E. Otros* No Ex.
Droga histolytic/ parasito microsco Total
E. dispar
Metronidazol 23 12 21 56
Albendazol 0 15 17 32
Tinidazol 5 0 2 7
Metro+Alb. 4 0 0 4
Tinida+Alb. 0 0 1 1
Total 32 27 41 100
Sobre tx.** 30 ? 21 51+
*G. intestinalis 9 ** Estimado

24. Conclusiones
 En los laboratorios de centros de salud, hay
confusion de E. histolytica/E. dispar con otras
amebas
 Los helmintos son mejor identificados que los
protozoos.
 Todos los pacientes fueron tratados con algun
antiparasitario
 El uso de metronidazol fue en un 56% de los
pacientes

25. Consecuencias del sobrediagnostico
 Mal manejo de pacientes con problemas intestinales
 Desarrollo de resistencia
 En parásitos y bacterias
 Alteración de la flora normal
 Efectos colaterales del tratamiento
 Impacto económico
 Metronidazol/Tinidazol costo 70.000 US dólar/año
en León

26. Seminario personal de laboratorio clínico, Dpto. Leon.

27. UNAN-León - 200 años